母体血中の終末糖化産物による胎児形態異常発生のメカニズムの解析

• Project/Area Number: 18K09845
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 57070:Developmental dentistry-related
• Research Institution: Tokyo Medical University
• Principal Investigator: 太田 一正 東京医科大学, 医学部, 准教授 (30307376)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 石塚 洋一 東京歯科大学, 歯学部, 准教授 (10637664)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2025-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000); Fiscal Year 2021: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000); Fiscal Year 2020: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000); Fiscal Year 2019: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000); Fiscal Year 2018: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
• Keywords: 終末糖化産物 / 終末糖化産物受容体 / AMP活性化プロテインキナーゼ / 異常発生

Outline of Annual Research Achievements

母体栄養状態が胚発生におよぼす影響についてはその結果がもたらす大きさにもかかわらず，分子レベルでの解析は進んでいない.特に，糖尿病患者が増加の一途を辿り続ける中，高血糖による催奇形メカニズムの解明は重要である.高血糖状態により生じる終末糖化産物(advanced glycation end products; AGEs)が 胎児発生に影響を与える可能性が十分に考えられる. そこで， AGEsの細胞増殖に対する影響とストレス応答シグナル伝達系の関連を調べるため，いくつかの培養細胞株を用いてAGE-ウシ血清アルブミン(BSA)による影響を検討した.AGE-BSAはグリセルアルデヒドで糖化したもの(GA-AGE-BSA)とグルコースで糖化したもの(Glu-AGE-BSA)を用いた.WST-8を用いた細胞増殖試験の結果，GA-AGE-BSAでは，ヒト口腔扁平上皮がん細胞株Ca9-22およびヒト唾液腺腫瘍細胞株HSGに対する増殖抑制効果が認められた.細胞増殖の抑制がアポトーシスの誘導によるものかを確認するため，カスパーゼ３の活性化を，また，AGE受容体を介したシグナル伝達経路の関与を確認するため，AGE受容体の発現をウエスタンブロットで解析した．しかし，カスパーゼの活性化およびAGE受容体の発現は認められず，AGEが直接関わるシグナル伝達経路とは異なる経路であることが考えられた．さらに，細胞増殖やストレス応答に関わるAMP活性化プロテインキナーゼ(AMPK)やMAPキナーゼ(JNK，p38，ERK)についても，抗リン酸化抗体を用いたウエスタンブロットによる解析を行った.先行研究ではAGEによるMAPキナーゼ経路の活性化が報告されていたが，本結果はこれらと異なり，AMPKやMAPキナーゼの活性化は認められなかった.

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

研究組織が脆弱な状況が続いており，特に人員不足により進捗状況は遅れている．

Strategy for Future Research Activity

2023年度に引き続き培養細胞を用いた長期的な終末投函産物の影響解析を中心に検討を進めていく予定である．