腫瘍融解アデノウイルスの骨軟部肉腫に対する放射線感受性増幅効果とそのメカニズム

Research Project

Project/Area Number	18K15242
Research Category	Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
Allocation Type	Multi-year Fund
Review Section	Basic Section 50010:Tumor biology-related
Research Institution	National Cancer Center Japan
Principal Investigator	小松原将国立研究開発法人国立がん研究センター, 中央病院, がん専門修練医 (60743002)
Project Period (FY)	2018-04-01 – 2020-03-31
Project Status	Discontinued (Fiscal Year 2019)
Budget Amount *help	¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000) Fiscal Year 2020: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000) Fiscal Year 2019: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2018: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Keywords	放射線感受性 / アポトーシス / 骨軟部肉腫 / 腫瘍融解ウイルス製剤
Outline of Annual Research Achievements	HT1080(Fibrosarcoma)とは別の軟部肉腫細胞株（SW684(Fibrosarcoma）)に関しても、コントロール、OBP-702単剤、放射線療法単剤、OBP-702＋放射線療法併用の4群でin vitroで加療を行い、併用療法の相加相乗効果の評価を行った。抗腫瘍効果をXTTアッセイ、相加相乗効果をCalcuSyn softwareを用いて解析を行った。結果として、HT1080と同様にOBP-702と放射線を併用することで抗腫瘍効果、相加相乗効果を認めるものの、HT1080ほどの効果はないことを確認した。これにより、同種の肉腫細胞によっても、OBP-702の併用による効果に差が生じるが確認された。また、別に同様の4群の処理を行った細胞のタンパクを回収し、それぞれのアポトーシス経路やDNA損傷修復過程を中心とした機序におけるターゲットの選定し、OBP702が抗アポトーシス蛋白（MCL-1、BCL-XL)を抑制することで腫瘍細胞のアポトーシスを誘導する可能性が確認された。上記の裏付けのためにsiRNAでMCL-1,BCL-XLの発現を抑制し、放射線感受性を評価したところ、ともに増強することを確認し、さらにMCL-1よりもBCL-XLの方が優位にアポトーシスを誘導することも示唆された。また、OBP-702を使用することで、特定のタンパク発現（E1A,E2F1,p53）により、上記の抑制効果が誘導されていることも示唆された。in vivoにおいては、併用群で優位に抗腫瘍効果を認め、腫瘍組織免疫染色でも腫瘍増殖能の低下を認めた。現在、今までの結果と上記結果に基づき、論文執筆中である。