B型肝炎での血清エクソソーム中マイクロRNAを用いた新規肝発癌予測マーカーの開発

Research Project

Project/Area Number	18K15792
Research Category	Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
Allocation Type	Multi-year Fund
Review Section	Basic Section 53010:Gastroenterology-related
Research Institution	Osaka City University
Principal Investigator	小塚立蔵大阪市立大学, 大学院医学研究科, 病院講師 (10726657)
Project Period (FY)	2018-04-01 – 2022-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2020)
Budget Amount *help	¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000) Fiscal Year 2020: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2019: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000) Fiscal Year 2018: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Keywords	B型肝炎 / エクソソーム / マイクロRNA / 肝発癌
Outline of Annual Research Achievements	3年度目はHLA-DQA1/DRB1-SNPと肝発癌、HLA-DQA1/DRB1-SNP とmiRNAの関係性について検討した。B型慢性肝疾患193例のうち、DNAを採取できたのは、150例（78%）であった。その内訳は、NA投与103例のうち86例（発癌群11例、非発癌群75例）、NA非投与90例のうち64例（発癌群33例、非発癌群31例）であった。 NA投与例において、発癌群と非発癌群におけるHLA-DQA1/DRB1 AA genotypeの割合を検討したところ、発癌群ではAA genotypeの割合は46%であり、非発癌群の20%と比べて高い傾向を示した（p=0.074）。 NA非投与例において、発癌群と非発癌群におけるHLA-DQA1/DRB1 AA genotypeの割合を検討したところ、発癌群ではAA genotypeの割合は42%であり、非発癌群の13%と比べて有意に高かった（p=0.0086）。 2年度目にNA非投与例において22種類のmiRNA発現パターンを組み合わせると肝発癌が予測できることを示した。また、この22種類のmiRNAのうち、肝線維化進展に伴って変化するmiRNAと共通するものは、miR-3648、miR-3665、miR-122-5p、miR-3960、miR-4739であった。この5つのmiRNAは肝発癌および肝線維化進展と共通するmiRNAであるため、HLA-DQA1/DRB1-SNPとの相関性について検討した。AA genotypeと関係性については、miR-3648（p=0.72）、miR-3665（p=0.17）、miR-122-5p（p=0.32）、miR-3960（p=0.22）、miR-4739（p=0.62）のいずれのmiRNAにおいても有意な相関は認めなかった。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 本年度は、HLA-DQA1/DRB1-SNPと肝発癌、HLA-DQA1/DRB1-SNP とmiRNAの関係性について検討した。NA投与例とNA非投与例のいずれにおいても、HLA-DQA1/DRB1 AA genotypeと肝発癌の相関性を認めた。一方、肝発癌および肝線維化進展で共通する5つのmiRNAとHLA-DQA1/DRB1 AA genotypeの関係性を検討したが、いずれのmiRNAでも相関性は認めなかった。当初の計画は順調に進展していると考えられるが、マイクロアレイ発現解析のvalidationが必要であり、NA非投与例の検体を用いてリアルタイムPCRとの相関性を検討する予定である。
Strategy for Future Research Activity	追加解析として、NA非投与例で肝発癌の予測に用いた22種類のmiRNAで、マイクロアレイ発現解析とリアルタイムPCRにおけるmiRNAの発現の相関性について検討する。