Investigation of mechanisms of immunosuppression by regulatory dendritic cell-derived exosomes

• Project/Area Number: 18K16271
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 55010:General surgery and pediatric surgery-related
• Research Institution: National Center for Child Health and Development
• Principal Investigator: 西尾 佳明 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, RI管理室, 共同研究員 (80727347)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2020-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2019)
• Budget Amount: ¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000); Fiscal Year 2020: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2019: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2018: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
• Keywords: 制御性樹状細胞 / エクソソーム / 移植片対宿主病 / 免疫抑制

Outline of Annual Research Achievements

本研究課題は移植片対宿主病(Graft versus Host Disease: GvHD)における制御性樹状細胞由来エクソソーム(regulatory dendritic cellderived exosome: rDCexo)の免疫抑制能を検討することを目的とした。前年度、C57BL/6(B6)マウス由来T細胞をB6♀×DBA2♂(B6D2F1:BDF1)へ移植するGvHDモデルを想定していることからin vitroにおいてB6マウス由来T細胞とBDF1マウス由来樹状細胞を用いたリンパ球混合反応試験(Mixed Lymphocyto Reaction: MLR)を用いてBDF1由来制御性樹状細胞(rDC)の免疫抑制能を検討した。しかし、BDF1マウス 由来骨髄細胞から分化誘導したrDCはB6マウス由来T細胞を用いたMLRにおいてBDF1マウス由来骨髄細胞から分化誘導した通常の樹状細胞(conventional DC: cDC) によるB6マウス由来T細胞の増殖を抑制しなかった。 そのため、当該年度においてはB6由来rDCexoを用いてB6→BDF1のマウスGvHDモデルにおけるrDCexoの免疫抑制能を検討することとした。 B6由来骨髄細胞から分化誘導したrDCにはMLRにおいてT細胞増殖抑制能が認められ、rDC培養上清からはrDCexoが回収された。更に、回収されたrDCexoを用いたMLRによるT細胞の増殖抑制試験ではT細胞の増殖が抑制傾向にあり、同T細胞のmRNA発現解析ではGvHD誘導の主要因とされる細胞傷害性顆粒であるPerforinおよびGranzyme Bの発現、T細胞増殖因子であるIL-2、炎症促進性サイトカインであるTNFαの発現が低下しており、rDCexoによるT細胞による細胞傷害抑制およびT細胞増殖抑制、炎症抑制能が示唆された。