SNP解析に基づいた感染性流産に関わる宿主因子の解析

• Project/Area Number: 18K16788
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 56040:Obstetrics and gynecology-related
• Research Institution: Osama Woman's and Children's Hospital
• Principal Investigator: 吉村 芳修 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪母子医療センター(研究所), 免疫部門, 研究員 (90771197)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2020-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2019)
• Budget Amount: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000); Fiscal Year 2020: ¥520,000 (Direct Cost: ¥400,000、Indirect Cost: ¥120,000); Fiscal Year 2019: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000); Fiscal Year 2018: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000)
• Keywords: 習慣性流産 / SNP解析 / 流産 / 感染症 / 流早産 / SNP

Outline of Annual Research Achievements

ヒトの流早産の原因としてウレアプラズマなどの病原体が関与している事が明らかとなってきているが、ヒト側の遺伝的背景の関与については未だ不明な点が多い。そこで、習慣性流産の患者を対象としたSNP解析を行い、その結果に基づいて抽出した病態との関連が疑われるSNPを有する候補遺伝子を研究の対象とした。特に病原体の排除に関わる補体蛋白のSNPに着目し、そのレコンビナント蛋白を作成し、野生型と変異型での生理活性の比較を行った。当該蛋白はSNPにより１つのアミノ酸の置換を有していた。レコンビナント蛋白の発現精製にはバキュロウイルス、昆虫細胞(IPLB-Sf21)の系を用いて発現を行った。大量培養系を用いて解析に必要なレコンビナント蛋白の十分量を確保した。また、ヒスチジンタグを用いたアフィニティーカラムクロマトグラフィー、イオン交換カラム、ゲル濾過による精製を用いて高純度の蛋白を精製した。野生型・変異型の両レコンビナント蛋白を用いたグラム陰性桿菌に対する殺菌能の比較試験、基質の分解試験、赤血球の溶血試験を行ったが、いずれも有意な差を認めることは出来なかった。以上の結果より解析対象とした補体蛋白の変異については生化学的な解析において病態との関連を明らかにすることが出来なかった。本研究期間で解析対象とした蛋白では生理活性に有意差を見いだすことは出来なかったが、SNP解析の結果から病態との関連が疑われる遺伝子は他にも複数存在するため、今後の研究の対象となり得ると考えられる。

Research Products

• [Journal Article] Association of PIK3CA and MDM2 SNP309 with Cervical Squamous Cell Carcinoma in a Philippine Population. (2019)
  • Author(s): Tantengco OAG, Nakura Y, Yoshimura M, Llamas-Clark EF, Yanagihara I.
  • Journal Title: Asian Pac J Cancer Prev. Volume: 20 Issue: 7 Pages: 2103-2107
  • DOI: 10.31557/apjcp.2019.20.7.2103
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Type II restriction modification system in Ureaplasma parvum OMC-P162 strain (2018)
  • Author(s): Wu Heng Ning、Nakura Yukiko、Yoshimura Michinobu、Gaddi Tantengco Ourlad Alzeus、Nomiyama Makoto、Takayanagi Toshimitsu、Fujita Tomio、Yasukawa Kiyoshi、Yanagihara Itaru
  • Journal Title: PLOS ONE Volume: 13 Issue: 10 Pages: 0205328-0205328
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0205328
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] オウム病による国内初の妊産婦死亡例 (2018)
  • Author(s): 清水可奈子、西島浩二、河原和美、板野陽通、吉村芳修、柳原格、今村好章、黒川哲司、吉田好雄
  • Journal Title: 産婦人科の実際 Volume: 67 Pages: 445-450
• [Presentation] 菌血症由来Pantoea ananatisの薬剤耐性遺伝子解析 (2020)
  • Author(s): 第31回日本臨床微生物学会総会・学術集会
  • Organizer: 吉村芳修、戸川温，徳重智絵美，松永彰，柳原格、高田徹
• [Presentation] Pantoea anatis 臨床分離株の全ゲノム解析 (2020)
  • Author(s): 吉村 芳修，呉 恒寧，伊東 和俊，柳原 格
  • Organizer: 第 93 回日本細菌学会総会
• [Presentation] Klebsiella pneumoniae 莢膜多糖体血清型K1，K2検出カセット Klebsiel lapneumoniae Serotype K1/K2 Rapid Testing Cassetteの有用性. (2019)
  • Author(s): 徳重智絵美, 戸川温, 吉村芳修.
  • Organizer: 第30回 日本臨床微生物学会 総会・学術集会.
• [Presentation] Pathogenesis of Ureaplasma infection in perinatal and neonatal medicine. (2018)
  • Author(s): Michinobu Yoshimura, Fumiko Nishiumi, Heng Ning Wu, Yukiko Nakura, Itaru Yanagihara.
  • Organizer: The Joint Congress of the 7th Meeting of the Asian Organization for Mycoplasmology (AOM) and the 45th Meeting of Japanese Society of Mycoplasmology (JSM).
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Klebsiella pneumoniae菌血症における莢膜抗原型が臨床像に与える影響の検討. (2018)
  • Author(s): 吉村芳修, 戸川温.
  • Organizer: 第92回日本感染症学会学術講演会
• [Presentation] 血液培養からPantoea ananatisが分離された一症例. (2018)
  • Author(s): 戸川温, 吉村芳修, 髙田徹.
  • Organizer: 第88回感症学会西日本地方学術集会
• [Presentation] Type II restriction modification system in Ureaplasma parvum OMC-P162 strain. (2018)
  • Author(s): Heng Ning Wu, Yukiko Nakura, Michinobu Yoshimura, Itaru Yanagihara.
  • Organizer: The Joint Congress of the 7th Meeting of the Asian Organization for Mycoplasmology (AOM) and the 45th Meeting of Japanese Society of Mycoplasmology (JSM).
  • Int'l Joint Research