冷痛覚過敏の治療ターゲットとして展開する炎症時TRPA1チャネルの動態解析
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18K17039
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 57030:Conservative dentistry-related
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
田澤 建人 東京医科歯科大学, 東京医科歯科大学病院, 助教 (30801518)
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| Project Period (FY) |
2021-11-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2018: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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| Keywords | TRPチャネル / 歯髄細胞 / LPS / NO / P38 / 石灰化 / whole mount staining / 歯髄 / TRPA1 / Lyve1 / マクロファージ / ヒト歯髄細胞 / 象牙芽細胞 / 歯髄幹細胞 / 疼痛 |
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| Outline of Research at the Start |
日常生活において歯の冷痛覚過敏は飲食のQOLを著しく低下させる要因である。その原因として、歯頚部くさび状欠損による歯髄の刺激感受性の増加や、歯科治療後の歯髄炎症が考えられるが、根本的な治療法の確立には至っていない。近年歯髄においてTRPA1チャネルの発現が明らかになっており歯髄の冷痛覚過敏への関与が示唆されている。
本研究では、炎症時TRPA1チャネルの動態を解析することで、冷痛覚過敏とTRPA1チャネルの関連を明らかにすることを目的とする。
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| Outline of Annual Research Achievements |
歯髄細胞におけるTRPA1の生理機能解析および発現誘導メカニズムの解析を行った。LPSにより誘導されるTRPA1発現は、NFkB阻害剤によって抑制されなかったが、一酸化窒素ドナーであるNOR5刺激によりTRPA1発現が増加したことから、LPS刺激により誘導された一酸化窒素(NO)がTRPA1発現誘導に関与することを明らかにした。NOの下流シグナル解析では、NO刺激によりp38MAPKシグナルが活性化することを明らかにした。以上により、LPS刺激により誘導されるTRPA1発現にはNOにより活性化されるp38MAPKが関与していることが示唆された。TRPA1機能解析においては、TRPA1作動薬により細胞内カルシウムイオン濃度が上昇することを確認し、またTRPA1作動薬により象牙芽細胞関連遺伝子の発現上昇および石灰化結節形成の促進を認めたことからTRPA1は象牙芽細胞への分化および石灰化を亢進することが示唆された。以上の結果はTheAmerican Journal of Pathologyに掲載された。また、炎症歯髄におけるLyve1陽性マクロファージの動態および生物学的役割についても評価した。歯髄におけるLyve1陽性マクロファージはM2-likeの組織常在性マクロファージであり、窩洞形成により炎症により一時的にその数が減少するものの、組織のリモデリングに伴って、定常時レベルまで増加することを明らかにした。さらにLyve1を強制発現されたRAW細胞においては血管新生関連遺伝子の発現が増加し、VEGFAタンパクをコントロールRAW細胞よりも有意に分泌しHUVEC細胞の管腔形成を促進した。これらの結果はScientific Reportsに掲載された。令和6年度は炎症歯髄中、および根尖病変内の免疫細胞の3次元動態を解析すべく、組織透明化標本作成のための条件最適化を検討している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究の当初の目的はすでに達成できているが、より研究を発展させるための新たな研究手法の開発に取り組んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
歯髄炎症時における細胞の3次元動態を評価すべく、透明化標本およびwhole mount stainingの最適化に取り組んでいる。条件の最適化が達成された暁には、歯髄炎時における各種免疫細胞の三次元動態を解析する。
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Report
(5 results)
Research Products
(10 results)
