VEGF-Cによるリンパ管新生効果は，骨再生・修復促進に関与しうるか？

• Project/Area Number: 18K17173
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 57060:Surgical dentistry-related
• Research Institution: Kagoshima University
• Principal Investigator: 柚木 寿理 鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 助教 (80815621)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2025-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2022)
• Budget Amount: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000); Fiscal Year 2020: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2019: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2018: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
• Keywords: リンパ管 / VEGF-C / 骨再生 / リンパ管新生 / 骨造成 / 骨分化

Outline of Annual Research Achievements

本研究は骨再生過程におけるリンパ管の役割の解明と，リンパ管新生誘導による骨再生効果に与える影響を解明し，顎骨欠損に対する新たな治療戦略に必要な知 見を得ることを目的とし実験を行っている. 本研究を遂行するため，C57BL6/Jマウス頭蓋骨に骨欠損領域を形成し，リンパ管新生因子であるVEGF-C添加/非添加 のscaffoldを移植することによって欠損修復を施し，その後の骨再生とリンパ管新生との関連性について分析を進めている. まず，事前の検討により，MSCと骨 補填材を混和した移植体をマウス頭頂骨部に移植することにより，骨増生部位には血管のみならずリンパ管も形成されていることを明らかにした.そこで，骨再 生過程におけるリンパ管の役割を解明するために，8週齢のC57BL6/Jマウスの頭蓋骨へトレフィンバーにて直径4mm(クリティカルディフェクト)の骨欠損モデル を作製し，VEGF-Cをゼラチンハイドロゲルに含有させ欠損部に移植した. 1sham群，2欠損のみ群，3欠損+PBS含有ゼラチン群，4欠損+VEGF-C含有ゼラチン群の各 種対照群を準備し，移植後6週目と8週目にマウスを屠殺して骨形成能 およびリンパ管新生能について評価を行った.評価はμCTによる骨再生量の定量，組織学的評価(HE染色)，リンパ管形成についてはLYVE-1抗体を用いた免疫組織学的観察を行った.しかし，この動物実験モデルの条件では明らかな骨再生能はみとめられ なかったため，まずはBMP等を用いて欠損部に確実に骨再生を促し，免疫組織学的観察にてリンパ管を評価することとした. 現在育休にて研究休止中の為、当該年度の研究実績はなし．

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

産休・育休中のため現在は研究を中断している．

Strategy for Future Research Activity

育休後はすみやかに実験を開始.
今後，LYVE-1抗体等を用いた免疫染色にてリンパ管を染色し，一視野あたりの数や密度をコントロールと比較する. また，リンパ管新生阻害による骨再生の影響 を比較するために，scaffoldにリンパ管新生阻害剤(VEGFR3阻害剤)を含有させ，同様にマウス頭蓋骨欠損モデルを作製し，μCT撮影，H-E染色による組織学的評価，免疫染色によって評価を行う.