Development of a new in vitro culture system in secondary follicles of human children.

Research Project

Project/Area Number	18K19613
Research Category	Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
Allocation Type	Multi-year Fund
Review Section	Medium-sized Section 56:Surgery related to the biological and sensory functions and related fields
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	伊藤美幸京都大学, 医学研究科, 特定病院助教 (00760951)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	佐藤幸保京都大学, 医学研究科, 非常勤講師 (00508236) 杉本実紀京都大学, 農学研究科, 助教 (20243074) 堀江昭史京都大学, 医学研究科, 講師 (30535836) 谷洋彦京都大学, 医学研究科, 特定病院助教 (70615252) Brown John 京都大学, 医学研究科, 講師 (90583188)
Project Period (FY)	2018-06-29 – 2020-03-31
Project Status	Discontinued (Fiscal Year 2019)
Budget Amount *help	¥6,240,000 (Direct Cost: ¥4,800,000、Indirect Cost: ¥1,440,000) Fiscal Year 2020: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000) Fiscal Year 2019: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000) Fiscal Year 2018: ¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
Keywords	未熟卵子 / マウス二次卵胞 / Figla / がん生殖 / 卵子体外培養 / RNAシークエンス
Outline of Annual Research Achievements	次世代シークエンサーを用いたRNAシークエンシングによって、幼若マウスと成熟マウスの二次卵胞における遺伝子発現の差異を明らかにした。具体的には小児モデル(幼若マウス)として10-12日齢(新生仔)、成人モデル(成熟マウス)として8週齢(成獣)を使用。発現変動遺伝子はfold change > 1.5、 p<0.05、95%CIオーバーラップ10%未満と定義した。得られた代表的遺伝子の発現はqRT-PCRによってRNA-seqとは異なるサンプルで確認した。 13893個の遺伝子が同定され、618個が発現変動遺伝子であった。このうち438個が8週齢マウスで発現亢進しており、FiglaやSohlh2などの卵胞発育に重要な役割を果たす性腺特異的転写因子が含まれていた。パスウェイ解析では、1脂質代謝関連遺伝子、2グルタチオン代謝関連遺伝子が有意に亢進していた。