細胞内寄生原虫トリパノソーマの感染宿主細胞アポトーシス抑制による生き残り戦略

• Project/Area Number: 19041014
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 嶋田 淳子 Gunma University, 医学部, 教授 (20211964)
• Project Period (FY): 2007 – 2008
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2008)
• Budget Amount: ¥8,300,000 (Direct Cost: ¥8,300,000); Fiscal Year 2008: ¥4,200,000 (Direct Cost: ¥4,200,000); Fiscal Year 2007: ¥4,100,000 (Direct Cost: ¥4,100,000)
• Keywords: 寄生原虫 / 感染症 / トリパノソーマ / アポトーシス / 活性窒素 / 応用微生物

Research Abstract

これまでにTrypanosoma cruzi感染宿主細胞ではdeath receptorを介するアポトーシスが抑制され、宿主抑制因子cellular FLICE inhibitory protein(c-FLIP)が機能的にはたらいていることを明らかにしてきた。c-FLIPの発現上昇機構を解析する過程で本タンパク質がnitrosylationという分子修飾を受け、ユビキチン化による分解経路が抑制される可能性が示唆された。そこで原虫感染細胞におけるnitrosylationおよびアポトーシス抑制との関連について解析を行った。ヒト由来培養細胞HT1080にT. cruziを感染させ、biotin switch techniqueを用いてnitrosylationされたタンパク質の網羅的解析を試みた。その結果、感染細胞では複数のタンパク質が検出され、その中にはc-FLIP、カスペース-8が含まれていることが明らかとなった。次に、原虫感染における活性窒素産生とアポトーシスの関連を調べる目的で、T. cruzi感染細胞にiNOSの阻害剤であるL-NMMAを添加し、アポトーシス抑制が回復するかについて検討した。Fas抗体によりアポトーシスを誘導6時間後に、T. cruzi感染細胞では非感染細胞に比べアポトーシスは抑制されるが、L-NMMAを添加した場合には、感染細胞でアポトーシス抑制が部分的に回復することが示された。以上より、T. cruzi感染細胞では宿主細胞内で活性窒素の産生が起き、iNOS阻害剤によりアポトーシス抑制が回復することから、活性窒素が本抑制に関与している可能性が示唆された。

Research Products

• [Journal Article] 寄生虫感染とアポトーシス (2007)
  • Author(s): 嶋田淳子
  • Journal Title: Kitakanto Med J 57 Pages: 288-289
• [Presentation] Trypanosoma cruzi感染細胞におけるタンパク質S-nitrosylationとアポトーシス抑制 (2009)
  • Author(s): 嶋田淳子
  • Organizer: 第78回日本寄生虫学会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2009-03-27
• [Presentation] Trypanosoma cruzi感染による活性窒素産生とアポトーシス抑制 (2008)
  • Author(s): 嶋田淳子
  • Organizer: 第7回分子寄生虫・マラリア研究フォーラム
  • Place of Presentation: 松山
  • Year and Date: 2008-10-11
• [Presentation] Trypanosoma cruzi modified an apoptosis inhibitor, c-FLIP, by nitrosylaion in host cells (2008)
  • Author(s): Junko Shimada
  • Organizer: The 8^<th> Awaji International Forum on Infection and Immunity
  • Place of Presentation: 兵庫、淡路島
  • Year and Date: 2008-09-09
• [Presentation] Trypanosoma cruzi感染細胞におけるアポトーシス抑制因子c-FLIPのニトロソ化とその作用機構 (2008)
  • Author(s): 嶋田淳子
  • Organizer: 第77回日本寄生虫学会
  • Place of Presentation: 長崎
  • Year and Date: 2008-04-03
• [Presentation] 南米型トリパノソーマ感染によるアポト-シス抑制c-FLIPの分子修飾 (2007)
  • Author(s): 嶋田淳子、畑生俊光
  • Organizer: BMB2007(日本分子生物学会生化学会合同大会)
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2007-12-12
• [Presentation] Trypanosoma cruzi感染宿主細胞におけるc-FLIPタンパク質の分子修飾 (2007)
  • Author(s): 嶋田淳子、畑生俊光
  • Organizer: 分子寄生虫マラリア研究フォーラム
  • Place of Presentation: 松山
  • Year and Date: 2007-10-28
• [Presentation] Molecular mechanisms of upregulation of the apoptosis inhibitor, cellular FLIP, in Trypanosoma cruzi infected host cells (2007)
  • Author(s): Junko Shimada, Toshimitsu Hatabu
  • Organizer: Awaji international forum on infection and immunity
  • Place of Presentation: Hoogo, Awaji
  • Year and Date: 2007-09-03