ウイルスおよび細胞由来FLIPによる宿主細胞の増殖・感染防御制御機構の解析

• Project/Area Number: 19041034
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 米原 伸 Kyoto University, 生命科学研究科, 教授 (00124503)
• Project Period (FY): 2007 – 2008
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2008)
• Budget Amount: ¥9,100,000 (Direct Cost: ¥9,100,000); Fiscal Year 2008: ¥4,600,000 (Direct Cost: ¥4,600,000); Fiscal Year 2007: ¥4,500,000 (Direct Cost: ¥4,500,000)
• Keywords: 遺伝子 / ウイルス / 細胞・組織 / シグナル伝達

Research Abstract

v-FLIPのWntシグナル増強の分子機構を明らかにするため。酵母を用いたtwo-hybrid法と抗FLAG抗体によってFlag-E8と共免疫沈降するタンパク質の質量分析(LC-MS/MS)解析を実施した。質量分析解析ではPI3キナーゼ制御サブユニットp85が、two-hybrid法ではPI3キナーゼ制御サブユニットp55を同定することができた。さらに解析した結果、1)これらの分子は実際にv-FLIP E8と会合すること、2)E8と強発現することによってE8のWnt3a処理によるTCFの転写活性増強作用をさらに強めること、3)安定型の変異β-catenin発現によるTCFの転写活性増強作用も同じように強めることが明らかとなった。
そして、さらに解析を加える目的で、PI3キナーゼ制御サブユニットp85の発現をshRNAの発現誘導系で実施した。しかし、p85の発現抑制を誘導しても、v-FLIP E8によるWntシグナルの増強作用には、変化が認められなかった。この結果は、v-FLIP E8のp85への結合は、E8のWntシグナル増強作用には関わっていないことを示唆している。現在、E8と会合することが質量分析解析等で示唆されている他のタンパク質の関与を解析している。

Research Products

• [Journal Article] Novel cell death by downregulation of eEF1A1 expression in tetraploids (2009)
  • Author(s): Kobayashi Y, and Yonehara S
  • Journal Title: Cell Death and Differentiation 16 Pages: 139-150
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Mechanism of NKT cell activation by intranasa coadministration of α-galactosylceramide, which can induce cross-protection against influenza viruses (2008)
  • Author(s): Kamijuku H, Nagata Y, Jiang X, Ichinohe T, Tashiro T, Mori K, Taniguchi M, Hase K, Ohno H, Shimaoka L Yonehara S, Odagiri T, Tashiro M, Sata T, Hasegawa H, Seino K
  • Journal Title: Mucosal Immunology 1 Pages: 208-218
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Critical Role for CXC Chemokine Ligand 16 (SR-PSOX) in Th1 response mediated by NKT cells. (2007)
  • Author(s): Shimaoka T.
  • Journal Title: J Immunol 179 Pages: 8191-8199
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Rapid up-regulation of c-FLIP expression by BCR signaling through the PI3K/Akt pathway inhibits simultaneously induced Fas-mediated apoptosis in murine B lymphocytes. (2007)
  • Author(s): Moriyama H.
  • Journal Title: Immunol Lett 109 Pages: 36-46
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Conserved function of caspase-8 in apoptosis during bony fish evolution. (2007)
  • Author(s): Sakata S.
  • Journal Title: Gene 396 Pages: 134-148
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Intervention of MAdCAM-1 or fractalkine alleviates graft-versus-host reaction associated intestinal injury while preserving graft-versus-tumor effects. (2007)
  • Author(s): Ueha S.
  • Journal Title: J Leukoc Biol 81 Pages: 176-185
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Serine protease Omi/HtrA2 targets WARTS kinase to control cell proliferation. (2007)
  • Author(s): Kuninaka S
  • Journal Title: Oncogene 26 Pages: 2395-2406
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Fas下流シグナル分子の多様な生理機能 (2007)
  • Author(s): 米原 伸
  • Organizer: 生理研研究会「細胞死研究の新たな潮流と疾患研究への展開」
  • Place of Presentation: 岡崎市
  • Year and Date: 2007-08-15
• [Presentation] TGF-βによる細胞死誘導活性および細胞死誘導阻害活性の分子機構と制御機構 (2007)
  • Author(s): 米原 伸
  • Organizer: 第72回日本インターフェロン・サイトカイン学会学術集会シンポジウム「新しいサイトカインのシグナル伝達と生理機能」
  • Place of Presentation: 京都市
  • Year and Date: 2007-06-29
• [Remarks]
  • URL: http://www.lif.kyoto-u.ac.jp/labs/Fas/Home_j.htm