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マラリア原虫人工染色体を用いた新実験システムの開発

Research Project

Project/Area Number 19041048
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionTottori University

Principal Investigator

岩永 史朗  Tottori University, 医学部, 講師 (20314510)

Project Period (FY) 2007 – 2008
Project Status Completed (Fiscal Year 2008)
Budget Amount *help
¥7,700,000 (Direct Cost: ¥7,700,000)
Fiscal Year 2008: ¥3,500,000 (Direct Cost: ¥3,500,000)
Fiscal Year 2007: ¥4,200,000 (Direct Cost: ¥4,200,000)
Keywordsマラリア原虫 / 人工染色体 / 遺伝子ライブラリー / レポーターアッセイ
Research Abstract

申請者は既にネズミマラリア原虫(P.berghei)人工染色体を作製し、昨年度これを用いた新規レポーターアッセイシステムの開発に成功している。本年度はこれを用いて、マラリア原虫-人工染色体を宿主-ベクター系とした遺伝子ライブラリーを作製し、薬剤耐性遺伝子同定のためのパイロット実験を行った。まず、既知の遺伝子座に人工的に薬剤耐性遺伝子を組込んだネズミマラリア原虫を作製し、これよりゲノムDNAを抽出した。次にゲノムDNAを制限酵素消化後、アガロースゲル電気泳動し、薬剤耐性遺伝子が含まれると考えられるDNA断片を含むインサートDNAを調製した。続いてインサートDNAを人工染色体にライゲーションし、その後、エレクトロポレーション方により、原虫へ直接導入した。導入後、直ちに原虫をラットに接種し、その後、薬剤処理を行って、薬剤耐性遺伝子を含む人工染色体が導入された原虫のみをスクリーニングにより選択した。2回の試行を行った結果、いずれにおいても薬剤耐性原虫を選択することができ、また、選択された原虫内には薬剤耐性遺伝子が導入された人工染色体が導入されていることを確認した。以上の結果より、本実験系により、マラリア原虫-人工染色体を用いた遺伝子ライブラリーによって確実に薬剤耐性遺伝子をスクリーニングすることができることが示され、新たな実験法の開発に成功した。

Report

(2 results)
  • 2008 Annual Research Report
  • 2007 Annual Research Report
  • Research Products

    (4 results)

All 2009 2008 2007

All Presentation (3 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Presentation] Functional identification of the (syntenic) conserved centromere of Plasmodium2008

    • Author(s)
      S. Iwanaga
    • Organizer
      Molecular Approach to Malaria 2008
    • Place of Presentation
      オーストラリア・ローン
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] Plasmodium bergheiの人工染色体の開発2008

    • Author(s)
      岩永史朗
    • Organizer
      第6回分子寄生虫・マラリア研究フォーラム
    • Place of Presentation
      愛媛県松山市
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] Plasmodium bergheiへの新規遺伝子導入法の開発2007

    • Author(s)
      岩永史朗
    • Organizer
      第76回日本寄生虫学会大会
    • Place of Presentation
      大阪府大吹田市
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] マラリア原虫人工染色体2009

    • Inventor(s)
      岩永史朗、油田正夫
    • Industrial Property Rights Holder
      鳥取大学、三重大学
    • Industrial Property Number
      2009-051454
    • Filing Date
      2009-03-05
    • Related Report
      2008 Annual Research Report

URL: 

Published: 2007-04-01   Modified: 2018-03-28  

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