受容体サブタイプのモーダルシフトによるアンギオテンシン感受性調節機構の解明

• Project/Area Number: 19045003
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 大場 雄介 Hokkaido University, 大学院・医学研究科, 准教授 (30333503)
• Project Period (FY): 2007 – 2008
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2008)
• Budget Amount: ¥6,500,000 (Direct Cost: ¥6,500,000); Fiscal Year 2008: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000); Fiscal Year 2007: ¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
• Keywords: バイオイメージング / アンジオテンシン / 細胞内情報伝達 / GFP / FRET

Research Abstract

レニン-アンギオテンシン系の研究は国内外を問わずもっともホットな領域の一つといえる。アンジオテンシンは二つのセルセンサーAT1とAT2を介してシグナルを伝えることが知られているが、AT1については既に多くの知見が得られているのに対し、AT2の機能は未知のままである。我々はAT2の発現がAT1シグナルに制御されているという基礎的データを得ており、細胞はAT1からAT2へセンサーをモーダルシフトすることにより、外界に存在するアンジオテンシンのセンシング機構を制御しているものと考えられる、その分子機序が解明されればインパクトは大きい。
本研究ではAT1がアンジオテンシンをセンスして惹起されるERKの活性化を指標にAT1とAT2の機能連関の解明を試みた。AT2はAT2に対し、ERKのリン酸化に関しては拮抗的に働くが、この作用は他のEGFやLPAによるERKのリン酸化に対しては認められないことから、シグナル伝達の極めて上流でクロストークしていることが示唆された。また、蛍光タグを付加したAT1とAT2を発現させ、蛍光顕微鏡で観察したところ、両者が共発現した場合には互いの局在を変化させ共局在することが明らかになった。そこで、2つのセルセンサーの結合を解析したところ、免疫沈降法および蛍光共鳴エネルギー移動(FRET) 法の双方でAT1とAT2のアンジオテンシン依存的な結合が認められた。特にFRETを用いたイメージングでは2つのセルセンサーが細胞膜上で結合した後に、エンドサイトーシスされ、エンドソーム上で結合することが、両者センサーからのシグナルクロストークに重要であることが明らかとなった。これらの現象には、双方の受容体にリガンドが結合することが必要であり、更にその下流に位置する因子として、あるセリンスレオニンキナーゼの必要性を同定した。

Research Products

• [Journal Article] Integral role of transcription factor 8 in the negative regulation of tumor angiogenesis (2009)
  • Author(s): T. Inuzuka, et.al.
  • Journal Title: Cancer Res. 69 Pages: 1678-1684
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Transcription factor 8 activates R-Ras to regulate angiogenesis (2009)
  • Author(s): T. Inucuka, et.al.
  • Journal Title: Biochem. Biophys. Res. Commun. 379 Pages: 510-513
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clinicopathological significance of expression of p-c-Jun, TCF4 and β-Catenin in colorectal tumors (2008)
  • Author(s): K. Takeda, et.al.
  • Journal Title: BMC-Cancer 368 Pages: 328-328
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 細胞内シグナル伝達の可視化とその創薬への応用 (2008)
  • Author(s): 大場雄介、津田真寿美
  • Journal Title: 実験医学 26
• [Journal Article] Spatiotemporal Mobilization of Toll/IL-1 Receptor Domain-Containing Adaptor Molecule-1 in Response to dsRNA (2007)
  • Author(s): K Funami, M Sasai, Y Ohba, H Oshiumi, T Seya, M Matsumoto
  • Journal Title: J. Immunol. 179 Pages: 6867-6872
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Location of possible miRNA processing site in SmD3/SmB nuclear bodies in Arabidopsis (2007)
  • Author(s): Y Fujioka, M Utsumi, Y Ohba, Y Watanabe
  • Journal Title: Plant Cell Physiol. 48 Pages: 1243-1253
  • NAID: 10027004162
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] OLIG2 inhibits the motility of a human glial tumor cell line by activating RhoA (2007)
  • Author(s): K Tabu, Y Ohba, T Suzuki, Y Makino, T Kimura, A Ohnishi, M Sakai, T Watanabe, S Tanaka, H Sawa
  • Journal Title: Mol. Cancer Res. 5 Pages: 1099-1109
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] DAI (DLM1/ZBP1) is a cytosolic DNA sensor and an activator of innate immune response (2007)
  • Author(s): A Takaoka, ZC Wang, MK Choi, H Yanai, H Negishi, T Ban, M Miyagishi, K Honda, Y Ohba, T Taniguchi
  • Journal Title: Nature 448 Pages: 501-505
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 慢性骨髄性白血病に対する分子標的治療薬の新たな薬効評価系の構築 (2008)
  • Author(s): 水谷龍明, 他
  • Organizer: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場
  • Year and Date: 2008-12-12
• [Presentation] TCF8は血管新生の負の制御因子である (2008)
  • Author(s): 犬塚貴之, 他
  • Organizer: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場
  • Year and Date: 2008-12-10
• [Presentation] 口腔癌細胞の接着に関連する分子の機能解析 (2008)
  • Author(s): 山田珠希, 他
  • Organizer: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場
  • Year and Date: 2008-12-10
• [Presentation] エンドゾームにおけるRas依存性PI3K活性化機構のイメージング手法を用いた解析 (2008)
  • Author(s): 藤岡容一朗, 他
  • Organizer: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場
  • Year and Date: 2008-12-09
• [Presentation] Negative regulation of angiogenesis by zinc-finger transcription factor TCF8 (2008)
  • Author(s): Y. Ohba, et.al.
  • Organizer: The 25th Annual Meeting of ISHR Japanese Section
  • Place of Presentation: 横浜開港記念会館
  • Year and Date: 2008-12-06
• [Presentation] バイオイメージングの基礎と診断への応用 (2008)
  • Author(s): 大場雄介
  • Organizer: 日本病理学会
  • Place of Presentation: 松山市総合コミュニティセンター
  • Year and Date: 2008-11-19
• [Presentation] SYT-SSX1トランスジェニックマウスはp53ヘテロ環境下で滑膜肉腫様腫瘍を発生する (2008)
  • Author(s): 津田真寿美, 他
  • Organizer: 日本癌学会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場
  • Year and Date: 2008-10-30
• [Presentation] 血管新生抑制性転写因子の機能解析 (2008)
  • Author(s): 犬塚貴之, 他
  • Organizer: 日本癌学会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場
  • Year and Date: 2008-10-29
• [Presentation] 血管新生を制御する新規遺伝子の同定とその機能解析 (2008)
  • Author(s): 犬塚貴之, 他
  • Organizer: 日本インターフェロンンサイトカイン学会
  • Place of Presentation: 北海道大学学術交流会館
  • Year and Date: 2008-07-11
• [Presentation] 上皮細胞増殖因子(EGF) 依存的なPTHrPの発現制御と口腔癌細胞の増殖能・局所浸潤能との関連性 (2008)
  • Author(s): 山田珠希, 他
  • Organizer: 日本インターフェロンンサイトカイン学会
  • Place of Presentation: 北海道大学学術交流会館
  • Year and Date: 2008-07-11
• [Presentation] 慢性骨髄性白血病に対する新たな診断技術の開発 (2007)
  • Author(s): 水谷龍明、津田真寿美、川口秀明、大場雄介
  • Organizer: 日本分子生物学会 第30回年会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜
  • Year and Date: 2007-12-13
• [Presentation] 植物におけるmiRNAに関わる因子のイメージング手法を用いた解析 (2007)
  • Author(s): 藤岡容一朗, 内海真希, 大場雄介, 渡邊雄一郎
  • Organizer: 日本分子生物学会 第30回年会
  • Place of Presentation: パシフイコ横浜
  • Year and Date: 2007-12-11
• [Remarks]
  • URL: http://www.med.hokudai.ac.jp/~clilab-w/
• [Patent(Industrial Property Rights)] BCR-ABLチロシンキナーゼ活性測定用試薬 (2008)
  • Inventor(s): 大場雄介、近藤健
  • Industrial Property Rights Holder: 北海道大学
  • Industrial Property Number: 2008-135973
  • Filing Date: 2008-05-23
• [Patent(Industrial Property Rights)] 血管新生抑制剤 (2008)
  • Inventor(s): 大場雄介
  • Industrial Property Rights Holder: 北海道大学
  • Industrial Property Number: 2008-178615
  • Filing Date: 2008-07-09