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Tiling array analysis of transcriptional regulators in genus Streptococcus

Research Project

Project/Area Number 19390468
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Research Field Morphological basic dentistry
Research InstitutionNihon University

Principal Investigator

HAMADA Shigeyuki  Nihon University, 大学院・総合科学研究科, 教授 (60028777)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 中川 一路  東京都大学, 医科学研究所, 准教授 (70294113)
Co-Investigator(Renkei-kenkyūsha) NAKAGAWA Ichiro  東京大学, 医科学研究所, 准教授 (70294113)
Project Period (FY) 2007 – 2008
Project Status Completed (Fiscal Year 2008)
Budget Amount *help
¥19,630,000 (Direct Cost: ¥15,100,000、Indirect Cost: ¥4,530,000)
Fiscal Year 2008: ¥7,410,000 (Direct Cost: ¥5,700,000、Indirect Cost: ¥1,710,000)
Fiscal Year 2007: ¥12,220,000 (Direct Cost: ¥9,400,000、Indirect Cost: ¥2,820,000)
Keywordsレンサ球菌 / マイクロアレイ / タイリングアレイ / 遺伝子発現 / A群レンサ球菌 / non-coding RNA / 転写調節 / 感染
Research Abstract

A群レンサ球菌(Group A Streptococcus : GAS)は初発感染として咽頭炎や扁桃炎, さらに続発性疾患として猩紅熱やリウマチ熱, 糸球体腎炎を引き起こす病原菌である. A群レンサ球菌は, 上皮細胞に侵入した後, エンドソームによる分解を回避し細胞質へと移行する. 一部は, 新たな自然免疫として機能することが示されたオートファジーにより除去される. このように細胞内の宿主の防御系から逃避することが, A群レンサ球菌の多彩な臨床像を示す1つの理由となるのではないかと考えられる. そこで, 本研究ではA群レンサ球菌が, 宿主の防御機構を回避し, 細胞内で生存する機構を明らかにすることを目的として, 感染時におけるA群レンサ球菌の全ゲノムレベルでの発現解析を経時的に行った.その結果, 真核細胞内に存在しているA群レンサ球菌のRNAを抽出・増幅した後に, マイクロアレイ解析を行った結果と定量的PCRとの間に相関があるプロトコールを確立することが出来た. 次に, A群レンサ球菌の発現変化に着目して, 発現解析を行った. 感染前のA群レンサ球菌と比較して, 感染後1時間目においてその発現を1.5倍以上変化させていた遺伝子数は全ORFの43%(1861個のうちの約800個)に及んでおり, オートファジーによる作用を受けていると考えられる3, 4時間目においても10%程度の遺伝子が発現を変化させていた.興味深いことに, 細胞のオートファジーの有無が, 同じ感染時間のA群レンサ球菌の遺伝子発現パターンの変化に影響を与えており, 全ORFの8%の遺伝子発現に差が生じていることがわかった.また, オートファジー欠損型細胞での比較により, オートファジーの存在下でのみ発現が上昇する遺伝子が26個見られた. このうちの7個の遺伝子(一本鎖結合タンパク質, インテグラーゼ, プラスミド安定化タンパク質, リボソームタンパク質S21, 透過酵素及び未知のタンパク質)は, オートファジー欠損型の宿主に感染した場合は発現が1.5倍以上減少していたため, オートファジーに対応して発現を増加させている可能性が考えられた.

Report

(3 results)
  • 2008 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2007 Annual Research Report
  • Research Products

    (34 results)

All 2009 2008 2007

All Journal Article (18 results) (of which Peer Reviewed: 12 results) Presentation (16 results)

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Published: 2007-04-01   Modified: 2016-04-21  

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