The comprehensive analysis of molecular mechanism by which EB virus LMP1 gene induces cell growth transformation

• Project/Area Number: 19590474
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Virology
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: YASUI Teruhito Osaka University, 微生物病研究所, 准教授 (60283074)
• Project Period (FY): 2007 – 2008
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2008)
• Budget Amount: ¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000); Fiscal Year 2008: ¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000); Fiscal Year 2007: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
• Keywords: Epstein-Barr virus / Latent membrane protein / TNF family / Herpesvirus / Lymphoma / EBNA / TNF receptor family / BCR / B lymphocyte / latent membrane protein / Blymphocyte / lymphoma

Research Abstract

本研究ではEBV発がんの分子機構を包括的に解明するために、EBV潜伏感染遺伝子Latent membrane protein (LMP1、LMP2aのB細胞形質転換機構の分子作用メカニズムの解析を行った。1)LMP-LMP2a間タンパク相互作用の解析とハイスループット(HTS) 抗LMP作用薬剤スクリーニング法確立の試み、2)LMP1シグナルに関与する宿主因子の同定に焦点を絞り解析した。その結果、LMP両分子間の直接的相互作用を証明するために、Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC)法を行い、蛍光強度の発現を検討することによって、LMP1-LMP2a分子相互作用の有無を検討した。その結果、LMP1間、LMP2a間及びLMP1-LMP2a間相互作用が存在することが明らかとなった。一方、LMP下流シグナルに関与する可能性のある7分子を同定した。いずれの分子もLMPの発現により細胞内局在を変化させることが明らかとなった。特にLMP依存性B細胞形質転換作用に関与する細胞増殖・生存制御を司る推定分子としてp73結合分子Ranbp9がLMP下流シグナルに存在することが示唆された。1)項のハイスループット(HTS) 抗LMP1作用薬剤スクリーニング法確立の試みに関連して、B細胞生存に関与するTRAF3とLMP1との相互作用に焦点を当て、最終的にEBV阻害薬の候補薬剤を選別するシステムの基盤構築を試みた。LMP1は細胞膜表面上でTRAF3と恒常的に会合することが明らかとなっているが、申請者らはTRAF3の細胞内局在はN-末端側RINGフィンガードメインに規定されていることを明らかにした。

Research Products

• [Journal Article] BS69 negatively regulates the canonical NF-κB activation induced by Epstein-Barr virus-derived LMP1 (2009)
  • Author(s): Ikeda O., Sekine Y, Mizushima Y, Oritani K, Yasui T, Fujimuro M, Muromoto R, Nanbo A, and Matsuda T
  • Journal Title: FEBS Letter 583 Pages: 1567-1574
  • NAID: 120001274621
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Bimodal regulation of T cell-mediated immune responses by TIM-4 (2008)
  • Author(s): Mizui M, Shikina T, Arase H, Suzuki K, Yasui T, Rennert PD, Kumanogoh A, Kikutani H
  • Journal Title: International Immunology 20 Pages: 695-708
  • NAID: 10021241281
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] STAP-2 negatively regulates both canonical and noncanonical NF-kappaB activation induced by Epstein-Barr virus-derived latent membrane protein 1 (2008)
  • Author(s): Ikeda O, Sekine Y, Yasui T, Oritani K, Sugiyma K, Muromoto R, Ohbayashi N, Yoshimura A, Matsuda T.
  • Journal Title: Molecular Cellular Biology 28 Pages: 5027-5042
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Accelerated tumor growth in mice deficient in DNAM-1 receptor (2008)
  • Author(s): Iguchi-Manaka A, Kai H, Yamashita Y, Shibata K, Tahara-Hanaoka S, Honda S, Yasui T, Kikutani H, Shibuya K, Shibuya A.
  • Journal Title: The Journal of Experimental Medicine 205 Pages: 2959-2964
  • NAID: 120007138364
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Bimodal regulation of T cell-mediated immune responsesby TIM-4. (2008)
  • Author(s): Mizui M, et al.
  • Journal Title: International Immunology 20 Pages: 695-708
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] STAP-2 negatively regulates both canonical and noncanonical NF-kappaB activation induced by Epstein-Barr virus-derived latent membrane protein 1. (2008)
  • Author(s): Ikeda O, et al.
  • Journal Title: Molecular Cellular Biology 28 Pages: 5027-5042
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Accelerated tumor growth in mice deficient in DNAM-1 receptor. (2008)
  • Author(s): Iguchi-Manaka A, et al.
  • Journal Title: The Journal of Experimental Medicine 205 Pages: 2959-2964
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] LMP1 Transmembrane Domain1-2 FWLY mediates Intermolecular Interactions with 3-6 to activate NF-kB (2006)
  • Author(s): Soni V, Yasui T, McFarland EC, Kieff E
  • Journal Title: Journal of Virology 80 Pages: 10787-10793
  • Peer Reviewed
• [Presentation] EBVBACを用いた感染可視化によるEBV-宿主相互作用の解析 (2008)
  • Author(s): 矢田佳織、安居輝人、多田智、丸尾聖爾、菊谷仁
  • Organizer: 第56回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 岡山
  • Year and Date: 2008-10-26
• [Presentation] PKN1, a member of the protein kinase C family controls B cell activation and the tolerance (2007)
  • Author(s): Yasui T, Yada K, Mosialos G, Kieff E, Kikutani H
  • Organizer: 4th International Leukocyte Signal Transduction Workshop : Clinical implications of signaling pathways
  • Place of Presentation: Rhodes, Greece
• [Presentation] PKN1, a member of the protein kinase C family controls B cell activation and the tolerance. (2007)
  • Author(s): Yasui T, Yada K, Mosialos G, Kieff E, Kikutani H
  • Organizer: 4th International Leukocyte Signal Transduction Workshop: Clinical implications of signaling pathways
  • Place of Presentation: Rhodes, Greece
• [Book] (高田賢蔵監修、診断と治療社)ウイルスの構造と遺伝子LMP (2008)
  • Author(s): 安居輝人
  • Publisher: EBウイルス改訂第2版
• [Remarks]
  • URL: http://www.biken.osaka-u.ac.jp/biken/mol-imm/Molecular_Immunology/Welcome.html
• [Remarks]
  • URL: http://www.biken.osaka-u.ac.jp/act/act_kikutani.php
• [Patent(Industrial Property Rights)] 抗EBウイルス薬の候補化合物のスクリーニング方法 (2007)
  • Inventor(s): 安居輝人、菊谷仁
  • Industrial Property Rights Holder: 大阪大学
  • Filing Date: 2007-08-20
• [Patent(Industrial Property Rights)] 抗EBウイルス薬の候補化合物のスクリーニング方法 (2007)
  • Inventor(s): 安居輝人
  • Industrial Property Rights Holder: 大阪大学
  • Industrial Property Number: 2007-213266
  • Filing Date: 2007-09-12