Characteriztion of leukemia model mouse transdused with MLL/AF4 cDNA and a novel molecular-targeting medicine

• Project/Area Number: 19591142
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Hematology
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: INOKUCHI Kouichi Nippon Medical School, 医学部, 教授 (10203267)
• Project Period (FY): 2007 – 2008
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2008)
• Budget Amount: ¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000); Fiscal Year 2008: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2007: ¥3,380,000 (Direct Cost: ¥2,600,000、Indirect Cost: ¥780,000)
• Keywords: MLL / AF4 / 白血病 / FLT3 / S100A6 / 32D / Hox / Flt3

Research Abstract

我々はMLL転座型白血病の15%前後Flt3遺伝子tyrosine kinase domain(TKD)変異が認められることに注目し、in vitroにて両者の腫瘍化能に関する相乗効果を検討した。
IL3依存性マウス細胞株である32Dcにレンチウイルスを用いてMLL-AF4とFlt3の変異を発現させた。32Dc^(Flt3)TKDと32Dc^(MLL-AF4)は、semisolid mediaだけでなく液体培地においてもIL3非依存性の自律増殖能を獲得できなかったのに対して、32Dc^(Flt3 TKD+MLL-AF4)はいずれの培地においてもアポトーシスを抑制しIL3非依存性の自律増殖能を獲得することができた。また32Dc^(Flt3 TKDと32DcMLL-AF4)は、G-CSF添加によりGranlocyteへの分化が認められたが、32Dc^(Flt3TKD+MLL-AF4)では認められなかった。次にGene Chipによる遺伝子発現profilingを行うと、MLL-AF4の導入によってMLL転座型白血病の主な腫瘍化の機序のひとつとして考えられていたHox遺伝子群の発現亢進は認められなかった。しかしその代わりとしてS100ACalcium binding protein familyの一つで細胞増殖に関与するS100A6が、MLL-AF4とFlt3TKDの両者の導入によって相乗的に発現を亢進していることがわかった。以上のことからMLL-AF4にFlt3TKDが加わることによって、相乗的な腫瘍化能や分化抑制能を獲得することを証明できた。またMLL-AF4の腫瘍化の機序としてHox遺伝子群とは異なるS100A6といった新たな候補を示すことが出きた。

Research Products

• [Journal Article] Multistep pathogenesis of leukemia via the MLL-AF4 chimeric gene/flt3 gene tyrosine kinase domain(TKD)mutation-related enhancement of S100A6 expression. (2009)
  • Author(s): Yamaguchi H, Hanawa H, Uchida N, Inamai M, Sawaguchi K, Mitamura Y, Shimada T, Dan K, Inokuchi K.
  • Journal Title: Experimental Hematol. 37(6) Pages: 701-14
• [Journal Article] Treatment of adult AML with t(6 ; 11)(q27 ; q23) by allogeneic hematopoietic SCT in the first CR. (2008)
  • Author(s): Tamai H, Inokuchi K, Dan K.
  • Journal Title: Bone Marrow Transplant 42 Pages: 553-4
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clinical features of adult acute leukemia with 11q23 abnormali ties in Japan : a co-operative multicenter study. (2008)
  • Author(s): Tamai H, Inokuchi K, Dan K.
  • Journal Title: Int J Hematology 87 Pages: 195-202
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] HIV vector-mediated targeted suicide gene therapy for adult T-cell leukemia (2007)
  • Author(s): Miyake K, Inokuchi K, Miyake N, Dan K, Shimada T
  • Journal Title: Gene Therapy 23 Pages: 1662-7
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Analysis of the exon 12 and 14 mutations of the JAK2 gene in Philadelphia chromosome-positive leukemia (2007)
  • Author(s): Inami M, Yamaguchi H, Hasegawa S, Mitamura Y, Kosaka F, Kobayashi A, Kimura S, Dan K, Inokuchi K
  • Journal Title: Leukemia 22 Pages: 216-6
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Polycythemia associated with the JAK2V617F mutation emerged during treatment of chronic myelogenous leukemia (2007)
  • Author(s): Inami M, Inokuchi K, Okabe M, Kosaka F, Mitamura Y, Yamaguchi H, Dan K
  • Journal Title: Leukemia 21 Pages: 1103-4
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 遺伝子発現profilingによるMLL/AF4キメラ遺伝子とFlt3 D835V遺伝子異常による白血病発症機序の検討 (2007)
  • Author(s): 山口博樹、猪口孝一、ほか7名
  • Organizer: 日本血液学会総会
• [Patent(Industrial Property Rights)] (2008)
  • Filing Date: 2008-12-16