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ゲル変形によるタンパク質結晶化の制御とそのメカニズム解明

Research Project

Project/Area Number 19654065
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Biophysics/Chemical physics
Research InstitutionHiroshima University

Principal Investigator

田中 晋平  Hiroshima University, 大学院・総合科学研究科, 准教授 (40379897)

Project Period (FY) 2007 – 2008
Project Status Completed (Fiscal Year 2008)
Budget Amount *help
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 2008: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2007: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Keywordsタンパク質 / 結晶成長 / 核形成 / ゲル / 界面 / 制限空間
Research Abstract

我々はこれまで、脂質が形成するゲル状高分子構造中でのタンパク質結晶成長促進効果を研究してきた。本研究では、この研究を発展させ、高分子ゲル中でのタンパク質結晶化挙動と、ゲル変形による内部の編み目構造の変化が、そこに拘束されたタンパク質にどのような影響を与えるのかを調べていた。用いたモデル系はタンパク質としてニワトリ卵白リゾチーム、ゲルとしてアガロースとポリエチレングリコールを用いた。ポリエチレングリコール水溶液は厳密にはゲルではないが、その濃厚溶液中での高分子編み目内の閉じこめ効果を調べるために用いた。まず、アガロースゲル内における結晶成長では、ゲル表面での特徴的な結晶配向効果を見いだした。これは、ゲル表面がソフトであるため、異方的な結晶形をもつリゾチームの結晶が重力下で安定するために、自発的にある方向に配向することがその理由であると考えられる。一方、ポリエチレングリコール系では、ポリエチレングリコール自身の結晶化もタンパク質の結晶化と同時に起きる。このため、まず結晶化剤であるNaClの添加によってポリエチレングリコールの結晶化挙動がどのように影響されるのか調べた。その結果、NaClの添加はポリエチレングリコールの結晶化を促進し、それをFlory-Hugginsの格子モデルで説明することに成功した。この結果は国際学術誌に投稿し、受理されている。ゲル変形の効果については、ゲルの破壊による効果と、内部編み目の変形による効果の分離が困難であり、これまでのところその効果を実証することには成功していない。今後この研究をさらに発展させ、本研究で開発した光散乱装置を用いて、より微小な変形の元での結晶化挙動を研究していく予定である。

Report

(2 results)
  • 2008 Annual Research Report
  • 2007 Annual Research Report
  • Research Products

    (6 results)

All 2009 2008 2007

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (5 results)

  • [Journal Article] The effect of NaCl on the eutectic phase behavior of aqueous poly (ethylene glycol) solutions2009

    • Author(s)
      R. C. Gosh, A. Tada, S. Tanaka
    • Journal Title

      Polymer 50

      Pages: 1304-1310

    • NAID

      120001700422

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Diffusion of protein molecules in lipid cubic phases studied by fluorescence recovery after photobleaching2008

    • Author(s)
      S. Tanaka
    • Organizer
      International symposium on non-equilibrium soft matter
    • Place of Presentation
      京都大学
    • Year and Date
      2008-06-03
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Presentation] タンパク質分子間に働く枯渇相互作用と遮蔽された静電相互作用の非加算性2008

    • Author(s)
      田中晋平
    • Organizer
      特定領域研究「非平衡ソフトマター」第2回公開シンポジウム
    • Place of Presentation
      名古屋大学
    • Year and Date
      2008-01-08
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] タンパク質溶液の液体-液体相分離と結晶化2007

    • Author(s)
      田中晋平
    • Organizer
      学習院大学計算機センター特別研究プロジェクト「結晶成長の数理」
    • Place of Presentation
      学習院大学計算機センター
    • Year and Date
      2007-12-27
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] Protein crystallization induced by poly (ethylene) glycol: Asmall-angle x-ray scattering study2007

    • Author(s)
      田中晋平
    • Organizer
      京都大学基礎物理学研究所研究会「コロイド物理学の新展開」
    • Place of Presentation
      京都市 京大会館
    • Year and Date
      2007-07-25
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] 脂質高次構造を利用したタンパク質の結晶化2007

    • Author(s)
      田中晋平
    • Organizer
      特定研究「非平衡ソフトマター」第2回領域研究会
    • Place of Presentation
      米沢市 伝国の社
    • Year and Date
      2007-06-21
    • Related Report
      2007 Annual Research Report

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Published: 2007-04-01   Modified: 2016-04-21  

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