• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to previous page

FACSを利用した新規なタンパク質機能モチーフ探索法の開発

Research Project

Project/Area Number 19657044
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Functional biochemistry
Research InstitutionNational Institute of Infectious Diseases

Principal Investigator

前濱 朝彦  National Institute of Infectious Diseases, 細胞化学部, 室長 (40322755)

Project Period (FY) 2007 – 2008
Project Status Completed (Fiscal Year 2008)
Budget Amount *help
¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 2008: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
Keywordsタンパク質分解 / ランダム変異
Research Abstract

本研究では、ランダム変異導入とFACSソーティングを組み合わせて蛋白質の機能モチーフをスクリーニングする手法の開発を目的とし、癌抑制因子PICT-1を題材として、その細胞内動態(ストレス依存性の分解および核小体局在)を制御する機能モチーフの同定およびその生理的意義の解明を試みた。まずPICT-1の核小体移行を制御する機能モチーフのスクリーニングにおいては、PICT-1蛋白質上の複数部位が細胞内局在決定に関与する可能性を見いだした。さらにPICT-1のN末端側およびC末端側の双方共に核小体への局在を示すことが明らかとなり、それぞれの領域における核小体移行モチーフの同定を試みたが、本法で用いたRUBY法プローブであるPICT-1BP1が、分割したPICT-1とは結合しないことが明らかとなり、異なるプローブを用いた新規スクリーニング法が必要となった。続いて、PICT-1の分解を制御する機能モチーフのスクリーニングを行ったが、本スクリーニングにおいても少なくとも三カ所以上の複数部位が分解制御に関与する可能性を見いだした。またPICT-1をN末端側とC末端側の二つに分割した場合、どちらの領域もストレス応答性の分解を受けることが明らかとなった。さらにPICT-1分解がアポトーシス誘導剤を中心とした様々なストレス誘導剤によって起こること、またこの分解がUBE1非依存性であることを見いだした。プロテアーゼ阻害剤を用いた解析からは、この分解がMG132感受性かつカテプシンB/D非依存性であることが明らかとなった。以上の結果から、PICT-1は強いストレスによって構造的な制御を失ったプロテアソーム酵素群によって分解されている可能性が示された。

Report

(2 results)
  • 2008 Annual Research Report
  • 2007 Annual Research Report
  • Research Products

    (6 results)

All 2008 2007 Other

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] RalA functions as an indispensable singnal mediator for the untrient-sensing system2008

    • Author(s)
      Maehama, T.
    • Journal Title

      Journal of Biological Chemistry 283

      Pages: 35053-35059

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] S1P2 receptors mediate inhibition of glioma cell migration through Rho signaling pathways independent of PTEN2008

    • Author(s)
      Malchinkhuu, E.
    • Journal Title

      Biochem.Biophys.Res.Commun. 366

      Pages: 963-968

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] あらたな癌抑制遺伝子PICT-1/GLTSCR22008

    • Author(s)
      前浜 朝彦
    • Journal Title

      医学のあゆみ 224

      Pages: 172-173

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Journal Article] PTEN:its deregulation and tumorigenesis2007

    • Author(s)
      Maehama, T.
    • Journal Title

      Biol.Pharm.Bull. 30

      Pages: 1624-1627

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Identification of a Ras-family GTPase as an indispensable signal mediator for nutrient sensing and mTORC1 activation2008

    • Author(s)
      Maehama, T.
    • Organizer
      8th International Conference on Protein Phosphatases
    • Place of Presentation
      Maebashi, Japan
    • Year and Date
      2008-11-14
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.nih.go.jp/niid/reports/index.html

    • Related Report
      2007 Annual Research Report

URL: 

Published: 2007-04-01   Modified: 2016-04-21  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi