| Project/Area Number |
19659158
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Public health/Health science
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
小山 洋 Gunma University, 大学院・医学系研究科, 教授 (30143192)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山崎 千穂 群馬大学, 大学院・医学系研究科, 教助 (20506422)
勝矢 陽子 群馬大学, 大学院・医学研究科, 助教 (70398535)
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| Project Period (FY) |
2007 – 2008
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2008)
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| Budget Amount *help |
¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
Fiscal Year 2008: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2007: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
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| Keywords | セレン / スプラウト / がん / 細胞増殖抑制 / 微量元素 |
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| Research Abstract |
H19年度に確立したセレン添加方法を用いて、安定的にセレン強化ブロッコリースプラウトを栽培することが可能となり、その抽出液を用いて以下の実験を行った。まずは、HPLC-ICP-MSを用いて抽出液中のセレン化合勅を同定・定量した。昨年度明らかにしたセレノメチルセレノシステインだけでなく、ごく少量のセレン酸と亜セレン酸が含まれ、含有量はそれぞれ、24.2μM、2μM、6.16μMであることが示された。
前立腺がんの3種類の細胞株(LNCaP、DU145、およびPC3)を用いてセレン強化ブロッコリースプラウト抽出液を加えて培養し、細胞生存活性をMTTアッセイ法を用いて測定した。量一反応曲線を求め、がん細胞に対する50%作用濃度IC50を明らかにした。LNCaP細胞に対する通常ブロッコリースプラウト抽出液のIC50は19倍希釈液であったが、セレン強化ブロッコリースプラウト抽出液のIC50は32倍希釈液(セレノメチルセレノシステイン濃度0.75μM)であり、がん細胞活性をより低濃度で抑制することが示された。
IC50濃度のセレン強化プロコッリースプラウト抽出液をLNCaP細胞に作用させ、添加後のがん細胞を経時的にホモジネートし細胞質抽出液を用いてウエスタンブロットを行い、アポトーシス関連タンパクの検索を行った。通常ブロッコリー添加がん細胞ではアポトーシス関連タンパク質であるカスパーゼ3の増加のみが見られたが、セレン強化プロコッリースプラウト添加群ではカスパーゼ3の増加だけでなくカスパーゼ3失活酵素(PARP)の減少も観察された。また、サバイバル系のタンパク質であるAktおよびmTORのリン酸化も阻害されており、がん細胞においてセレン強化ブロッコリースプラウト抽出液は、複数の経路を介してアポトーシスを誘導していることが明らかとなった。
これらの研究成果については、研究協力者の本学大学院生Abdula hRizkyが"Selenium increased chemosensitivity and apoptosis of LNCaP Prostate cancer cells to broccoli sprouts extract"と題してBMC Cancerに投稿中である。
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