Construction of fluorescent proteins having amyloid b-peptide (Ab) sequence and FRET detection of Ab aggregates

• Project/Area Number: 19710183
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Living organism molecular science
• Research Institution: Tokyo Institute of Technology
• Principal Investigator: TAKAHASHI Tsuyoshi Tokyo Institute of Technology, 大学院・生命理工学研究科, 助教 (90345380)
• Project Period (FY): 2007 – 2008
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2008)
• Budget Amount: ¥3,730,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2008: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2007: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
• Keywords: アミロイドβペプチド / 緑色蛍光タンパク質 / 蛍光共鳴エネルギー移動 / βシート / タンパク質工学 / オリゴマー / アルツハイマー病 / アミロイド線維

Research Abstract

アミロイドβペプチド(Aβ)の集合化・オリゴマー生成は、アルツハイマー病の発症と密接に関連している。本研究では、バレル構造を有する緑色蛍光タンパク質(GFP)中のβシート上にAβ配列を挿入したGFP変異体(Aβ埋込GFP)を基に蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)型センサータンパク質を構築した。この構築したセンサータンパク質を用いることで、試験管内においてAβの集合体形成過程をFRETにより検出できることが示された。

Research Products

• [Journal Article] Selection and structural analysis of de novo proteins from an a3b3 genetic library (2009)
  • Author(s): M. T. Jumawid, T. Takahashi, T. Yamazaki, H. Ashigai, H. Mihara
  • Journal Title: Protein Science 18 Pages: 384-398
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Selection and structural analysis of de novo proteins from an α3β3 genetic library (2009)
  • Author(s): M. T. Jumawid, T. Takahashi, T. Yamazaki, H. Ashigai, H. Mihara
  • Journal Title: Protein Science 18 Pages: 384-398
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Peptide and protein mimetics inhibiting the amyloid b-peptide aggregation (2008)
  • Author(s): T. Takahashi, H. Mihara
  • Journal Title: Accounts of Chemical Research 41 Pages: 1309-1318
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Peptide and protein mimetics inhibiting the amyloid β-peptide aggregation (2008)
  • Author(s): T. Takahashi, H. Mihara
  • Journal Title: Accounts of Chemical Research 41 Pages: 1309-1318
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Design of peptides that form amyloid-like fibrils capturing amyloid b1-42 peptides (2007)
  • Author(s): J. Sato, T. Takahashi, H. Oshima, S. Matsumura, H. Mihara
  • Journal Title: Chem. Eur. J. 13 Pages: 7745-7752
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Embedding the amyloid b-peptide (Ab) sequence in green fluorescent protein (GFP) inhibits Ab oligomerization (2007)
  • Author(s): T. Takahashi, K. Ohta, H. Mihara
  • Journal Title: ChemBioChem 8 Pages: 985-988
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Embedding the Amyloid β-Pep tide Sequence in Green Fluorescent Protein Inhibits Αβ Oligomerization (2007)
  • Author(s): Tsuyoshi Takahashi
  • Journal Title: ChemBioChem 9 Pages: 985-988
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] アミロイドβペプチド(Aβ)を標的とした人工タンパク質・ペプチドの設計とΑβ集合体形成の制御 (2007)
  • Author(s): 高橋 剛
  • Journal Title: 生物物理 47 Pages: 228-234
  • Peer Reviewed
• [Presentation] アミロイドbペプチド(Ab)配列を挿入した蛍光タンパク質によるAb集合化阻害と検出 (2008)
  • Author(s): 高橋剛, 太田健一, 三原久和
  • Organizer: 第3回バイオ関連化学合同シンポジウム
  • Place of Presentation: 横浜
• [Presentation] 設計ペプチド・タンパク質を用いたアルツハイマー病アミロイドbペプチド(Ab)の凝集制御と細胞毒性 (2008)
  • Author(s): 高橋剛, 鈴木美穂, 村越祐子, 太田健一, 三重正和, 小畠英理, 三原久和
  • Organizer: 第18回バイオ・高分子シンポジウム
  • Place of Presentation: 東京
• [Presentation] アミロイドβペプチド(Aβ)配列を挿入した蛍光タンパク質によるAβ集合化阻害と検出 (2008)
  • Author(s): 高橋剛
  • Organizer: 第3回バイオ関連化学合同シンポジウム
  • Place of Presentation: 東京工業大学(横浜)
• [Presentation] 設計ペプチド・タンパク質を用いたアルツハイマー病アミロイドβペプチド(Aβ)の凝集制御と細胞毒性 (2008)
  • Author(s): 高橋剛
  • Organizer: 第18回バイオ・高分子シンポジウム
  • Place of Presentation: 上智大学(東京)
• [Presentation] アミロイドbペプチド(Ab)配列を挿入した新規タンパク質の設計とAb集合化阻害 (2007)
  • Author(s): 高橋剛, 太田健一, 三原久和
  • Organizer: 第17回バイオ・高分子シンポジウム
  • Place of Presentation: 東京
• [Presentation] アミロイドβペプチド配列を挿入した緑色蛍光タンパク質変異体の創製 (2007)
  • Author(s): 高橋 剛
  • Organizer: 日本ケミカルバイオロジー研究会第2回年会
  • Place of Presentation: 京都大学(京都)
• [Presentation] アミロイドβペプチド(Aβ)配列を挿入した新規タンパク質の設計とAβ集合化阻害 (2007)
  • Author(s): 高橋 剛
  • Organizer: 第17回バイオ・高分子シンポジウム
  • Place of Presentation: 上智大学(東京)
• [Presentation] Construction of Green Fluorescent Protein (GFP) Variants That Inhibitthe Amyloid Beta-Peptide Olieomerization (2007)
  • Author(s): 高橋 剛
  • Organizer: The 2nd International Workshop on Approaches toSingle-Cell Analysis
  • Place of Presentation: 早稲田大学(東京)
• [Book] 酵素・タンパク質をはかる・とらえる・利用する(岡畑恵雄、三原久和編)第5章アミロイドタンパク質をはかる (2009)
  • Author(s): 高橋 剛, 三原久和(分担執筆)
  • Publisher: 工学図書株式会社