Thermodynamic analysis of chiral molecule recognition of enzymes

Research Project

Project/Area Number	19780075
Research Category	Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Applied biochemistry
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	KOGA Yuuichi Osaka University, 大学院・工学研究科, 助教 (30379119)
Project Period (FY)	2007 – 2008
Project Status	Completed (Fiscal Year 2008)
Budget Amount *help	¥2,310,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥210,000) Fiscal Year 2008: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000) Fiscal Year 2007: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
Keywords	タンパク質工学 / リパーゼ / 光学選択性 / 結晶構造解析 / 機能改変 / たんぱく質工学 / 結晶構造解
Research Abstract	Burkholderia cepacia由来リパーゼの3-phenylbutyric acidに対する光学選択性を熱力学的、構造学的に解析を行った。光学選択性の改変された4重変異体4種類の大量生産系構築を行った。1リットルの培養液当たり233mg以上の組換えリパーゼの発現が確認された。精製酵素を用いて結晶化実験を行い、20-30%のイソプロパノールを共沈剤として用いた条件で針状結晶がえられ、X線回折データの取得を行った。また、キラルカラムを用いて、ラセミックな基質に対する選択的分解を観察する手法を開発した。