低酸素応答系遺伝子発現における転写制御の解明

• Project/Area Number: 19790658
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Hematology
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 小原 直 筑波大, 人間総合科学研究科, 講師 (70422178)
• Project Period (FY): 2007 – 2008
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2008)
• Budget Amount: ¥3,690,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥390,000); Fiscal Year 2008: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000); Fiscal Year 2007: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
• Keywords: 低酸素 / エリスロポエチン / 組織特異的遺伝子発現 / 腎性貧血 / 転写因子 / トランスジェニックマウス / BAC / エンハンサー

Research Abstract

エリスロポエチン(Epo)遺伝子の近傍180kbpの制御領域下で緑色蛍光タンパク質(GFP)を発現するトランスジェニックマウス(wt-Epo-GFP Tg)を作製し、マウス個体におけるEpo産生細胞を同定した。また、同様の構築の中のプロモーター領域のGATA配列に変異を導入したトランスジェニックマウスを作成・解析したところ、腎遠位尿細管・集合管、肝内胆管、気管支上皮、胸腺髄質などの上皮系細胞において、恒常的にGFPを発現していた。また、遠位尿細管では転写因子GATA-2,GATA-3が発現しており、Epo遺伝子のプロモーター領域に存在するGATA配列は、個体において、恒常的にEpo遺伝子の異所性発現を抑制していることを明らかにできた。また、遠位尿細管や集合管での抑制にはGATA-2、GATA-3が関与していることが示唆された。さらに、さまざまな長さのEpo遺伝子制御領域下でGFPを発現するトランスジーンを保持するトランスジェニックマウスを作成し、解析した。その結果、転写開始点から上流17kbの制御領域をもつトランスジーンを保持するトランスジェニックマウスでは腎臓・肝臓でGFPの発現を認めたのに対し、上流13kbの制御領域をもつトランスジーンでは肝臓でのみGFPの発現を認めた。このことからマウス個体では腎臓と肝臓で異なる制御機構によりEpo遺伝子の誘導的発現が制御されていることが示された。また、これらのトランスジェニックマウスの結果からEpo遺伝子の腎臓特異的エンハンサーは転写開始点から上流13kbから17kbの部位に存在すると考えられる。

Research Products

• [Journal Article] Repression via the GATA bos is essential for tissue-specific erythropoietin geneexpression. (2008)
  • Author(s): Obara N, Suzuki N, Kim K, Imagawa S, Nagasawa T, Yamamoto M.
  • Journal Title: Blood (In press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Detection of the STAT5B-RARA fusion transcript in acute promyelocytic leukemia with the normal chromosome 17 on G-banding. (2008)
  • Author(s): Kusakabe M, Suzukawa K, Nanmoku T, Obara N, Okoshi Y, Mukai HY, Hasegawa Y, Kojima H, Kawakami Y, Ninomiya H, Nagasawa T.
  • Journal Title: Eur J Haematol. 80 Pages: 444-447
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Use of gene-manipulated mice in the study of erythropoietin gene expression. (2007)
  • Author(s): Suzuki N, Obara N, Yamamoto M.
  • Journal Title: Methods Enzymol. 435 Pages: 157-177
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Myelodysplastic syndrome accompanied by basophilia and eosinophilia with t(5;12)(q31:p13). (2007)
  • Author(s): Katsura Y, Suzukawa K, Nanmoku T, Nemoto N, Machino T, Obara N, Okoshi Y, Mukai HY, Hasegawa Y, Kojima H, Nagasawa T.
  • Journal Title: Cancer Genet Cytogenet. 178 Pages: 85-88
  • NAID: 120007139117
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 腎臓におけるエリスロポエチン遺伝子発現制御機構の解析 (2007)
  • Author(s): 佐藤智咲・鈴木教郎・小原直・山嵜瞬・潘小青・今川重彦・山本雅之
  • Organizer: 第16回腎とエリスロポエチン研究会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2007-11-06
• [Presentation] 2-オキソグルタル酸投与による腫瘍血管新生抑制効果 (2007)
  • Author(s): 松本健・今川重彦・小原直・鈴木教郎・長澤俊郎・山本雅之
  • Organizer: 第69回日本血液学会・第49回日本臨床血液学会合同総会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2007-10-12
• [Presentation] 血中サイトカインを用いた鼻型NK/H細胞リンパ腫の予後・病態解析 (2007)
  • Author(s): 小原直・大越靖・鈴川和己・向井陽美・長谷川雄一・小島 寛・長澤俊郎
  • Organizer: 第69回日本血液学会・第49回目本臨床血液学会合同総会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2007-10-12
• [Presentation] 組織球性壊死性リンパ節炎および血球食食症候群を合併したマイコプラズマ肺炎の一例 (2007)
  • Author(s): 越野繭子・向井陽美・武藤秀治・小原直・大越靖・鈴川和己・長谷川雄一・小島寛
  • Organizer: 第69回日本血液学会・第49回日本臨床血液学会合同総会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2007-10-12
• [Presentation] tT5;12)(q31;p13)を有し好酸球増多と好塩基球増多を伴ったMDSの1症例 (2007)
  • Author(s): 桂行孝・鈴川和己・南木融・根本範子・町野孝幸・小原 直・大越 靖・向井 陽美・長谷川雄一・小島寛川上・ 康二宮・ 治彦・長澤 俊郎
  • Organizer: 第69回日本血液学会・第49回日本臨床血液学会合同総会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2007-10-12