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On-chip統合デジタルバイオアッセイのための動的フェムトリアクタ技術の開発

Research Project

Project/Area Number 19H00849
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Review Section Medium-sized Section 28:Nano/micro science and related fields
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

野地 博行  東京大学, 大学院工学系研究科(工学部), 教授 (00343111)

Project Period (FY) 2019-04-01 – 2020-03-31
Project Status Discontinued (Fiscal Year 2019)
Budget Amount *help
¥45,890,000 (Direct Cost: ¥35,300,000、Indirect Cost: ¥10,590,000)
Fiscal Year 2019: ¥19,370,000 (Direct Cost: ¥14,900,000、Indirect Cost: ¥4,470,000)
Keywords1分子バイオ計測 / フェムトリアクタ / デジタルバイオ計測 / マイクロデバイス / デジタルアッセイ / 液ー液相分離
Outline of Research at the Start

これまでに我々は、フェムトリットルサイズの超微小溶液リアクタアレイ技術を開発し、1分子バイオ分析分野を牽引してきたが、これまでのリアクタは受動的に溶液を収納するだけであり、その応用範囲には制限があった。本プロジェクトは、これまでの「静的」なリアクタ技術から、「動的」なリアクタ技術へと基盤技術を一新する。具体的には、能動的な分子取り込み機構、リアクタ内部溶液組成の制御機構、リアクタの個別取り出し機構などを開発し、試料の溶液交換・濃縮などのプロセスをon-chipに搭載した統合型デジタルバイオ分析や、multiplexデジタル遺伝子解析を実現し、オンサイト1分子診断イノベーションをもたらす。

Outline of Annual Research Achievements

これまでに我々は、フェムトリットルサイズの超微小溶液リアクタアレイ技術を開発し、これを利用した1分子バイオ分析分野を牽引してきた。特に、酵素分子を確率的に1分子単位でfLリアクタに封入し、酵素反応による蛍光信号を二値化することで酵素分子数を決定するデジタルアッセイは、次世代の超高感度診断技術として世界的に注目を浴びている。ただし、これまでのfLリアクタは受動的に溶液を収納するだけであり、その応用範囲には制限があった。そこで、本プロジェクトでは、これまでの「静的」なリアクタ技術から、「動的」なリアクタ技術へと基盤技術を一新することを目指した。
しかしながら、本プロジェクトは、今年度下期より基盤(S)に引き継がれることが決定したため、基盤(A)は本年11月25日で終了することになった。したがって、研究期間は実質1年のみとなったが、当初より計画していた動的フェムトリアクタ技術に関する3つの技術開発要素「分子濃縮」「連続溶液交換」「リアクタ回収」は、それぞれ順調に研究が進展した。「分子濃縮」では、PEG/Dexのマイクロ相分離ドロプレットをリアクタに保持することでDNA分子濃縮に成功した。また、「連続溶液交換」では、空気封入法を用いて10回以上の溶液交換に成功し、インフルエンザウイルスのタミフル耐性を1粒子毎に計測すること成功した。これにより、ウイルス粒子の0.5%程度が平均よりも10倍程度高いタミフル耐性を有することを示す結果を得た。さらに、「リアクタ回収」では、光ピンセットでリアクタ回収に成功している。これらの成果は基盤(S)に引き継がれ知財化・原著論文化を目指す。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2019 Comments on the Screening Results   Annual Research Report
  • Research Products

    (23 results)

All 2019 Other

All Journal Article (6 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 6 results,  Open Access: 3 results) Presentation (16 results) (of which Int'l Joint Research: 8 results,  Invited: 16 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] "Design of Sealable Custom-Shaped Cell Mimicries Based on Self-Assembled Monolayers on CYTOP Polymer"2019

    • Author(s)
      H. Eto, N. Soga, H.G. Franquelim, P. Glock, A. Khmelinskaia, L. Kai, M. Heymann, H. Noji, and P. Schwille
    • Journal Title

      ACS Appl. Mater. Interfaces

      Volume: 11 Issue: 24 Pages: 21372-21380

    • DOI

      10.1021/acsami.9b05073

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  • [Journal Article] Mobile imaging platform for digital influenza virus counting2019

    • Author(s)
      Minagawa Yoshihiro、Ueno Hiroshi、Tabata Kazuhito V.、Noji Hiroyuki
    • Journal Title

      Lab on a Chip

      Volume: 19 Issue: 16 Pages: 2678-2687

    • DOI

      10.1039/c9lc00370c

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  • [Journal Article] Accurate high-throughput screening based on digital protein synthesis in a massively parallel femtoliter droplet array2019

    • Author(s)
      Yi Zhang, Yoshihiro Minagawa, Hiroto Kizoe, Kentaro Miyazaki, Ryota Iino, Hiroshi Ueno, Kazuhito V Tabata, Yasuhiro Shimane, Hiroyuki Noji
    • Journal Title

      Science Advances

      Volume: 5 Issue: 8 Pages: 1-11

    • DOI

      10.1126/sciadv.aav8185

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    • Author(s)
      Akama Kenji、Iwanaga Niina、Yamawaki Koya、Okuda Masaki、Jain Krupali、Ueno Hiroshi、Soga Naoki、Minagawa Yoshihiro、Noji Hiroyuki
    • Journal Title

      ACS Nano

      Volume: 13 Issue: 11 Pages: 13116-13126

    • DOI

      10.1021/acsnano.9b05917

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      Ueno H, Kato Y, Tabata KV, Noji H.
    • Journal Title

      Anal Chem.

      Volume: 91 Issue: 23 Pages: 15171-15178

    • DOI

      10.1021/acs.analchem.9b03960

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      Sakamoto et al
    • Journal Title

      Science Advances (accepted)

      Volume: 未定

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      Hiroyuki Noji
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  • [Remarks] 東京大学 工学系研究科 応用化学専攻 野地研究室

    • URL

      http://www.nojilab.t.u-tokyo.ac.jp/

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Published: 2019-04-18   Modified: 2021-01-27  

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