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Effects of toxic flatworms on toxification of pufferfish - Who is the true TTX producer?

Research Project

Project/Area Number 19H00954
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Review Section Medium-sized Section 40:Forestry and forest products science, applied aquatic science, and related fields
Research InstitutionNihon University

Principal Investigator

ITOI Shiro  日本大学, 生物資源科学部, 教授 (30385992)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 浅川 修一  東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (30231872)
高谷 智裕  長崎大学, 水産・環境科学総合研究科(水産), 教授 (90304972)
鈴木 美和  日本大学, 生物資源科学部, 教授 (70409069)
岩田 繁英  東京海洋大学, 学術研究院, 助教 (80617316)
周防 玲  日本大学, 生物資源科学部, 助教 (20846050)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥44,460,000 (Direct Cost: ¥34,200,000、Indirect Cost: ¥10,260,000)
Fiscal Year 2022: ¥7,670,000 (Direct Cost: ¥5,900,000、Indirect Cost: ¥1,770,000)
Fiscal Year 2021: ¥8,580,000 (Direct Cost: ¥6,600,000、Indirect Cost: ¥1,980,000)
Fiscal Year 2020: ¥12,350,000 (Direct Cost: ¥9,500,000、Indirect Cost: ¥2,850,000)
Fiscal Year 2019: ¥15,860,000 (Direct Cost: ¥12,200,000、Indirect Cost: ¥3,660,000)
Keywordsフグ毒 / テトロドトキシン(TTX) / ツノヒラムシ属 / オオツノヒラムシ / ゲノム解析 / 毒化機構 / ツノヒラムシ属(Planocera) / 食物連鎖 / テトロドトキシン(TTX_) / テトロドトキシン(TTX)
Outline of Research at the Start

これまで申請者らのトラフグ属魚類におけるフグ毒獲得経路および手段に関わる研究で得られた知見をもとに、新たな切り口で研究を行う。すなわち、フグ毒保有魚にフグ毒を供給する主たる生物としてツノヒラムシ属に着目し、これを軸としたフグ毒の授受を解明することで、フグ類が保有するフグ毒の真の供給者を明らかにする。また、ヒラムシ類におけるフグ毒の獲得経路、さらにはフグ毒の授受に関わる生物群の生活史と生態学的地位の変化を探ることで、謎多きフグの毒化機構の全容解明を目指す。

Outline of Final Research Achievements

In order to clarify the main route of supplying TTX to TTX-bearing fish, we focused on the transfer of TTX between TTX-bearing organisms, especially TTX-bearing flatworms, which are widespread in the waters around the Japanese archipelago. The results indicated that TTX-bearing flatworms are restricted to the planocerid lineage, which includes the flatworm Planocera multitentaculata, and that the flatworm in particular is involved in the toxification of TTX-bearing fish juveniles and bivalves, suggesting that it is an organism involved in the toxification with TTX of a wide range of marine organisms. In addition, the amount of TTX increased even when P. multitentaculata were reared for a long period of time on nontoxic food, suggesting that TTX is produced in the body of P. multitentaculata.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

本研究の成果は、これまで多くの研究者が挑戦しながらも不明な点が多く残されていたフグ毒の生産者について、成長に伴ってフグ毒量を増加させる生物を見出し、その生合成機構を解明する足掛かりを得られた点で大きな学術的価値を有すると考えている。同時に、フグ毒保有生物の毒化が、オオツノヒラムシやその近縁のヒラムシの幼生などを摂餌して達成されていることを明らかにしたもので、近年世界で問題視されている二枚貝などの予期せぬ生物のTTXによる毒化への関与も明らかにしたことから、水産食品の安全性確保策の策定にも重要な知見を与える社会的意義の大きな研究成果になったと考えている。

Report

(6 results)
  • 2022 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2021 Annual Research Report
  • 2020 Annual Research Report
  • 2019 Comments on the Screening Results   Annual Research Report
  • Research Products

    (67 results)

All 2023 2022 2021 2020 2019 Other

All Journal Article (21 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 20 results,  Open Access: 16 results) Presentation (39 results) (of which Int'l Joint Research: 4 results,  Invited: 6 results) Book (1 results) Remarks (6 results)

  • [Journal Article] 2. Pufferfish toxin research based on TTX sources in pufferfish2023

    • Author(s)
      米澤遼
    • Journal Title

      NIPPON SUISAN GAKKAISHI

      Volume: 89 Issue: 2 Pages: 159-159

    • DOI

      10.2331/suisan.WA3011-2

    • ISSN
      0021-5392, 1349-998X
    • Year and Date
      2023-03-15
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  • [Journal Article] Levels of Tetrodotoxins in Spawning Pufferfish, Takifugu alboplumbeus2023

    • Author(s)
      Asano Masaki、Ishizaki Chihiro、Tomonou Taiga、Kihara Masato、Ito Masaaki、Yasukawa Shino、Shirai Kyoko、Oyama Hikaru、Izawa Shin、Kawamura Reona、Saito Kanae、Suo Rei、Nakahigashi Ryota、Adachi Masaatsu、Nishikawa Toshio、Sugita Haruo、Itoi Shiro
    • Journal Title

      Marine Drugs

      Volume: 21 Issue: 4 Pages: 207-207

    • DOI

      10.3390/md21040207

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  • [Journal Article] Tetrodotoxin Detection in Japanese Bivalves: Toxification Status of Scallops2023

    • Author(s)
      Yasukawa Shino、Shirai Kyoko、Namigata Kaho、Ito Masaaki、Tsubaki Mei、Oyama Hikaru、Fujita Yukino、Okabe Taiki、Suo Rei、Ogiso Shouzo、Watabe Yukina、Matsubara Hajime、Suzuki Nobuo、Hirayama Makoto、Sugita Haruo、Itoi Shiro
    • Journal Title

      Marine Biotechnology

      Volume: - Issue: 5 Pages: 666-676

    • DOI

      10.1007/s10126-023-10199-3

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  • [Journal Article] Tetrodotoxin Profiles in Xanthid Crab Atergatis floridus and Blue-Lined Octopus Hapalochlaena cf. fasciata from the Same Site in Nagasaki, Japan2023

    • Author(s)
      Yuchengmin Zhang、Yuta Yamate、Takeshi Takegaki、Osamu Arakawa、Tomohiro Takatani
    • Journal Title

      Toxins

      Volume: 15 Issue: 3 Pages: 193-193

    • DOI

      10.3390/toxins15030193

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    • Author(s)
      Yamaki Keita、Sato Kyoka、Kudo Yuta、Cho Yuko、Konoki Keiichi、Takatani Tomohiro、Arakawa Osamu、Kawatsu Kentaro、Yotsu-Yamashita Mari
    • Journal Title

      Toxicon

      Volume: 226 Pages: 107081-107081

    • DOI

      10.1016/j.toxicon.2023.107081

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    • Author(s)
      Suo, R.; Tanaka, M.; Oyama, H.; Kojima, Y.; , Yui, K.; Sakakibara, R.; Nakahigashi, R.; Adachi, M.; Nishikawa, T.; Sugita, H.; Itoi, S.
    • Journal Title

      Toxicon

      Volume: 216 Pages: 169-173

    • DOI

      10.1016/j.toxicon.2022.07.001

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    • Author(s)
      Oyama, H.; Ito, M.; Suo, R.; Goto-Inoue, N.; Morisasa, M.; Mori, T.; Sugita, H.; Mori, T.; Nakahigashi, R.; Adachi, M.; Nishikawa, T.; Itoi, S.
    • Journal Title

      Mar. Biotecnol.

      Volume: 24 Issue: 6 Pages: 1158-1167

    • DOI

      10.1007/s10126-022-10179-z

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    • Author(s)
      Ito, M., Furukawa, R., Yasukawa, S., Sato, M., Oyama, H., Okabe, T., Suo, R., Sugita, H., Takatani, T., Arakawa, O., Adachi, M., Nishikawa, T., Itoi, S.
    • Journal Title

      Toxins

      Volume: 14 Issue: 2 Pages: 150-150

    • DOI

      10.3390/toxins14020150

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    • Author(s)
      Okabe Taiki、Saito Rion、Yamamoto Kohei、Watanabe Riku、Kaneko Yoshiki、Yanaoka Mutsumi、Furukoshi Seika、Yasukawa Shino、Ito Masaaki、Oyama Hikaru、Suo Rei、Suzuki Miwa、Takatani Tomohiro、Arakawa Osamu、Sugita Haruo、Itoi Shiro
    • Journal Title

      Aquatic Toxicology

      Volume: 237 Pages: 105908-105908

    • DOI

      10.1016/j.aquatox.2021.105908

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    • Author(s)
      Zhang Yuchengmin、Tsutsui Hideto、Yamawaki Nobuhiro、Morii Yasuhiro、Nishihara Gregory N.、Itoi Shiro、Arakawa Osamu、Takatani Tomohiro
    • Journal Title

      Marine Drugs

      Volume: 19 Issue: 12 Pages: 670-670

    • DOI

      10.3390/md19120670

    • NAID

      120007186851

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  • [Journal Article] Levels and distribution of tetrodotoxin in the blue-lined octopus Hapalochlaena fasciata in Japan, with special reference to within-body allocation2021

    • Author(s)
      Yamate Yuta、Takatani Tomohiro、Takegaki Takeshi
    • Journal Title

      Journal of Molluscan Studies

      Volume: 87 Issue: 1

    • DOI

      10.1093/mollus/eyaa042

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    • Author(s)
      Zhu Hongchen、Sakai Towa、Nagashima Yuji、Doi Hiroyuki、Takatani Tomohiro、Arakawa Osamu
    • Journal Title

      Toxins

      Volume: 13 Issue: 10 Pages: 731-731

    • DOI

      10.3390/toxins13100731

    • NAID

      120007180584

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    • Author(s)
      Suo Rei、Kashitani Maho、Oyama Hikaru、Adachi Masaatsu、Nakahigashi Ryota、Sakakibara Ryo、Nishikawa Toshio、Sugita Haruo、Itoi Shiro
    • Journal Title

      Marine Drugs

      Volume: 19 Issue: 1 Pages: 40-40

    • DOI

      10.3390/md19010040

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      Kashitani Maho, Okabe Taiki, Oyama Hikaru, Noguchi Kaede, Yamazaki Haruka, Suo Rei, Mori Tetsushi, Sugita Haruo, Itoi Shiro
    • Journal Title

      Marine Biotechnology

      Volume: 22 Issue: 6 Pages: 805-811

    • DOI

      10.1007/s10126-020-09968-1

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    • Author(s)
      Shiro Itoi, Tatsunori Sato, Mitsuki Takei, Riko Yamada, Ryuya Ogata, Hikaru Oyama, Shun Teranishi, Ayano Kishiki, Takenori Wada, Kaede Noguchi, Misato Abe, Taiki Okabe, Hiroyuki Akagi, Maho Kashitani, Rei Suo, Tomoko Koito, Tomohiro Takatani, Osamu Arakawa, Haruo Sugita
    • Journal Title

      Chemosphere

      Volume: 249 Pages: 126217-126217

    • DOI

      10.1016/j.chemosphere.2020.126217

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      Ryo Yonezawa, Shiro Itoi, Yoji Igarashi, Kazutoshi Yoshitake, Hikaru Oyama, Shigeharu Kinoshita, Rei Suo, Shinichi Yokobori, Haruo Sugita, Shuichi Asakawa
    • Journal Title

      Mitochondrial DNA Part B

      Volume: 未定 Issue: 3 Pages: 2352-2354

    • DOI

      10.1080/23802359.2020.1730255

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    • Author(s)
      Zhu Hongchen, Sonoyama Takayuki、Yamada Misako、Gao Wei、Tatsuno Ryohei、Takatani Tomohiro、Arakawa Osamu
    • Journal Title

      Toxins

      Volume: 12 Issue: 7 Pages: 436-436

    • DOI

      10.3390/toxins12070436

    • NAID

      120006988125

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      Baek Seung Ho, Choi Jung Min, Lee Minji, Park Bum Soo, Zhang Yuchengmin, Arakawa Osamu, Takatani Tomohiro, Jeon Joong-Kyun, Kim Young Ok
    • Journal Title

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      Volume: 12 Issue: 7 Pages: 442-442

    • DOI

      10.3390/toxins12070442

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    • Author(s)
      Zhu, H., Yamada, A., Goto, Y., Horn, L., Ngy, L., Wada, M., Doi, H., Lee, JS., Takatani, T., Arakawa, O
    • Journal Title

      Toxins

      Volume: 12 Issue: 11 Pages: 689-703

    • DOI

      10.3390/toxins12110689

    • NAID

      120006988469

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  • [Journal Article] Toxic Flatworm Egg Plates Serve as a Possible Source of Tetrodotoxin for Pufferfish2019

    • Author(s)
      Taiki Okabe, Hikaru Oyama, Maho Kashitani, Yuta Ishimaru, Rei Suo, Haruo Sugita, Shiro Itoi
    • Journal Title

      Toxins

      Volume: 11 Issue: 7 Pages: 402-402

    • DOI

      10.3390/toxins11070402

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    • Author(s)
      Gao Wei、Kanahara Yoko、Yamada Misako、Tatsuno Ryohei、Yoshikawa Hiroyuki、Doi Hiroyuki、Takatani Tomohiro、Arakawa Osamu
    • Journal Title

      Toxins

      Volume: 11 Issue: 8 Pages: 470-470

    • DOI

      10.3390/toxins11080470

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      2021 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] ツムギハゼおよびオキナワフグにおける毒化機構の種差に関する研究2022

    • Author(s)
      伊藤正晟、古川理紗子、尾山 輝、安川詩乃、岡部泰基、佐藤雅哉、周防 玲、杉田治男、高谷智裕、荒川 修、安立昌篤、西川俊夫、糸井史朗
    • Organizer
      令和4年度日本水産学会大会春季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 日本近海域に生息する二枚貝類のフグ毒保有状況2022

    • Author(s)
      安川詩乃、伊藤正晟、尾山 輝、藤田雪乃、岡部泰基、小木曽正造、渡部雪菜、松原 創、鈴木信雄、平山 真、高谷智裕、荒川 修、杉田治男、周防 玲、糸井史朗
    • Organizer
      令和4年度日本水産学会大会春季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] オオツノヒラムシにおけるテトロドトキシンの生産と細菌の寄与2022

    • Author(s)
      米澤 遼、林 健太朗、吉武和敏、JDM Senevirathna、スミス梨花、満山 進、木下滋晴、尾山 輝、上田紘之、周防 玲、杉田治男、安立昌篤、中東亮太、西川俊夫、モリテツシ、糸井史朗、浅川修一
    • Organizer
      令和4年度日本水産学会大会春季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] オオツノヒラムシ体内のテトロドトキシンの局在2022

    • Author(s)
      林健太朗、米澤 遼、吉武和敏、佐藤荘志、JDM Senevirathna、スミス梨花、木下滋晴、尾山 輝、岡部泰基、周防 玲、杉田治男、高谷智裕、荒川 修、糸井史朗、浅川修一
    • Organizer
      令和4年度日本水産学会大会春季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] オオツノヒラムシに共生するテトロドトキシン産生微生物の探索および解明2021

    • Author(s)
      山﨑遥香、木下彩、周防玲、糸井史朗、モリテツシ
    • Organizer
      第21回マリンバイオテクノロジー学会大会
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      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 琉球列島におけるフグ毒保有魚の稚魚期の毒性に関する研究2021

    • Author(s)
      伊藤正晟、古川理紗子、尾山輝、佐藤雅哉、周防玲、杉田治男、糸井史朗
    • Organizer
      第21回マリンバイオテクノロジー学会大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] フグ毒保有生物オオツノヒラムシの産卵生態に及ぼす水温の影響2021

    • Author(s)
      尾山 輝、岡部泰基、周防 玲、杉田治男、安立昌篤、西川俊夫、糸井史朗
    • Organizer
      令和3年度日本水産学会大会秋季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] アズマニシキガイのフグ毒保有に関する研究2021

    • Author(s)
      安川詩乃、椿 芽衣、齋藤李音、山本倖平、渡邊 陸、金子慶己、岡部泰基、伊藤正晟、佐藤雅哉、尾山 輝、周防 玲、杉田治男、糸井史朗
    • Organizer
      令和3年度日本水産学会大会秋季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] ツムギハゼおよびオキナワフグのTTXおよび類縁化合物に関する研究2021

    • Author(s)
      伊藤正晟、古川理紗子、尾山 輝、安川詩乃、佐藤雅哉、周防 玲、杉田治男、高谷智裕、荒川 修、糸井史朗
    • Organizer
      令和3年度日本水産学会大会秋季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] ツノヒラムシ属の幼生におけるテトロドトキシン保持の生物学的役割2021

    • Author(s)
      米澤 遼、林健太朗、尾山 輝、伊藤正晟、安川詩乃、周防 玲、吉武和敏、JDM Senevirathna、スミス梨花、佐藤荘志、杉田治男、木下滋晴、糸井史朗、浅川修一
    • Organizer
      令和3年度日本水産学会大会秋季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] ホールマウント免疫染色を用いたトラフグ仔魚の体表におけるテトロドトキシン局在の観察および<I>Planocera</I>属ヒラムシへの応用2021

    • Author(s)
      林健太朗、米澤遼、岡部泰基、尾山輝、吉武和敏、JDM Senevirathna、スミス梨花、周防 玲、杉田治男、高谷智裕、荒川 修、木下滋晴、糸井史朗、浅川修一
    • Organizer
      令和3年度日本水産学会大会秋季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] フグ毒テトロドトキシンを保有するPlanocera属ヒラムシの幼生飼育の現状と課題 ~18Sメタゲノム 解析を用いたヒラムシ幼生捕食者の推定~2021

    • Author(s)
      米澤遼、林健太朗、吉武和敏、尾山輝、岡部泰基、五十嵐洋治、JDM Senevirathna、Smith Ashley 梨花、周防玲、杉田治男、木下滋晴、糸井史朗、浅川修一
    • Organizer
      2021年度日本水産学会春季大会
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
  • [Presentation] フグはいかにしてTTXを獲得し、 何に使うのか?2021

    • Author(s)
      糸井史朗
    • Organizer
      第36回マリントキシン研究会
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 捕食者の毒獲得機構の検討―被食者の毒の獲得に注目して―2021

    • Author(s)
      岩田繁英
    • Organizer
      日本生態学会
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      2020 Annual Research Report
  • [Presentation] フグ毒テトロドトキシンを保有するヒラムシのドラフトゲノム構築2020

    • Author(s)
      米澤遼、五十嵐洋治、吉武和敏、糸井史朗、周防玲、杉田治男、木下滋晴、浅川修一
    • Organizer
      令和2年度日本水産学会春季大会
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      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] クサフグの毒化に及ぼすヒラムシの卵の影響2019

    • Author(s)
      岡部泰基、尾山輝、柏谷真保、石丸悠太、周防玲、杉田治男、糸井史朗
    • Organizer
      令和元年度日本水産学会秋季大会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] The hunt for tetrodotoxin producers from the flatworm, <I>Planocera multitentaculata</I>2019

    • Author(s)
      Haruka Yamazaki, Maho Kashitani, Yasuhito Yokoi, Taiki Okabe, Hikaru Oyama, Shiro Itoi, Haruo Sugita, Tetsusi Mori
    • Organizer
      Marine Biotechnology Conference 2019
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Distribution of tetrodotoxin in acotylean flatworms (Platyhelminthes)2019

    • Author(s)
      Maho Kashitani,Taiki Okabe,Hikaru Oyama,Kaede Noguchi,Haruka Yamazaki,Rei Suo,Tetsushi Mori,Haruo Sugita,Shiro Itoi
    • Organizer
      Marine Biotechnology Conference 2019
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] フグにおけるフグ毒の役割2019

    • Author(s)
      糸井史朗
    • Organizer
      第12回北陸合同バイオシンポジウム
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Pufferfish ingests tetrodotoxin by feeding on toxic egg plates of the flatworm <I>Planocera multitentaculata</I>2019

    • Author(s)
      Taiki Okabe, Hikaru Oyama, Maho Kashitani, Yuta Ishimaru, Rei Suo, Haruo Sugita, Shiro Itoi
    • Organizer
      International Symposium on Aquatic Metagenomics
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Towards the elucidation of the origin of tetrodotoxin (TTX): metagenomic analysis of toxic flatworm2019

    • Author(s)
      Ryo Yonezawa, Shiro Itoi, Yoji Igarashi, Kazutoshi Yoshitake, Hikaru Oyama, Shigeharu Kinoshita, Rei Suo, Shinichi Yokobori, Haruo Sugita, Shuichi Asakawa
    • Organizer
      International Symposium on Aquatic Metagenomics
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 人工種苗トラフグの孵化後初期におけるTTX量の変化2019

    • Author(s)
      五十川純太、鈴木重則、荒川修、高谷智裕
    • Organizer
      令和元年度日本水産学会秋季大会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] 石垣島米原ウモレオウギガニの地理的分布と保有毒成分2019

    • Author(s)
      Zhang Yuchengmin、上西園透生、筒井英人、山脇信博、森井康弘、荒川修、高谷智裕
    • Organizer
      令和元年度日本水産学会秋季大会
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      2019 Annual Research Report
  • [Book] 無毒フグ肝を食用化する2022

    • Author(s)
      野口玉雄、濱田英嗣、荒川 修(分担執筆:伊藤吉成、大貫和恵、小川英明、木村道也、佐々木満、高谷智裕、村上りつ子、横山博司)
    • Total Pages
      143
    • Publisher
      筑波書房
    • ISBN
      9784811906188
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      2021 Annual Research Report
  • [Remarks] チコちゃんに叱られる! ▽旅館の窓際空間の謎▽打ち合わせの謎▽フグ毒の謎

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      https://www.nhk.jp/p/chicochan/ts/R12Z9955V3/episode/te/32XL471JPL/

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      2021 Annual Research Report
  • [Remarks] NHK総合 ダーウィンが来た! さかなクンと大研究!フグ最強伝説

    • URL

      https://www.nhk.jp/p/darwin/ts/8M52YNKXZ4/episode/te/YVVJ9J1PR6/

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      2020 Annual Research Report
  • [Remarks] フグは毒をどこから獲得し、何に使っているのか?(大人が楽しむ科学教室2020;於千葉市科学館)

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      http://www.chibashi-science-festa.com/event2020/2021/01/2020-14.html

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      2020 Annual Research Report
  • [Remarks] クサフグは毒を獲得するためにヒラムシの有毒卵を食べる

    • URL

      http://www.msr-nihon-university.org/2019/07/16/

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      2019 Annual Research Report
  • [Remarks] 岡部泰基が国際メタゲノムシンポジウム2019でベストポスター賞を受賞しました

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      http://www.msr-nihon-university.org/2019/12/15/

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      2019 Annual Research Report
  • [Remarks] フグ毒保有魚は、有毒ヒラムシの幼生を摂餌して毒化する

    • URL

      http://www.msr-nihon-university.org/2020/02/17/

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      2019 Annual Research Report

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Published: 2019-04-18   Modified: 2024-01-30  

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