Molecular design for adeno-associated virus vector production in recombinant insect cells
| Project/Area Number |
19H02525
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 27040:Biofunction and bioprocess engineering-related
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
Yamaji Hideki 神戸大学, 工学研究科, 教授 (40283874)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2021)
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| Budget Amount *help |
¥17,550,000 (Direct Cost: ¥13,500,000、Indirect Cost: ¥4,050,000)
Fiscal Year 2021: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2020: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
Fiscal Year 2019: ¥8,580,000 (Direct Cost: ¥6,600,000、Indirect Cost: ¥1,980,000)
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| Keywords | 昆虫細胞 / 組換えタンパク質生産 / アデノ随伴ウイルスベクター / 生物化学工学 |
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| Outline of Research at the Start |
遺伝子治療は，治療に必要な遺伝子を患者の細胞に導入し，発現させることにより疾患を治療する医療技術である．アデノ随伴ウイルス (AAV) ベクターは安全性が高く，遺伝性疾患を対象とした遺伝子治療において顕著な治療成績を上げている．しかしながら，AAVベクターは作製法が煩雑であるため，高品質なベクターの大量生産は困難となっている．本研究では，昆虫細胞による高品質のAAVベクターの高生産技術を構築するために，AAVベクターの最適な分子設計を検討する．
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| Outline of Final Research Achievements |
A novel production technology for replication-deficient recombinant adeno-associated virus (AAV) vectors that uses insect cells as host cells but does not use baculoviruses was investigated. The genes for AAV regulatory proteins Rep and capsid proteins Cap were introduced into insect cells using plasmid vectors to express Rep and Cap proteins. By using promoters and artificial introns that independently function in insect cells, we demonstrated that AAV vectors can be produced using insect cells as host cells without the use of baculoviruses.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
昆虫細胞－バキュロウイルス系は，AAVベクターの生産性が高い，スケールアップが容易で大量生産に適しているなどの利点を有している．しかしながら，特に遺伝子治療用のウイルスベクターを生産する場合，ベクター粒子とバキュロウイルス粒子の分離が問題となる．本研究では，昆虫細胞で独自に機能するプロモーターと人工イントロンを利用することにより，バキュロウイルスを用いなくとも，昆虫細胞を宿主としてAAVベクターを生産可能であることを明らかにした．宿主として昆虫細胞を用いるもののバキュロウイルスフリーのAAVベクターの生産技術はこれまで報告されおらず，実用的にもきわめて有用である．
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Report
(4 results)
Research Products
(18 results)
