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High-throughput cell sorting system using particle liquid-liquid partition

Research Project

Project/Area Number 19H02739
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Review Section Basic Section 34020:Analytical chemistry-related
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

Fukuyama Mao  東北大学, 多元物質科学研究所, 講師 (40754429)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 白木 賢太郎  筑波大学, 数理物質系, 教授 (90334797)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥17,030,000 (Direct Cost: ¥13,100,000、Indirect Cost: ¥3,930,000)
Fiscal Year 2022: ¥2,990,000 (Direct Cost: ¥2,300,000、Indirect Cost: ¥690,000)
Fiscal Year 2021: ¥7,540,000 (Direct Cost: ¥5,800,000、Indirect Cost: ¥1,740,000)
Fiscal Year 2020: ¥2,990,000 (Direct Cost: ¥2,300,000、Indirect Cost: ¥690,000)
Fiscal Year 2019: ¥3,510,000 (Direct Cost: ¥2,700,000、Indirect Cost: ¥810,000)
Keywords自然乳化 / 逆ミセル / マイクロ流体 / ナノ粒子 / イムノアッセイ / マイクロ水滴 / エマルション / ソーティング / 細胞分離 / 界面活性剤 / Droplet microfluidics / マイクロ分析
Outline of Research at the Start

再生医療の分野においては「細胞の品質管理」の観点より、高速・高選択性・ダメージレスな細胞分離・精製法の開発が望まれる。しかし、現在普及するFluorescence Activated Cell Sorting system (FACS)やMagneticCell Sorting System (MACS)では、この3つの要件を同時に満たすことはできなかった。本研究では、ナノ粒子の逆ミセルへの輸送現象を細胞分離の原理として用い、超高速・ダメージレス細胞精製法の開発を目指す。

Outline of Final Research Achievements

In this study, we established immunoassay methods in aqueous microdroplets using spontaneous emulsification. The first method is a sandwich immunoassay utilizing inorganic salt enrichment by spontaneous emulsification and accumulation at the interface of the nanoparticles. The second method, competitive immunoassay, was established using selective separation of small molecules by spontaneous emulsification. This technique enabled the semiquantitative detection of secretions from multiple cells in a single droplet.
In addition, through this study, we found the factors that cause spontaneous emulsification by Span 80: the smaller the Span 80 reverse micelle, the lower the chemical potential of water, and the difference in chemical potential drives spontaneous emulsification.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

本研究では、自然乳化を利用したマイクロ水滴内イムノアッセイを確立した。特に、粒子を用いた手法では自然乳化による定量的濃縮操作を利用することで、マイクロ流体デバイスを用いることなくBF分離を実現できる可能性がある。本手法により、今後、細胞分泌物のハイスループットな検出とそれに基づく細胞分離が可能になると期待する。
また、Span 80を用いた自然乳化メカニズムを明らかにした。自然乳化は外力不要乳化法であり、エマルションのみならずナノ粒子やドラッグキャリアなどの材料合成にも応用されている。本成果を通じ、自然乳化を起こしうる新たな界面活性剤のデザインが可能になり、産業応用の拡大につながると期待する。

Report

(5 results)
  • 2022 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2021 Annual Research Report
  • 2020 Annual Research Report
  • 2019 Annual Research Report
  • Research Products

    (10 results)

All 2023 2021 2020 2019

All Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 2 results) Presentation (8 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 6 results)

  • [Journal Article] Transport of Oligopeptide from Aqueous Phase to Span 80 Reverse Micelles in Microdroplet Array2021

    • Author(s)
      Mao Fukuyama, Makoto Suto, Akihide Hibara
    • Journal Title

      Analytical Sciences

      Volume: 37 Issue: 5 Pages: 753-758

    • DOI

      10.2116/analsci.20SCP18

    • NAID

      130008036570

    • ISSN
      0910-6340, 1348-2246
    • Year and Date
      2021-05-10
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Controlling water transport between micelles and aqueous microdroplets during sample enrichment2021

    • Author(s)
      Mao Fukuyama, Lin Zhou, Tetsuo Okada, Kristina V. Simonova, Mikhail Proskurnin, Akihide Hibara
    • Journal Title

      Analytica Chimica Acta

      Volume: 1149 Pages: 338212-338212

    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Presentation] 水・ミセル間分子輸送の理解と微量生化学分析への応用2023

    • Author(s)
      福山真央
    • Organizer
      日本化学会第103春季年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Micelle manipulation for biochemical microanalyses using microdroplets2021

    • Author(s)
      Mao Fukuyama
    • Organizer
      The 2020 International Chemical Congress of Pacific Basin Societies (Pacifichem 2020)
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 界面物理化学を利用した微量試料前処理操作の開発2021

    • Author(s)
      福山真央
    • Organizer
      日本分析化学会第70年会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] ナノ・マイクロサイズの分析化学 ~微小現象の理解に向けて~2021

    • Author(s)
      福山真央
    • Organizer
      第8回 V-iCliniX講座セミナー
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] FAST DROPLET ENRICHMENT USING SPONTANEOUS EMULSIFICATION2020

    • Author(s)
      Piangrawee Santivongskul, Mao Fukuyama, Akihide Hibara
    • Organizer
      The 24th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 水相-逆ミセル間の物質輸送の定量的評価とマイクロ濃縮・精製操作への応用2020

    • Author(s)
      福山 真央, 火原 彰秀
    • Organizer
      日本分析化学会第69年会
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 水相-ミセル間分子移動を利用したマイクロ水滴内イムノアッセイ法の開発2020

    • Author(s)
      福山 真央, 火原 彰秀
    • Organizer
      日本分析化学会第80回分析化学討論会
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Droplet microfluidicsを用いたLLPS高速アッセイ法の展望2019

    • Author(s)
      福山真央、火原彰秀
    • Organizer
      第4回LLPS研究会・ASUKA若手交流会2019
    • Related Report
      2019 Annual Research Report

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Published: 2019-04-18   Modified: 2024-12-25  

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