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セスバニア根粒菌の病原性と細胞内感染能:非マメ科植物への感染拡大に向けた基盤研究

Research Project

Project/Area Number 19H02858
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Review Section Basic Section 38010:Plant nutrition and soil science-related
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

青野 俊裕  東京大学, 生物生産工学研究センター, 講師 (10372418)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 江澤 辰広  北海道大学, 農学研究院, 准教授 (40273213)
小川 哲弘  東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 助教 (40323480)
石綱 史子  東京家政学院大学, 現代生活学部, 准教授 (40772281)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2022-03-31
Project Status Declined (Fiscal Year 2021)
Budget Amount *help
¥17,550,000 (Direct Cost: ¥13,500,000、Indirect Cost: ¥4,050,000)
Fiscal Year 2021: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2020: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
Fiscal Year 2019: ¥8,580,000 (Direct Cost: ¥6,600,000、Indirect Cost: ¥1,980,000)
Keywords根粒菌 / 病原菌 / 共生 / R-body / reb遺伝子 / 病原性
Outline of Research at the Start

非マメ科植物に窒素固定を発揮させることは、農業上重要な課題である。Azorhizobium caulinodansは、マメ科植物の根粒菌でありながら、非マメ科植物の根組織内にも感染し、また単生窒素固定細菌でもある。我々は、①本菌はR-body生産という病原菌的側面を持っており、宿主への細胞内感染後に宿主細胞を殺傷できること、②本菌は非マメ科植物であるシロイヌナズナの全身に、部位によっては細胞内にも感染できることをこれまでに見出している。本研究は、この病原性と感染性を最大限に制御・利用することで、広範囲の非マメ科植物に本菌を定着させ、高い窒素固定活性を発揮させることを目標とした基盤研究である。

Outline of Annual Research Achievements

セスバニア根粒菌は、マメ科植物セスバニアに根粒・茎粒を形成するが、非マメ科植物 のエンドファイトでもあり、単生窒素固定細菌でもある。我々は、本菌はR-body生産という病原菌的側面を持っており、セスバニアへの細胞内感染後に宿主細胞を殺傷できることを見出している。R-bodyとは、reb遺伝子群にコードされる低分子タンパク質群の巨大ポリマーである。セスバニア根粒菌は、reb遺伝子群と自己転写促進因子をコードするrebオペロンを持っており、通常はrebオペロン外にコードされる転写因子群によってその発現が抑制されている。また、rebオペロンの発現に必須な転写因子もまた、rebオペロン外の遺伝子によってコードされていることが昨年度までに判明した。一方、本菌は非マメ科植物であるシロイヌナズナの全身に、部位によっては細胞内にも感染できることも、我々は見出している。
本菌の病原性と感染性を最大限に制御・利用すれば、広範囲の非マメ科植物に本菌を定着させ、高い窒素固定活性を発揮させることができると我々は考えている。その基盤を築くため、本研究では、R-bodyの生産機構と病原性作用機序の解明と、シロイ ヌナズナへの全身感染・細胞内感染機構の解明を目的としている。
本年度は、rebオペロンの発現制御系の解明を更に深めた。これまで、rebオペロンの発現に影響を及ぼす環境要因として、環境中の2オキソグルタル酸濃度と温度を見出してきた。本年度は、ゲノムワイドな変異株スクリーニングを行うことで、シデロフォア生産関連遺伝子破壊株におけるrebオペロンの発現が異常になることを見出した。シデロフォアは細菌が環境中の鉄を獲得するのに重要な役割を果たすことが知られている。これをヒントに実験を行ったところ、鉄濃度がrebオペロンの発現に影響を及ぼすという新事実を見出すことができた。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

セスバニア根粒菌のR-dody生産が、鉄濃度に制御されているという事実を発見できたのは、微生物学分野に於いて大きな成果である。

Strategy for Future Research Activity

シロイヌナズナへの感染機構について、もっとフォーカスするする必要がある。

Report

(2 results)
  • 2020 Annual Research Report
  • 2019 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2020 2019

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] LysR-type transcriptional regulator of high temperature inducible class A β-lactamase gene controls pathogenic R-body production genes in Azorhizobium caulinodans2020

    • Author(s)
      Hirakawa Tomoki、Matsuoka Jun-Ichi、Morohashi Kengo、Hidaka Makoto、Ogawa Tetsuhiro、Aono Toshihiro
    • Journal Title

      Soil Science and Plant Nutrition

      Volume: 67 Issue: 1 Pages: 57-70

    • DOI

      10.1080/00380768.2020.1840263

    • NAID

      210000158621

    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Intercellular and intracellular colonization of Azorhizobium caulinodans in Arabidopsis thaliana under nitrogen deficient conditions2020

    • Author(s)
      Kurumisawa Keigo、Ishizuna Fumiko、Matsuoka Jun-Ichi、Ogawa Tetsuhiro、Morohashi Kengo、Aono Toshihiro
    • Journal Title

      Soil Science and Plant Nutrition

      Volume: 67 Issue: 1 Pages: 71-79

    • DOI

      10.1080/00380768.2020.1842139

    • NAID

      210000158619

    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] セスバニア根粒菌の宿主細胞殺傷能に関わるrebオペロンの発現に必須な新規転写因子の機能解析2020

    • Author(s)
      平川智基、松岡淳一、小川哲弘、諸橋賢吾、青野俊裕
    • Organizer
      日本土壌肥料学会2020年度岡山大会
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
  • [Presentation] セスバニア根粒菌の宿主殺傷能とβ-lactam 系抗生物質耐性能は転写因子 AmpR を介して温度により制御される2019

    • Author(s)
      平川智基、松岡淳一、諸橋賢吾、青野俊裕
    • Organizer
      第12回北陸合同バイオシンポジウム
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] AmpRを介して温度により制御されるセスバニア根粒菌の宿主殺傷能と抗生物質耐性能2019

    • Author(s)
      平川智基、松岡淳一、諸橋賢吾、青野俊裕
    • Organizer
      日本土壌肥料学会2019年度静岡大会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report

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Published: 2019-04-18   Modified: 2021-12-27  

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