| Project/Area Number |
19H03717
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 55010:General surgery and pediatric surgery-related
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
山田 和彦 鹿児島大学, 総合科学域総合研究学系, 教授 (40241103)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
清水 章 日本医科大学, 大学院医学研究科, 大学院教授 (00256942)
佐原 寿史 鹿児島大学, 総合科学域総合研究学系, 准教授 (90452333)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2020-03-31
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| Project Status |
Discontinued (Fiscal Year 2019)
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| Budget Amount *help |
¥17,420,000 (Direct Cost: ¥13,400,000、Indirect Cost: ¥4,020,000)
Fiscal Year 2019: ¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
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| Keywords | 移植・再生医療 / キメラ / クラウン系ミニブタ / 体外循環 / 前臨床研究 / MHC / 免疫寛容 / トランスレーショナル研究 / 小腸移植 / 移植片対宿主反応 |
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| Outline of Research at the Start |
本申請研究は、臨床症例から得られた知見に基づく仮説をもとにして、1）腹部移植における移植片対宿主、あるいは宿主対移植片反応の詳細な解析を行い、2）さらに骨髄局在性の移植片対宿主反応を利用することによって、通常キメラ確立に必要な放射線療法を行わず、かつ全身性GVHDの臨床症状発症を伴うことなく、小腸移植で免疫寛容を導くことを可能とする治療戦略をミニブタを用いた前臨床研究により開発し、革新的な小腸移植免疫寛容誘導戦略の確立を図るものである。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本課題の初年度研究期間で、本研究課題に必須となる以下2点を評価し、以下の成果を得た。
（1）これまでの移植後験動物検体を用いたキメラの検討： クラウン系ミニブタ2系統（C1、C2）のMHCはSigma-Aldrich社に依頼・合成したSLA class1をターゲットとしたプライマーを用いたDNAタイピングで判別可能である。今回、各組織から抽出したRNAからRT-PCR法によりc-DNAを合成し、q-PCR法を用いてキメラ解析を行った。C1‐C2不適合下で行った小腸並びに肝臓・小腸移植4症例から術後DNAキメリズムを末梢血単核球、骨髄細胞、腸間膜リンパ節、肝臓などの検体を用い検討した。症例数が少ないことから結論を得るには至らなかったものの、レシピエント（C2）においてドナー（C1）タイプのDNAを確認し、キメラが確立を示唆する結果を得た。
（2）多臓器移植無肝期の循環維持のためのY字バイパス体外循環の確立： Outputとして12Frのカニューレを2本用い、1本を体循環バイパス目的に腹部腎静脈下方のIVCに端側吻合した静脈グラフトから挿入、もう1本を門脈循環バイパス目的に脾静脈から挿入し、Y字コネクターで接合した。またInputとして14Frのカニューレを左外頸静脈に挿入した。小児用体外循環ポンプを用いて1000-1250rpm（300-500ml/min）の条件下に体外循環を行った。横隔膜下IVC並びに門脈、肝臓下部IVCをクロスクランプすることで無肝期を誘導し、酸素飽和度、動脈血圧、心拍数を5分間隔で測定し、更に血液検体としてAST, ALT、LDH、動脈血液ガス分析を測定した。結果として、無肝期状態における体循環・門脈循環のY字バイパス体外循環によって2時間の安定したバイタル経過と組織障害およびアシドーシスの抑制を得ており、今後の研究の第一歩としての情報を得たと考える。
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| Research Progress Status |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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