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Elucidation of genes that respond to awakening signals in previously uncultured microorganisms

Research Project

Project/Area Number 19K05804
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 38020:Applied microbiology-related
Research InstitutionYasuda Women's University

Principal Investigator

MURAKAMI Chiho  安田女子大学, 薬学部, 助教 (50649077)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 青井 議輝  広島大学, 統合生命科学研究科(先), 准教授 (40386636)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2021: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Keywords難培養性微生物 / 亜硝酸酸化細菌 / Nitrospira / 休眠と覚醒 / RNA-seq / 覚醒シグナル / 休眠・覚醒 / totalRNA-seq
Outline of Research at the Start

これまで, 難培養性微生物である亜硝酸酸化細菌 Nitrospira の増殖メカニズムを調べてきた。その結果, Nitrospira には栄養源となる亜硝酸があっても増殖をしない状態があることが分かった。この増殖しない状態 の Nitrospira に自身の培養上清を添加したところ, 増殖が見られた。これを「休眠状態からの覚醒」と定義する。
本研究では, 休眠状態の Nitrospira が自身の培養上清(覚醒シグナル)を感知する機構を明らかにする。休眠状態, 覚醒状態, 増殖状態の3状態の遺伝子発現の違いをRNA-seqによって網羅的に解析することにより, シグナル感知機構を解明する。

Outline of Final Research Achievements

The expression levels of all genes were comprehensively investigated by extracting RNA from the previously uncultured Nitrospira strain ND1 and performing next-generation sequencing. As a result, it revealed that ND1 has a third state, awakening, between the dormant and growing states.
Furthermore, it was found that dormant/awakening phenomena are also caused in the Nitrospira strain NJ1 (a different strain known to exist in the vicinity of ND1 in the natural environment). The metabolites of ND1 and NJ1 also induced awakening from each other's dormant state. These results suggested that these strains regulate each other's growth in the natural environment.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

環境中の多くの微生物が人工培養できない(難培養性)理由についてはほとんど明らかになっていない。本研究結果は, 申請者らが世界で初めて純菌株の獲得に成功した難培養性亜硝酸化細菌(Nitrospira)を用いることで, 環境中の微生物の増殖をコントロールする新しい原理の発見につながる。すなわち、休眠状態にある環境微生物を覚醒させて増殖させるには、代謝物に含まれる覚醒シグナルが必要であることが分かった。

Report

(5 results)
  • 2022 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2021 Research-status Report
  • 2020 Research-status Report
  • 2019 Research-status Report
  • Research Products

    (23 results)

All 2023 2022 2021 2020 2019 Other

All Journal Article (4 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 4 results,  Open Access: 2 results) Presentation (16 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results) Remarks (2 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] 25-hydroxycholesterol-induced cell death via activation of ROCK/LINK/cofiin axis in colorectal cancer cell spheroids2022

    • Author(s)
      Ayaho Hitsuda, Reona Dan, Ayaka Urakawa, Yasuna Hiraoka, Chiho Murakami, Hideya Yamamoto, Arowu R.Tanaka:
    • Journal Title

      The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology

      Volume: 216 Pages: 106037-106037

    • DOI

      10.1016/j.jsbmb.2021.106037

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    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cultivation of previously uncultured sponge-associated bacteria using advanced cultivation techniques: A perspective on possible key mechanisms.2022

    • Author(s)
      Jung, D.; Machida, K.; Nakao, Y.; Owen, J. S.; He, S.; Kindaichi, T.; Ohashi, A.; Aoi, Y.
    • Journal Title

      Front. Mar. Sci., Sec. Aquatic Microbiology

      Volume: 9 Pages: 963277-963277

    • DOI

      10.3389/fmars.2022.963277

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    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Mutualistic relationship between <i>Nitrospira</i> and concomitant heterotrophs2021

    • Author(s)
      Murakami Chiho、Machida Koshi、Nakao Yoichi、Kindaichi Tomonori、Ohashi Akiyoshi、Aoi Yoshiteru
    • Journal Title

      Environmental Microbiology Reports

      Volume: 14 Issue: 1 Pages: 130-137

    • DOI

      10.1111/1758-2229.13030

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    • Author(s)
      Murakami Chiho、Tanaka Arowu R.、Sato Yuichiro、Kimura Yasuhiro、Morimoto Kinjiro
    • Journal Title

      Journal of Microbiological Methods

      Volume: 189 Pages: 106310-106310

    • DOI

      10.1016/j.mimet.2021.106310

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  • [Presentation] 難培養性微生物Nitrospiraの共存微生物による増殖促進メカニズムの解明2019

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      村上千穂 金田一智規 町田光史 中尾洋一 大橋晶良 青井議輝
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  • [Presentation] 難培養性微生物Nitrospiraの覚醒シグナルに応答する遺伝子の解明2019

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      日本微生物生態学会 第33回大会
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      田村淳 寺地裕康 村上千穂 金田一智規 大橋晶良 青井議輝
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      日本微生物生態学会 第33回大会
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  • [Presentation] なぜコロニーをつくらないのか?難培養性の亜硝酸酸化細菌Nitrospiraの増殖制御機構に迫る2019

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      田村淳 寺地裕康 村上千穂 加藤節 中島田豊 金田一智規 大橋晶良 青井議輝
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  • [Remarks] 医療免疫学分野と広島大学による研究成果が掲載されました

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      https://www.yasuda-u.ac.jp/course/pharmacy/news/page/environmental_microbiology_report.html

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  • [Patent(Industrial Property Rights)] 微生物検出方法2023

    • Inventor(s)
      村上千穂
    • Industrial Property Rights Holder
      村上千穂
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2023
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URL: 

Published: 2019-04-18   Modified: 2024-01-30  

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