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Development of gene knockout method using virus vector in coniferous trees

Research Project

Project/Area Number 19K06154
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 40010:Forest science-related
Research InstitutionForest Research and Management Organization

Principal Investigator

Konagaya Ken-ichi  国立研究開発法人森林研究・整備機構, 森林総合研究所 森林バイオ研究センター, 主任研究員 等 (30582762)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 七里 吉彦  国立研究開発法人森林研究・整備機構, 森林総合研究所 森林バイオ研究センター, 主任研究員 等 (80461292)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2022-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2021)
Budget Amount *help
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Keywordsリンゴ小球形潜在ウイルス / ルシフェラーゼ / NPBT / ゲノム編集 / スギ / ALSV / 無花粉 / ウイルスベクター / 花粉症
Outline of Research at the Start

ウイルスベクターは遺伝子の運搬体(ベクター)として植物ウイルスを用い、その感染力を利用して目的遺伝子を植物体内で発現できる系として、遺伝子の機能解析や形質の改変等に広く利用されている。本研究では、ウイルスベクターを用いてゲノム上の任意の塩基配列を切断するDNA切断酵素を針葉樹で発現させ、狙った遺伝子を破壊する遺伝子ノックアウト法の新技術を開発する。スギを針葉樹のモデルとし、花粉形成に関与する遺伝子を破壊することで、既に開発・普及している成長や材質形質に優れるスギの有用品種を遺伝子組換えすることなく、迅速に無花粉化させる技術へ展開させることを目標とする。

Outline of Final Research Achievements

The aim of this study is to develop a technology for genome editing without genetic transformation by using a virus that can infect Japanese cedar as a vector (gene carrier) and expressing a DNA-cleaving enzyme in plants. We evaluated genome editing by targeting luminescent enzyme genes that were inactivated by the target sequence using restriction enzyme I-SceI as a DNA-cleaving enzyme. The results suggest the possibility of genome editing of host DNA by inoculation with viral vectors.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

ゲノム編集植物を社会実装するためには、現在主流の遺伝子組換えを介した手法では交配等により外来遺伝子を除去する必要があるため、育種に時間を要する林木においては遺伝子組換えを介さない手法が求められている。一過的な発現が可能なウイルスベクターの利用により外来遺伝子を含まないゲノム編集林木が迅速に作出できる可能性がある。また、一過的な遺伝子発現が可能なことから、遺伝子組換えが困難な林木の遺伝子の機能解析にも活用でき、分子遺伝学的進展も期待できる。

Report

(4 results)
  • 2021 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2020 Research-status Report
  • 2019 Research-status Report
  • Research Products

    (8 results)

All 2022 2021 2020 2019

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 3 results) Presentation (4 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Novel Functional Analysis for Pathogenic Proteins of Bursaphelenchus xylophilus in Pine Seed Embryos Using a Virus Vector.2022

    • Author(s)
      Haru Kirino, Ken-ichi Konagaya, Ryoji Shinya
    • Journal Title

      Frontiers in Plant Science

      Volume: 13 Pages: 872076-872076

    • DOI

      10.3389/fpls.2022.872076

    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] A protocol for <i>Agrobacterium</i>-mediated transformation of Japanese cedar, Sugi (<i>Cryptomeria japonica</i> D. Don) using embryogenic tissue explants2020

    • Author(s)
      Konagaya Ken-ichi、Nanasato Yoshihiko、Taniguchi Toru
    • Journal Title

      Plant Biotechnology

      Volume: 37 Issue: 2 Pages: 147-156

    • DOI

      10.5511/plantbiotechnology.20.0131a

    • NAID

      130007864087

    • ISSN
      1342-4580, 1347-6114
    • Year and Date
      2020-06-25
    • Related Report
      2020 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Somatic embryogenesis in artificially pollinated seed families of 2nd generation plus trees and cryopreservation of embryogenic tissue in <i>Cryptomeria japonica</i> D. Don (Sugi)2020

    • Author(s)
      Taniguchi Toru、Konagaya Ken-ichi、Nanasato Yoshihiko
    • Journal Title

      Plant Biotechnology

      Volume: 37 Issue: 2 Pages: 239-245

    • DOI

      10.5511/plantbiotechnology.20.0220a

    • NAID

      130007864079

    • ISSN
      1342-4580, 1347-6114
    • Year and Date
      2020-06-25
    • Related Report
      2020 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] Molecular mimicry: the parasitic strategy of the pine wood nematode Bursaphelenchus xylophilus.2021

    • Author(s)
      KIRINO Haru, YOSHIMOTO Kohki, KONAGAYA Ken-ichi, SHINYA Ryoji
    • Organizer
      International Symposium IUFRO on Pine Wilt Disease
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 塩基編集技術による除草剤耐性スギ(Cryptomeria japonica D. Don)細胞系統の作出2021

    • Author(s)
      七里吉彦、小長谷賢一、上野真義、遠藤真咲、谷口亨
    • Organizer
      第38回日本植物バイオテクノロジー学会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] ウイルスベクターを用いたスギにおける花粉形成関連遺伝子のノックダウン解析2019

    • Author(s)
      小長谷賢一、吉川信幸、谷口亨
    • Organizer
      第36回日本植物細胞分子生物学会(京都)大会
    • Related Report
      2019 Research-status Report
  • [Presentation] マツノザイセンチュウ分泌タンパク質に関するクロマツ胚を用いた機能解析2019

    • Author(s)
      桐野巴瑠、吉本光希、小長谷 賢一、新屋良治
    • Organizer
      2019年度日本線虫学会第27回大会
    • Related Report
      2019 Research-status Report
  • [Book] ひとりではじめる植物バイオテクノロジー入門 組織培養からゲノム編集まで2022

    • Author(s)
      小長谷賢一、七里吉彦(編:田部井豊、七里吉彦、三柴啓一郎、安本周平)
    • Total Pages
      413
    • Publisher
      国際文献社
    • ISBN
      9784910603032
    • Related Report
      2021 Annual Research Report

URL: 

Published: 2019-04-18   Modified: 2023-01-30  

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