| Project/Area Number |
19K07052
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 47030:Pharmaceutical hygiene and biochemistry-related
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| Research Institution | Tokyo Women's Medical University |
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Principal Investigator |
藤木 恒太 東京女子医科大学, 医学部, 助教 (80632504)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | ストレス応答 / 尿細管細胞死 / 鉄依存性細胞死 / 尿細管細胞 |
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| Outline of Research at the Start |
尿細管細胞死は、外的ストレス依存的に腎障害が生じる場合に観察される現象であり、その理解は、腎障害の治療や予防にも繋がる重要な課題である。近年、尿細管細胞では特定の条件下で鉄依存性脂質酸化依存型細胞死フェロトーシスが惹起されうることが報告されたが、未だにその詳細は捉えきれていない。そこで、HK-2ヒト近位尿細管上皮細胞を用いて尿細管細胞におけるフェロトーシス誘導メカニズムの解析を目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
尿細管細胞死は、外的ストレス依存的に腎障害が生じる多くの場合に観察される現象であるため、その機序の解明は、腎障害の治療や予防にも繋がる重要な課題である。また、尿細管細胞では、近年、虚血性再灌流傷害によって腎障害が起きる場合、尿細管細胞では鉄依存性脂質酸化依存型細胞死フェロトーシスが惹起されうることが報告されたが、未だにその詳細を捉えきれていない。そこで、申請者は尿細管細胞におけるフェロトーシス誘導メカニズムを明らかにすべく、HK-2ヒト近位尿細管上皮細胞を用いてフェロトーシス誘導メカニズムの解析を行うことにした。
これまでに解析を行った結果、caspase阻害剤X処理時にフェロトーシス様HK-2細胞死が抑制される②caspase阻害剤X処理時に、細胞内の鉄イオン調整因子FTH1の発現量が増加する③FTH1をウエスタンブロット法を用いて検出すると、caspase阻害剤X処理時に、通常検出されるバンドに加え、低分子量側に新規のバンド（L-FTH1）が検出される④L-FTH1はferritinophagy必須因子NCOA4のsiRNA処理により、減少する⑤caspase阻害剤Xのフェロトーシス様細胞死抑制効果は細胞株依存性、血清依存性があることがわかった。また、⑥フェロトーシス様のHK-2細胞死を抑制する食品成分Yを同定し、食品成分Yは転写因子NRF2経路を介して抑制効果を発揮すること⑦食品成分Yは、脂質酸化が関与する細胞死・好中球ネトーシスを抑制することを明らかとした。一方、⑧食品成分Yは、ALK4/5経路、Notch1経路、Akt経路を介してカドミウム刺激依存的HK-2細胞死を抑制する⑨食品成分Yは銀ナノ粒子、高浸透圧、シスプラチン刺激依存的な尿細管細胞死は抑制しないことがわかった。このことから、食品成分Yは脂質酸化に起因する細胞死とカドミウム刺激による細胞死とで異なる機序を介して細胞死抑制効果を発揮する可能性が示された。今年度は食品成分Yに関する解析結果の論文化作業を行った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
Caspase阻害剤Xの作用が細胞株や血清の有無に依存することから、実験の進行が難しくなった。一方で、フェロトーシス様HK-2細胞死を抑制する食品成分Yを同定したので、食品成分Yの解析を進行させることで、フェロトーシス様HK-2細胞死の分子基盤に迫ることを目指している。現在は、その解析結果を2報の論文にまとめる作業を行っており、1報はrevisionの過程である。
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| Strategy for Future Research Activity |
食品成分Yの解析結果を2報の論文にまとめることを目指す。
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