生体物質由来治療薬としての母乳及び羊水エクソソームの有用性

• Project/Area Number: 19K08263
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 52050:Embryonic medicine and pediatrics-related
• Research Institution: Fujita Health University
• Principal Investigator: 吉村 文 藤田医科大学, 病態モデル先端医学研究センター, 准教授 (90466483)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2025-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000); Fiscal Year 2022: ¥520,000 (Direct Cost: ¥400,000、Indirect Cost: ¥120,000); Fiscal Year 2021: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000); Fiscal Year 2020: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2019: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
• Keywords: エクソソーム / トランスジェニックラット / 羊水 / ラット / 母乳 / 神経

Outline of Research at the Start

細胞外小胞顆粒であるエクソソームは、体液中に分泌されることで遠く離れた組織や細胞にまで情報を伝達することができる。妊娠や出産によって一時的に作成される母乳や羊水はいずれも胎児と新生児の健全な発育に不可欠であり、その中に存在するエクソソームが子の発育に重要な役割を担っている可能性は高い。外部環境に対して安定した構造を保つエクソソームは治療薬としての活用が期待されている。申請者は、母乳および羊水中に分泌されるエクソソームの成分解析及び受け手となる細胞との関係性を検証することで、子の発育に関わるエクソソームの存在、生体物質由来治療薬としてのエクソソームの有用性につなげることを本研究の目的とする。

Outline of Annual Research Achievements

PKH67で後から標識したエクソソームとCD63-GFPで標識されたエクソソームを分泌するトランスジェニックラット由来のエクソソームについて、培養細胞への取り込み実験を実施した。その結果、細胞内の後期エンドソームマーカーLamp1との局在は両者で異なっていた。PKH67やPKH26はエクソソーム以外の微粒子にも結合することは以前より知られている。そのため、夾雑物の多い体液から分離したエクソソームをトレースするうえで、内在性標識エクソソームを用いることは非常に重要である。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

所属施設の管理業務や遅れていた他の研究の論文リバイスを先行したため。

Strategy for Future Research Activity

より自然な状態に近い胎児でのエクソソームの取り込みについて試みる。トランスジェニックラットのメスを野生型のオスと交配し、蛍光を示さない胎児組織におけるCD63-GFPを検出する。検出感度が低い場合、トランスジェニックラットの羊水から分離したエクソソームを羊水中に注入し、翌日胎児を摘出して解析を行う（In utero）。

Research Products

• [Journal Article] Transgenic rats for tracking body fluid/tissue-derived extracellular vesicles (2020)
  • Author(s): Yoshimura Aya、Tamai Yoshitaka、Ochiya Takahiro
  • Journal Title: Methods Enzymol. Volume: 645 Pages: 231-242
  • DOI: 10.1016/bs.mie.2020.09.006
  • ISBN: 9780128206621
• [Presentation] 腎性尿崩症様病態を示す新規トランスジェニックラット (2019)
  • Author(s): 吉村 文、熊本 海生航、釘田 雅則、長尾 静子
  • Organizer: 第62回日本腎臓学会学術総会
• [Presentation] Sox2/CD63-GFPトランスジェニックラットの腎病態について (2019)
  • Author(s): 吉村 文、熊本 海生航、釘田 雅則、長尾 静子
  • Organizer: 第90回東海実験動物研究会
• [Presentation] エクソソームマーカーCD63-GFPを腎臓で発現するトランスジェニックラット (2019)
  • Author(s): 吉村 文、熊本 海生航、釘田 雅則、大平 圭悟、落谷 孝広、長尾 静子
  • Organizer: 第6回日本細胞外小胞学会