寛容型樹状細胞を用いた自己免疫疾患治療の実用化に向けた研究

• Project/Area Number: 19K08881
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 54020:Connective tissue disease and allergy-related
• Research Institution: Ehime University
• Principal Investigator: 長谷川 均 愛媛大学, 医学系研究科, 教授 (40164826)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2020-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2019)
• Budget Amount: ¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000); Fiscal Year 2021: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000); Fiscal Year 2020: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000); Fiscal Year 2019: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,000,000、Indirect Cost: ¥600,000)
• Keywords: 寛容型樹状細胞 / 自己免疫疾患

Outline of Research at the Start

欧米を中心にI型糖尿病，関節リウマチ, クローン病、多発性硬化症に対してtDCsの臨床試験が進められている。これらの試験において、いずれも安全性は確認されており、効果もあることが報告されている。実用化に関して現在課題になっているのは、１）最適なtDCsの作成法、２）有効な投与量、投与方法と３）的確な抗原である。我々は１）と３）について研究を進める。また我々は、DCsをターゲットとしたリポソームワクチンに注目している。PKCI-tDCsの誘導に関与するmiRNAを同定し、このmiRNAと抗原を用いたリポソームワクチンを作成し、抗原特異的免疫抑制療法の実用化を目指す。

Outline of Annual Research Achievements

自己免疫疾患やアレルギー疾患の分野では、自己反応性T細胞を標的とし免疫寛容に導く樹状細胞（tDCs）を用いた抗原特異的な治療が注目されている。我々は、Cキナーゼ阻害剤(PKCI)によってヒトtDCsが誘導されることを見出した。さらに、PKCI-tDCsの誘導に関与するmiRNAの同定をmiRNA arrayにて比較解析を行い、PKCI-tDCsに発現の高いlet-7c, miR-15a, miR-130a, miR-192など12種類のmiRNAをスクリーニングしている。それぞれのmiRNA mimicをリポフェクタミンを用いてDCsに導入し、抑制性サイトカイン産生、共役分子やCCR7発現を比較し、PKCI-tDCsと同様の表現型を誘導するmiRNAを検討しているが、現時点では、導入効率が悪く、目的とするmiRNAの同定はできていない。
また、シェーグレン症候群（SS）を対象として、自己抗原のHLA-DRB1拘束性のT細胞エピトープの解析を行い、抗原特異的免疫抑制療法の確立を目指している。すべてのSS患者から、PKCI-tDCsの誘導は可能であった。また、SS患者のHLA-DRB1を解析し、比較的多かったHLA-DRB1*0401, 0803, 0901, 1501などのalleleを持つ患者を中心に解析を行い、IEDB Analysis Resource の分析から、上記のHLA-DRB1に拘束されるM3ムスカリンアセチルコリン受容体（M3R）のT細胞エピトープ・アンカーモチーフのペプチドを推定し、上記の患者末梢血単核球にペプチドを添加し、IFN-gamma産生T細胞増加数の比較にて検討している。現時点では、それぞれの症例数が少なく、HLA-DRB1に拘束されるM3Rのペプチドは見出されていない。