| Project/Area Number |
19K09222
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 55020:Digestive surgery-related
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| Research Institution | Fukushima Medical University |
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Principal Investigator |
丸橋 繁 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (20362725)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
武藤 亮 福島県立医科大学, 医学部, 助手 (10791478)
鈴志野 聖子 福島県立医科大学, 医学部, 助手 (20816376)
石亀 輝英 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (50583358)
清水 裕史 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (70553709)
佐藤 直哉 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (90622332)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
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| Keywords | 肝スフェロイド / 複合型肝細胞シート / 3D培養 / ３D培養 / 肝組織 / 肝細胞スフェロイド / 肝細胞分離 / 肝細胞 / シート技術 / 肝再生 / スフェロイド / 細胞シート / リコンビナントペプチド |
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| Outline of Research at the Start |
正常肝組織からCTOS作成法を応用してLTOSsを分離し、①間葉系幹細胞シートあるいは②多孔性RCPとの複合共培養によって複合型LTOSsシートを作成する。得られたLTOSsシートにおける細胞間接着、シグナル伝達経路を解析し、肝組織再生における制御メカニズムの解明を行う。さらに、確立した複合型LTOSsシートを積層する技術を確立し、同様に形態、増殖再生能および機能評価を行い、最適化した複合型LTOSsシートを作成する。
作成した複合型LTOSsシートを免疫不全マウスに移植し生着、形態、増殖再生能および機能評価を行う。さらに、肝不全マウスモデルを作成し、LTOSsシート移植法を確立する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、細胞間接着を有した肝細胞スフェロイド；Liver tissue-originate spheroids (LTOSs)を用いた複合型肝細胞シート(LTOSsシート)の開発を行なっている。
2021年度から、当講座で行っている肝細胞分離の手法を応用してLTOSsを作製している。しかし、培養1日目よりViabilityの低下を認め、3日以上の培養は困難であった。原因として、回収したLTOSsに接着している死細胞の影響や、スフェロイドの生存に必要なサイトカインの不足、培養皿の種類などが考えられた。
分離時のフィルターをスフェロイドキャッチに変更したところ、分離直後、および培養1日目のViabilityは向上した。
現在は、培養皿の種類の比較、3D培養下でViabilityを維持するために必要なサイトカインである、HGF+OSM、HGF+TNF-αを添加して比較することで、より最適な培養条件を確立する実験を行っている。
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