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Reconstruction and analysis of E. coli homologous recombination by using bottom-up genetics

Research Project

Project/Area Number 19K16109
Research Category

Grant-in-Aid for Early-Career Scientists

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Basic Section 43060:System genome science-related
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

Aoki Wataru  京都大学, 農学研究科, 助教 (10722184)

Project Period (FY) 2019-04-01 – 2021-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2020)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2019: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
Keywords合成生物学 / Bottom-up genetics / 人工細胞 / ボトムアップジェネティクス
Outline of Research at the Start

本研究の目的は、任意の生物学的システムの再構成をハイスループットに達成する新規方法論「ボトムアップジェネティクス」を提唱し、その実証として「大腸菌ゲノム相同組み換え」の再構成とそのメカニズム解析に挑戦することである。生命科学におけるひとつのボトルネックとなっているin vitro再構成をハイスループット化できれば、生物学的システムの理解を加速させることができるため、そのインパクトは大きい。

Outline of Final Research Achievements

The purpose of this study is to propose a novel methodology, "bottom-up genetics," to achieve high-throughput reconstruction of arbitrary biological systems. To demonstrate the feasibility of our concept, we tried to attempt reconstruction of homologous recombination and endogenous transcriptional machineries of E. coli. By integrating the fundamental technologies of bottom-up genetics established so far, we constructed an artificial cell library containing randomly distributed genes from the whole gene library of E. coli, and attempted to reconstitute the E. coli transcriptional machinery and homologous recombination, and some of the artificial cells fluoresced, suggesting that the target biological systems may have been reconstituted. We are currently conducting analysis to identify the necessary and sufficient factors for the systems.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

効率の大幅な向上はイノベーションに直結する。本研究では、構成的理解という現代生命科学のボトルネックのひとつの解消を目指しており、それが実現されれば、革新的バイオテクノロジーの連続的創出にも繋がると期待される。例えば、制限酵素・GFP・PCR・光遺伝学・ゲノム編集などのバイオテクノロジーは、必要十分条件が決定されたが故に高い改良性と多様なシーンへの移植可能性を持ち、普遍的ツールと成り得た。本研究で開発するボトムアップジェネティクスにより、多様な生物学的システムの再構成を迅速に達成できるようになれば、それらのバイオテクノロジーへの応用が加速すると期待される。

Report

(3 results)
  • 2020 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2019 Research-status Report
  • Research Products

    (6 results)

All 2020 2019

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (5 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results)

  • [Journal Article] Selected reaction monitoring for the quantification of Escherichia coli ribosomal proteins2020

    • Author(s)
      Kosaka Yuishin、Aoki Wataru、Mori Megumi、Aburaya Shunsuke、Ohtani Yuta、Minakuchi Hiroyoshi、Ueda Mitsuyoshi
    • Journal Title

      PLOS ONE

      Volume: 15 Issue: 12 Pages: e0236850-e0236850

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0236850

    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] リボソームタンパク質の包括的な解析のためのselected reaction monitoring2020

    • Author(s)
      小坂唯心, 森めぐみ, 青木航, 植田充美
    • Organizer
      第43回 日本分子生物学会
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
  • [Presentation] リボソーム生合成プロセス解析のための Selected reaction monitoring2020

    • Author(s)
      小坂唯心, 森めぐみ, 青木航, 植田充美
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
  • [Presentation] 質量分析で生物間相互作用を理解する2020

    • Author(s)
      青木 航, 植田 充美
    • Organizer
      日本農芸化学会2020年度大会
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
  • [Presentation] Selected Reaction Monitoring Method for The Quantification of Escherichia coli Ribosomal Proteins2020

    • Author(s)
      Yuishin Kosaka, Megumi Mori, Mitsuyoshi Ueda, Wataru Aoki
    • Organizer
      ASBMB2021
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Reconstruction of biological subsystems using bottom-up genetics2019

    • Author(s)
      Wataru AOKI, Keisuke MOTONE, Mitsuyoshi UEDA
    • Organizer
      ASBMB 2019
    • Related Report
      2019 Research-status Report
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2019-04-18   Modified: 2022-01-27  

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