代謝関連アミノ酸の多次元キラルHPLC法構築と精神・神経疾患の早期診断法開発
Project/Area Number |
19K16343
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Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Review Section |
Basic Section 47020:Pharmaceutical analytical chemistry and physicochemistry-related
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Research Institution | Fukuoka University |
Principal Investigator |
古賀 鈴依子 福岡大学, 薬学部, 助教 (20804545)
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Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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Keywords | キラルアミノ酸 / 多次元HPLC分析 / 代謝関連アミノ酸 / 光学分割 / 分析化学 / 多次元HPLC |
Outline of Research at the Start |
精神・神経疾患は早期治療により大幅な症状改善が見込まれる一方、バイオマーカーの欠如により早期診断は極めて困難とされている。近年、精神・神経疾患へのD-アミノ酸酸化酵素(DAO)の関与が報告され、DAO活性評価による客観的診断法の開発が期待されている。特に、食事や生活環境など外的要因による含量変化が少ない非タンパク質構成代謝関連アミノ酸は鋭敏な活性評価指標として利用できる可能性が高い。 本研究では、非タンパク質構成代謝関連アミノ酸の高選択的キラル分析を可能とする多次元HPLC分析法を開発し、疾患モデル動物及びヒト臨床検体を用いた尿中・血中含量解析により、精神・神経疾患の新規診断指標の探索を行う。
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Outline of Annual Research Achievements |
生体内におけるDAOの活性評価による精神・神経疾患の早期かつ客観的な診断指標を探索するため、2022年度は更なる分析対象アミノ酸の拡充を行った。 昨年度までに分析法の構築および健常人の尿試料分析への適用・含量解析を達成した尿素回路関連アミノ酸であるシトルリンおよびオルニチン、リジン代謝物であるピペコリン酸および2-アミノアジピン酸に加え、新たにチロシン異性体であるo-チロシン、m-チロシンおよびp-チロシン、アミノ酪酸構造異性体であるα-アミノ酪酸およびβ-アミノ酪酸を分析対象として選定した。 新たに選定したこれらのアミノ酸について、逆相分配、陰イオン交換および光学分割を組み合わせた三次元HPLC分析システムを構築し、尿試料分析へ適用した。その結果、夾雑成分の影響を受けることなく分析対象キラルアミノ酸の検出・定量が可能であり、健常人の尿試料中にp-チロシン、α-アミノ酪酸およびβ-アミノ酪酸鏡像異性体が存在することを明らかにした。p-チロシンおよびα-アミノ酪酸の%D値((D/(D+L)x100)がそれぞれ約0.2%、約0.02%であったのに対し、β-アミノ酪酸の%D値は約60%と非常に高い値を示した。 また、血漿試料分析を行った結果リジン、ピペコリン酸、α-アミノ酪酸およびβ-アミノ酪酸のD体が検出され、尿中において高い%D値を示したピペコリン酸およびβ-アミノ酪酸については血漿中においてもそれぞれ約20%、約50%と高い値を示すことが明らかとなった。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
2022年度は分析対象アミノ酸の拡充と並行して、各種疾患モデルマウスの尿・血漿試料を収集し分析対象キラルアミノ酸の含量変化解析を行う予定であった。 新たにチロシンおよびアミノ酪酸を対象とする三次元HPLC分析システムの構築を達成した一方で、各種モデルマウス試料を用いた含量変化解析は未だ実施できていない。以上より、本研究課題はやや遅れていると判断した。
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Strategy for Future Research Activity |
2023年度はこれまでに構築した三次元HPLC分析システムを用いて、各種モデルマウス試料を用いたキラルアミノ酸の含量変化解析を行う。また、引き続き健常人の尿および血漿試料を用いて概日リズムや食事などの外的要因による含量変化の有無について調査する。
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Report
(4 results)
Research Products
(14 results)