| Project/Area Number |
19K16733
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 50010:Tumor biology-related
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| Research Institution | Shizuoka Cancer Center Research Institute |
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Principal Investigator |
河田 卓也 静岡県立静岡がんセンター(研究所), その他部局等, 研究員 (30792494)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2021: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
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| Keywords | がん転移 / 融合遺伝子 / がん遺伝子 |
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| Outline of Research at the Start |
がん転移の分子メカニズムを解明のため、我々はマウス乳がんから転移モデルを作製し、発現解析により転移を促進する候補の一つとしてSTAC2を同定した。STAC2は最近、乳がんにおけるドライバー融合遺伝子ACACA-STAC2として同定されたが、その機能や発現分布は未知である。本研究では、マウスモデルを用いて、STAC2のがん転移促進作用を実験的に検証し、ヒト乳がん細胞株を用いて、分子機能や発現分布、がんにおける役割を明らかにする。また、乳がん症例を用いて、STAC2の発現と予後に関わる臨床病理学的因子との相関を解析し、さらに、ACACA-STAC2 融合遺伝子との関連を明らかにする。
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々はがん転移の分子メカニズムを解明するために、マウス乳がんから転移モデルを作製し、転移に関わる分子の同定を試みた。発現解析により転移を促進する候補として同定された分子の一つにSTAC2がある。STAC2は最近、乳がんにおけるドライバー融合遺伝子ACACA-STAC2として同定されたが、その機能や発現分布は未知である。本研究では、新規転移関連分子STAC2の分子機能を実験的に明らかにし、転移とのかかわりや乳がん症例における発現の意義を臨床病理学的に解明することを目的とした。このうち当年度は、細胞株を用いた解析と静岡がんセンターで進行中の“project HOPE”データを用いた解析行った。
まず、昨年度より継続しているヒトSTAC2低発現細胞株であるMCF7に対して発現ベクターを用い安定発現細胞の作製を試みたが、樹立できなかった。次いで、我々の作製した転移性の異なるマウス乳がん発現株のうち、STAC2低発現株の66LMに対するSTAC2導入株の作製を試みたが、当年度は海外からの試薬供給も不安定で実験が停滞したこともあり、現在作成中である。 また、project HOPEの解析データを用いて、ヒト乳がんとSTAC2の関連を検討した。背景の正常乳腺と比較して癌でのSTAC2 mRNAの発現を高、等、低の3グループに分けて解析を行った。臨床病理学的な因子として年齢、サブタイプ、組織型、リンパ節転移に関して解析を行ったが、いずれも明らかな差異を認めなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
マウスおよびヒト細胞株における実験は、特に遺伝子導入に難渋しており、遅れている。原因に関してはプライマー設計に問題があったものと考えたが、詳細は現在検討中である。
また、本研究以外のエフォートの増大も研究の停滞の一因となっている。
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| Strategy for Future Research Activity |
培養細胞を用いた実験では、マウス乳がん細胞を用いたin vitro実験を継続して行う。マウス低転移性細胞である66LMおよび66Lu1に発現ベクターを導入した一過性発現実験や、マウス高転移性細胞である66HMおよび66Lu10 にsiRNAを導入したノックダウン実験を行う。がん細胞のSTAC2分子の発現を変動させ、細胞の増殖や生存、浸潤、運動、アポトーシス抵抗性、anoikis 抵抗性、細胞接着などがんの悪性形質に関わる性質を解析する予定である。
ヒト乳がん症例では、静岡がんセンターで進行中の“project HOPE”(がん症例のゲノムおよび遺伝子発現解析）のデータを用い、STAC2遺伝子を高発現する乳がんを抽出し、その病理学的特徴や患者情報をさらに収集する予定である。また、免疫組織化学法を用いたmRNA発現とタンパク発現との相関も解析を検討する。
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