膵臓がん細胞株Panc-1における IL-6による放射線抵抗性獲得機構の解明
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19K17195
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 52040:Radiological sciences-related
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
玉利 勇樹 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20794944)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2021: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
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| Keywords | インターロイキン6 / 放射線抵抗性 / mTOR / STAT3 / インターロイキン６ / ｍTOR / IL-6 / ミトコンドリア / 活性酸素種 |
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| Outline of Research at the Start |
放射線治療はがん治療の手段として有効であるが、がんの放射線抵抗性獲得が一つの大き
な壁となっている。がん細胞の放射線抵抗性獲得に関わる要因の一つと考えられるのが、インターロイキン6（IL-6）である。本研究ではIL-6による活性酸素種抑制を介したがんの放射線抵抗性獲得のメカニズムを明確にし、生体内でのがんに対するIL-6の影響を明確にすることを目的とする。細胞株として膵臓がん由来細胞株を使用し、鶏卵腫瘍移植モデルを作成し、IL-6がミトコンドリアを介した活性酸素種産生を抑制するメカニズムを調査する。本研究により放射線抵抗性獲得のメカニズムが解明されることで放射線治療の治療成績の向上が期待できる。
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々の過去の研究によりインターロイキン6（IL-6）による放射線抵抗性獲得はγ線照射後のミトコンドリア由来酸化ストレスを抑制することにより引き起こされるということが明らかにされた。本研究はIL-6による酸化ストレス抑制を介した放射線抵抗性獲得の詳細なメカニズムを調査することを目的とする。細胞はヒト膵臓がん由来細胞株Panc-1及びMIAPaCa-2を使用した。４GyのX線照射または解析の24時間前にrecombinent IL-6（rIL-6）を投与した。細胞株によるIL-6の産生量を調べるためにELISA法を用いた。また、IL-6による放射線抵抗性獲得について調査するためコロニー形成法を行った。さらに、ウエスタンブロット法により、IL-6下流のタンパク質発現量を確認した。その際にラパマイシンを使用しｍTORのIL-6シグナル経路への関与を調査した。ミトコンドリア内活性酸素量及びミトコンドリア膜電位についてはそれぞれ蛍光プローブであるMitosox RedおよびJC-1を使用して計測した。ELISAの結果、Panc-1ではIL-6の産生がかなり少なかった。しかし、rIL-6を投与した場合にX線を照射した後の生存率は有意に増加した。rIL-6を投与した際にSTAT3の強い活性化が示され、これはｍTOR阻害剤であるラパマイシン投与により抑制された。ミトコンドリア内活性酸素量はX線照射により増加したが、rIL-6の投与により抑制された。 しかし、ラパマイシンの投与はIL-6の効果を中和した。 一方、X線照射によるミトコンドリア膜電位の低下はrIL-6により抑制された。 ミトコンドリア膜電位については、mTORを抑制することでIL-6の効果を打ち消した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
コロナウイルス感染症再拡大に伴い、感染対策としてテレワークを行ったことや実験機器の故障による実験の遅延が理由として挙げられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在、論文投稿中であり追加実験として、53BP1フォーカスの測定やMIAPaCa-2の活性酸素量測定を行う。
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Report
(5 results)
Research Products
(2 results)
