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細菌叢遺伝子情報を利用した新規鑑定解析技術の開発

Research Project

Project/Area Number 19K20408
Research Category

Grant-in-Aid for Early-Career Scientists

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Basic Section 62010:Life, health and medical informatics-related
Research InstitutionNational Research Institute of Police Science

Principal Investigator

横田 亮  科学警察研究所, 法科学第二部, 主任研究官 (80733154)

Project Period (FY) 2019-04-01 – 2023-03-31
Project Status Discontinued (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥3,640,000 (Direct Cost: ¥2,800,000、Indirect Cost: ¥840,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Keywords異同識別 / 微生物叢 / シークエンス解析 / 多様性解析 / 機械学習 / 16S rRNA遺伝子 / メタゲノム解析 / 法科学
Outline of Research at the Start

次世代シークエンサーによる遺伝子解析技術の急速な進歩により、世界各地で膨大な細菌叢の遺伝子配列情報が蓄積され続けている。法科学の分野において、細菌叢遺伝子情報を用いた鑑定手法はヒトDNA型鑑定に次ぐ新たなDNA情報を用いた鑑定技術として期待されており、土砂等の鑑定資料の異同識別、或いは、犯罪で利用された道具と犯行現場との関連付けに活用できると目される。
本研究では、既存の論文で公開されている世界各地の細菌叢16S rRNAデータセットを有効活用し、物証に付着した微細な資料中に含まれる細菌叢の遺伝子情報をもとに犯行現場の特定や被疑者関与の証明を目標とした新たな統計的解析手法の開発を目指す。

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、T細胞受容体(TCR)のレパトア解析の知見を微生物叢の16S rRNA配列の解析に応用した採取試料の異同識別に関する新たな手法の開発を当初の計画としていた。しかし、既存研究の公開データや共同研究者より提供された実験データを解析したところ、温度または湿度等の環境要因、さらには経時的変化等の影響による菌叢構成の不確実性が顕著に観察され、16S rRNA配列情報から採取資料(個人)の異同識別を実用化レベルの推定精度で実現することが現状では難しいと判断された。
そこで、当初の計画を変更し、所属研究所の共同研究者と共にウイルス叢情報の活用について新たに検討し、CRISPR領域のスペーサー配列情報から個人の異同識別を行う手法の研究に取り組み、その研究成果を研究二年度目に国際論文誌mSystemsにおいて発表した。さらに、DNA抽出プロトコルが微生物叢の構成分析結果に影響を与える可能性が示唆されたことから、共同研究者と共にDNA抽出プロトコルの最適化について検討し、2つの異なるDNA抽出プロトコルにおいて16S rRNA遺伝子コピー数とCRISPRの多様性に関して各プロトコル間で有意な差がないこと、また、線型サポートベクターマシンを用いた個人の予測モデルの精度においても差がないことを確認し、その研究成果を研究三年度目に国際論文誌Forensic Science International: Reportsにおいて発表した。
また、本研究では、新たに解析手法を開発するにあたり、急速に発展する配列データの解析技術を広く調査した。その成果の一つとして、TCRレパトア解析手法に関する総説論文を研究最終年度(新型コロナウイルス感染症の影響により研究期間を1年延長)にFrontiers in Immunology誌において発表した。

Report

(4 results)
  • 2022 Annual Research Report
  • 2021 Research-status Report
  • 2020 Research-status Report
  • 2019 Research-status Report
  • Research Products

    (6 results)

All 2022 2021 2020

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 3 results) Presentation (2 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Machine Learning Approaches to TCR Repertoire Analysis2022

    • Author(s)
      Katayama Yotaro、Yokota Ryo、Akiyama Taishin、Kobayashi Tetsuya J.
    • Journal Title

      Frontiers in Immunology

      Volume: 13 Pages: 858057-858057

    • DOI

      10.3389/fimmu.2022.858057

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Optimization of microbial DNA extraction from human skin samples for CRISPR typing2022

    • Author(s)
      Toyomane Kochi、Yokota Ryo、Watanabe Ken、Akutsu Tomoko、Asahi Ai、Kubota Satoshi
    • Journal Title

      Forensic Science International: Reports

      Volume: 5 Pages: 100259-100259

    • DOI

      10.1016/j.fsir.2022.100259

    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Evaluation of CRISPR Diversity in the Human Skin Microbiome for Personal Identification2021

    • Author(s)
      Toyomane Kochi、Yokota Ryo、Watanabe Ken、Akutsu Tomoko、Asahi Ai、Kubota Satoshi
    • Journal Title

      mSystems

      Volume: 6 Issue: 1

    • DOI

      10.1128/msystems.01255-20

    • Related Report
      2020 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] CRISPRの多様性解析による個人識別法の開発2021

    • Author(s)
      豊間根耕地、横田亮、渡邊賢、阿久津智子、旭愛、窪田聡
    • Organizer
      第15回日本ゲノム微生物学会
    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Presentation] 皮膚常在細菌叢におけるCRISPRの多様性2020

    • Author(s)
      豊間根耕地、横田亮、渡邊賢、阿久津智子
    • Organizer
      第14回日本ゲノム微生物学会
    • Related Report
      2019 Research-status Report
  • [Book] 機械学習を生命科学に使う! (第2章 5. を分担執筆)2020

    • Author(s)
      小林 徹也、杉村 薫、舟橋 啓
    • Total Pages
      240
    • Publisher
      羊土社
    • ISBN
      9784758103916
    • Related Report
      2020 Research-status Report

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Published: 2019-04-18   Modified: 2023-12-25  

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