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Studies on development of control strategy for Asian zoonotic schistosomiasis with microsatellite marker system

Research Project

Project/Area Number 19KK0173
Research Category

Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Medium-sized Section 42:Veterinary medical science, animal science, and related fields
Research InstitutionObihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine

Principal Investigator

河津 信一郎  帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (60312295)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 尾針 由真  北海道大学, 獣医学研究院, 特別研究員(PD) (00847056)
桐木 雅史  獨協医科大学, 医学部, 講師 (50265302)
Project Period (FY) 2019-10-07 – 2023-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2021)
Budget Amount *help
¥18,330,000 (Direct Cost: ¥14,100,000、Indirect Cost: ¥4,230,000)
Fiscal Year 2022: ¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2021: ¥5,460,000 (Direct Cost: ¥4,200,000、Indirect Cost: ¥1,260,000)
Fiscal Year 2020: ¥5,590,000 (Direct Cost: ¥4,300,000、Indirect Cost: ¥1,290,000)
Fiscal Year 2019: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000)
Keywords顧みられない熱帯病 / 人獣共通感染症 / 日本住血吸虫症 / スイギュウ / マイクロサテライトマーカー
Outline of Research at the Start

日本住血吸虫症はアジアの農村や漁村で流行し、家畜動物から中間宿主貝を介してヒトへの感染も成立することから、保健衛生および家畜衛生と密接に関連した顧みられない人獣共通感染症となっている。日本住血吸虫症の排除(elimination)を達成するには、寄生虫のライフサイクルを俯瞰的に把握する必要がある。本研究では、島嶼国フィリピンの多様な寄生虫ライフサイクル全体を対象としたマイクロサテライト(STR)マーカーによる多座位の遺伝子型(MLG)解析解析から、各宿主を嗜好して適応した寄生虫集団の存在を証明してその遺伝的特性(マーカー型)を明らかにする。同時にマーカーと患者での病態との関係も明らかにする。

Outline of Annual Research Achievements

研究3年目(2021年度)には、単一寄生虫卵からDNAを調整するため、現行の「ミラシジウム孵化法」に改良を加えたプロトコールを確立した。また、フィリピン側共同研究者と研究推進Web会議を複数回実施して、このプロトコールの技術移転を試みるとともに、野外調査実施開始時期の見込み等について情報交換を行なった。また、今回の研究課題を他のアジア型住血吸虫症の研究へ展開する準備として、アジア大陸部のメコンデルタ地域(ラオスおよびカンボジアのメコン川流域に位置する一部地域)で流行するメコン住血吸虫症の調査研究において必要になる、血清診断法(酵素抗体法:ELISA)のプロトコールを検討した。研究分担者(獨協医科大学国際協力・支援センターの熱帯病寄生虫病室)にアーカイブされていたメコン住血吸虫成虫体のサンプルからRNAを抽出してRNAシーケンスを行った。得られた情報を基に、メコン住血吸虫のチオレドキシンペルオキシダーゼ-1の遺伝子を単離して、大腸菌で組換体タンパク質(rSmTPx-1)を作製した。rSmTPx-1のメコン住血吸虫症診断用ELISAへの応用を検証したところ、良好な感度(Kato-Katz法での虫卵検査陽性のカンボジア人患者血清28検体に対して89.3%)及び特異性(Kato-Katz法での虫卵検査陰性のカンボジア人住民血清30検体に対して93.3%)が得られた。ELISA 陽性・陰性のカットオフ値は住血吸虫症の非流行地(米国)住民の血清30検体に対して算定した。この結果を受けて、現在、メコン住血吸虫症診断用の組換え体ELISA抗原の開発を進めている。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

日本側チームの渡航はもとよりフィリピン側チームの国内移動も制限さていたため、2021年度に予定していた現地での材料採取もできず、既に準備を完了している「寄生虫卵からのDNA調整方法」を応用した分子疫学調査ができない状況にあるため。

Strategy for Future Research Activity

前年度までの予備実験の成果およびフィリピン側カウンターパートとの事前協議の内容を受けて、研究4年目(2022年度)に、日本住血吸虫症”高度”流行地を対象に調査研究をおこなう。長崎大学熱帯医学研究所寄生虫学分野濱野真二郎教授に、現地調査に研究協力者として参加していただき、アフリカでの住血吸虫症流行の疫学およびその対策との比較とそれに立脚した情報の提供を依頼する。【渡航が適わない時の計画】2022年度においても、現地への渡航が適わない時は、フィリピン側共同研究者に、日本住血吸虫症流行地での疫学情報の収集とサンプル採取を依頼して、ミラシジウムもしくはそのDNAを日本に送付してもらい、STR/MLG解析を行う運用を考える。

Report

(3 results)
  • 2021 Research-status Report
  • 2020 Research-status Report
  • 2019 Research-status Report

Research Products

(24 results)

All 2021 2020 2019 Other

All Int'l Joint Research (6 results) Journal Article (5 results) (of which Int'l Joint Research: 5 results,  Peer Reviewed: 5 results,  Open Access: 2 results) Presentation (9 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 3 results) Remarks (4 results)

  • [Int'l Joint Research] リリピン大学マニラ校/フィリピンカラバオセンター/WHO西太平洋事務局(WPRO)(フィリピン)

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  • [Int'l Joint Research] カンボジア保健省国立マラリアセンター(カンボジア)

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  • [Int'l Joint Research] ラオス熱帯医学公衆衛生研究所(ラオス)

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  • [Int'l Joint Research] フィリピン大学マニラ校公衆衛 生学部/カビテ州立大学獣医科学部/フィリピンカラバオセンター(フィリピン)

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  • [Int'l Joint Research] NIMPE, Ho Chi Minh City(ベトナム)

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  • [Int'l Joint Research] フィリピン大学マニラ校公衆衛生学部/カビテ州立大学獣医科学部/フィリピンカラバオセンター(フィリピン)

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  • [Journal Article] Field evaluation of recombinant antigen ELISA in detecting zoonotic schistosome infection among water buffaloes in endemic municipalities in the Philippines.2020

    • Author(s)
      Angeles, JMM., Goto, Y., Kirinoki, M., Villacorte, EA., Moendeg, KJ., Rivera, PT., Chigusa, Y., and Kawazu, S.
    • Journal Title

      Fronters in Veterinary Sciences

      Volume: 7 Pages: 592783-592783

    • DOI

      10.3389/fvets.2020.592783

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    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Analyses of the expression, immunohistochemical properties and serodiagnostic potential of Schistosoma japonicum peroxiredoxin-4.2020

    • Author(s)
      Dang-Trinh MA., Angeles, JMM., Moendeg, KJ., Macalanda, AMC., Nguyen, TT., Higuchi, L., Nakagun, S., Kirinoki, M., Chigusa, Y., Goto, Y., and Kawazu, S.
    • Journal Title

      Parasites & Vectors

      Volume: 13 Pages: 436-436

    • DOI

      10.1186/s13071-020-04313-w

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      2020 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Detection of canine <i>Schistosoma japonicum</i> infection using recombinant thioredoxin peroxidase-1 and tandem repeat proteins2019

    • Author(s)
      Angeles, JMM., Goto, Y., Kirinoki, M., Leonardo, LR., Moendeg, KJ., Ybanez AP., Rivera, PT., Villacorte, EA., Inoue, N., Chigusa, Y., and Kawazu, S.
    • Journal Title

      J. Vet. Med. Sci.

      Volume: 81 Issue: 10 Pages: 1413-1418

    • DOI

      10.1292/jvms.19-0126

    • NAID

      130007730600

    • ISSN
      0916-7250, 1347-7439
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    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Schistosoma japonicum cathepsin B as potential diagnostic antigen for Asian zoonotic schistosomiasis.2019

    • Author(s)
      Macalanda, AMC., Angeles, JMM., Moendeg, KJ., Dang-Trinh, MA., Higuchi, L., Kirinoki, M., Chigusa, Y., Leonardo, LR., Villacorte, EA., Rivera, PT., Goto, Y., and Kawazu, S.
    • Journal Title

      Parasitology Research

      Volume: 118 Pages: 2601-2608

    • DOI

      10.1007/s00436-019-06410-x

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      2019 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Infection rate of Schistosoma japonicum in the snail Oncomelania hupensis quadrasi in endemic villages in the Philippines: Need for snail surveillance technique.2019

    • Author(s)
      Fornillos, RJC., Fontanilla, IKC., Chigusa, Y., Kikuchi, M., Kirinoki, M., Kato-Hayashi, N., Kawazu, S., Angeles, JM., Tabios, IK., Moendeg, K., Goto, Y., Tamayo, PG., Gampoy, EF., Pates, I., Chua, JC., and Leonardo, LR.
    • Journal Title

      Tropical Biomedicine

      Volume: 36 Pages: 402-411

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      2019 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Presentation] Characterization of Schistosoma japonicum peroxiredoxin-4 and evaluation of its serodiagnostic potential as an antigen against human schistosomiasis.2021

    • Author(s)
      Dang TMA., Angeles JMA., Moendeg KJ., Macalanda AMC., Ohari Y., Wanlop A., Kirinoki M., Chigusa Y., Goto Y., and Kawazu S.
    • Organizer
      第90回日本寄生虫学会大会(ハイブリッド集会)口頭発表 2021年4月17日 奈良市
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      2021 Research-status Report
  • [Presentation] Field evaluation of recombinant antigen ELISA for the detection of Schistosoma japonicum infection among water buffaloes in endemic municipalities in the Philippines.2021

    • Author(s)
      Angeles JMA., Goto Y., Kirinoki M., Villacorte, E., Rivera, P., Chigusa, Y., and Kawazu S.
    • Organizer
      第90回日本寄生虫学会大会(ハイブリッド集会)口頭発表 2021年4月17日 奈良市
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      2021 Research-status Report
  • [Presentation] Evaluation of recombinant Schistosoma japonicum antigens for the detection of S. mekongi human infection.2021

    • Author(s)
      Wanlop A., Angeles JMA., Kirinoki M., Dang TMA., Yajima, A., and Kawazu, S.
    • Organizer
      第164回日本獣医学会学術集会(オンライン集会)口頭発表 2021年9月8日 江別市
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      2021 Research-status Report
  • [Presentation] Application of multi-epitope recombinant proteins for serodiagnosis of Asian zoonotic schistosomiasis.2020

    • Author(s)
      Dang TMA., Angeles JMA., Moendeg KJ., Macalanda AMC., Ohari Y., Wanlop A., Kirinoki M., Chigusa Y., Goto Y., and Kawazu S.
    • Organizer
      第89回日本寄生虫学会大会 ポスター発表(集会中止・誌上発表)
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      2020 Research-status Report
  • [Presentation] ラオス国チャンパサック県における血清診断によるメコン住血吸虫症の流行状況と、組換えタンパク質を用いたELISA法の検討2020

    • Author(s)
      熊谷 貴、須賀愛希、Sengdeuane K、Phonepadith K、Lavy L、Pheovaly S、Bouasy H、河津信一郎、岩永史朗、Paul TB、狩野繁之、石上盛敏
    • Organizer
      第89回日本寄生虫学会大会 ポスター発表(集会中止・誌上発表)
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      2020 Research-status Report
  • [Presentation] Japan-Philippines Academe Partnership for Schistosomiasis Control.2020

    • Author(s)
      Angeles JMA., Kirinoki M., Goto Y., and Kawazu S.
    • Organizer
      SCH Stakeholder's Forum. (Zoom meeting) シンポジウム(招待講演)
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      2020 Research-status Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Expression, immunohistochemical analysis and evaluation of serodiagnostic potential of Schistosoma japonicum Peroxiredoxin-4.2019

    • Author(s)
      Dang TMA., Angeles JMA., Moendeg KJ., Macalanda AMC., Nguyen TT., Higuchi L., Nakagun S., Kirinoki M., Chigusa Y., Goto Y., and Kawazu S.
    • Organizer
      第60回日本熱帯医学会大会 ワークショップ
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      2019 Research-status Report
  • [Presentation] 住血吸虫症対策におけるReservoir Hostの検査法の開発‐フィリピンにおける住血吸虫症対策での経験から2019

    • Author(s)
      河津信一郎
    • Organizer
      NTD’s研究集会 シンポジウム
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      2019 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] Evaluation of Schistosoma japonicum Peroxiredoxin-4 for its serodiagnostic potential.2019

    • Author(s)
      Dang TMA., Angeles JMA., Kirinoki M., Chigusa Y., Goto Y., and Kawazu S.
    • Organizer
      日米医学寄生虫疾患部会合同会議 第50回日米合同会議
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    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Remarks] 帯広畜産大学 原虫病研究センター (日本語版)

    • URL

      https://www.obihiro.ac.jp/facility/protozoa/

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  • [Remarks] 帯広畜産大学 原虫病研究センター (英語版)

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      https://www.obihiro.ac.jp/facility/protozoa/en

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      https://www.obihiro.ac.jp/facility/protozoa/

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  • [Remarks] 帯広畜産大学 原虫病研究センター(英語版)

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Published: 2019-10-10   Modified: 2022-12-28  

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