タンパク質の生産・品質管理の場としての小胞体の網状構造の意義

• Project/Area Number: 20059025
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 近藤 久雄 Kyushu University, 大学院・医学研究院, 教授 (20205561)
• Project Period (FY): 2008 – 2009
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2009)
• Budget Amount: ¥6,600,000 (Direct Cost: ¥6,600,000); Fiscal Year 2009: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000); Fiscal Year 2008: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
• Keywords: 小胞体 / 網状構造 / 試験管内再構成系

Research Abstract

小胞体はタンパク質の産生・品質管理の場であり、細胞の根幹をなす細胞内小器官である。その形態は大変に特徴的で、細胞質全体に拡がる網状構造を示す。それらの構造は下等生物から哺乳類まで幅広く見られることから、その複雑な構造はその機能であるタンパク質の産生・品質管理と密接に結びついていると考えられる。そこで本研究では、チューブ状膜が分岐して形成する特徴的な小胞体の網状構造の形成維持機構を明らかにすることを目的とした。
昨年度に試験管内で小胞体の網状構造を再構成する系を立ち上げたので、その系を洗練されたものとすると共に安定化した。さらに、その系を用いて、小胞体の網状構造形成に必要な因子群の同定を行った。網状構造形成に細胞質上清が必須であったので、その細胞質上清を生化学的に分画して試験管内再構成系で活性を検討した。ショ糖密度勾配超遠心法で分画した後、MonoQで分画した所、二つの促進因子と一つの阻害因子を含む分画を同定できた。これらの分画はさらにハイドロキシアパタイトやMonoSを用いて精製を進め、質量分析でタンパク質の同定を行った。現在は、得られた因子の解析を進めているところである。

Research Products

• [Journal Article] p97ATPaseによる細胞内小器官ゴルジ体・小胞体の形成維持機構 (2009)
  • Author(s): 近藤久雄
  • Journal Title: 可視化技術の最前線 2 Pages: 29-34
• [Journal Article] Analysis of nucleotide binding to p97 reveals the properties of a tandem AAA hexameric ATPase. (2008)
  • Author(s): Briggs LC., et. al.
  • Journal Title: J.Biol.Chem. 283 Pages: 13745-13752
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] p97 ATPaseによる細胞内小器官ゴルジ体・小胞体の形成維持機構 (2008)
  • Author(s): 金子弥生、十津川剛、近藤久雄
  • Journal Title: 生体の科学 59 Pages: 350-351
• [Journal Article] p97ATPaseによる細胞内小器官ゴルジ体・小胞・核膜の形成維持機構 (2008)
  • Author(s): 藤瀬有岐子、十津川剛、近藤久雄
  • Journal Title: 生化学 80 Pages: 632-637
  • Peer Reviewed
• [Presentation] P97ATPase-mediated biogenesis of the ER and Golgi (2009)
  • Author(s): 近藤久雄
  • Organizer: 第61回日本細胞生物学会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場
  • Year and Date: 2009-06-04
• [Presentation] p97-mediated biogenesis of the Golgi and ER (2008)
  • Author(s): 近藤久雄
  • Organizer: 第31回日本分子生物学会
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 2008-12-09