ストレス応答破綻として捉えた心血管病の分子機構と、新たな治療法開発に関する研究

• Project/Area Number: 20590889
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Circulatory organs internal medicine
• Research Institution: National Cardiovascular Center Research Institute
• Principal Investigator: 井上 信孝 循環器病センター, 研究員 (10304099)
• Project Period (FY): 2008 – 2010
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2009)
• Budget Amount: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000); Fiscal Year 2009: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2008: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
• Keywords: 酸化ストレス / 動脈硬化 / 活性酸素 / LOX-1 / NADPH oxidase

Research Abstract

酸化ストレスは、動脈硬化を基盤とした心血管病の発症に深く関与しており、心血管系における活性酸素産生源として、NAD(P)H oxidaseは一義的な働きをしている。また、LOX-1/NADPH oxidaseは、血小板にも機能的に発現しており(Thromb Res.2001;103:399-409)、血小板機能、血栓形成過程に重要な役割をしていることが考えられる。NAD(P)H oxidaseは、膜分画に存在するgp91phox、p22phox、細胞質分画に存在するp47phox、p67phox、p40phox、及びsmall G proteinであるracから構成されており、racの活性化とともに細胞質コンポーネントがリン酸化を受け、細胞膜にtranslocationし活性化される。また最近gp67phoxのホモログとしてNOXA-1が同定されたが、その機能的意義は不明である。
そこで今回、我々は、血管内皮細胞における、このNOXA-1の重要性を、sRNAiを用いた系にて検討した。培養ヒト血管内皮細胞には、NOXA-1、LOX-1とも強発現していた。NOXA-1 sRNAi処置あるいは、抗LOX-1抗体前処置により、酸化LDL添加により活性酸素の産生は抑制された。このように、NOXA-1は、血管内皮細胞に機能的に発現しており、酸化ストレス制御のターゲットになると考えられた。
我々は、HVJ liposome法によるin vivoにおけるTLR2、TLR4遺伝子導入の系を用いて、家兎動脈硬化モデルにおいて、TLRを介する系が動脈硬化を著明に促進することを明らかにした。現在、HVJ liposomeによる遺伝子導入法を用いたNOXA-1遺伝子導入系を、LOX-1遺伝子改変マウスに応用することにより、LOX-1/NADPH oxidaseを介する酸化ストレス系の相互関連を検討している。

Research Products

• [Journal Article] Determination of LOX-1-ligand activity in mouse plasma with a chicken monoclonal antibody for ApoB (2008)
  • Author(s): Sato Y, Nishimichi N, Nakano A, Takikawa K, Inoue N, Matsuda H, Sawamura T
  • Journal Title: Atherosclerosis 200 Pages: 303-309
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] LOX-1 abrogation reduces myocardial ischemia-reperfusion injury in mice (2008)
  • Author(s): Hu C, Chen J, Dandapat A, Fujita Y, Inoue N, Kawase Y, Jishage K, Suzuki H, Li D, Hermonat PL, Sawamura T, Mehta JL
  • Journal Title: J Mol Cell Cardiol 44 Pages: 76-83
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Essential role of NOXA1 in generation of reactive oxygen species induced by oxidized low-density lipoprotein in human vascular endothelial cells (2008)
  • Author(s): Honjo T, Otsui K, Shiraki R, Kawashima S, Sawamura T, Yokoyama M, Inoue N
  • Journal Title: Endothelium 15 Pages: 137-141
  • Peer Reviewed