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動原体の核内配置機構とその役割の解明

Research Project

Project/Area Number 20657002
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Genetics/Genome dynamics
Research InstitutionNagoya University

Principal Investigator

五島 剛太  Nagoya University, 高等研究院, 特任准教授 (20447840)

Project Period (FY) 2008 – 2009
Project Status Completed (Fiscal Year 2009)
Budget Amount *help
¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 2009: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2008: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000)
Keywords細胞、組織 / 核酸
Research Abstract

本研究では、RNAi、自動顕微鏡撮影、自動画像解析、コンピュータシミュレーションを組み合わせ、培養細胞で動原体が核内中央付近に配置する分子機構を明らかにし、さらにその配置の意義を、特に分裂期における微小管との結合効率といった観点から追究することを計画した。前年度までの細胞生物学的実験およびシミュレーションにより、ショウジョウバエ培養細胞において動原体が核中央付近にクラスター化していることを見出したが、このクラスター化の度合いと分裂期における微小管との結合効率に正の相関は認められなかった。平成21年度は、本計画のもうひとつの目標である自動画像解析と顕微鏡観察の自動化について研究を進めた。我々は、地元ガラス会社等の協力を得て、敷居を取り除いて96細胞サンプルを貼付けることのできる巨大なプレパラートを作成した。このプレパラートを用いると、対物レンズがサンプル間を移動する際に自動焦点装置が作用し続けることができ、複数サンプルの自動イメージングが可能となった(通常の96穴プレートでは、サンプル間にあるプラスチックの敷居が自動焦点装置の作用を中断させてしまう)。本システムを用いて、ショウジョウバエS2細胞の12サンプルについて、スピニングディスク型共焦点顕微鏡、100倍油浸レンズを用いて300の2色画像をわずか15分でイメージングすることに成功した。また、顕微鏡で撮影した核シグナルを目動認識しシグナル強度を測定するコシピュタープログラムも作製した。以上の成果は、自前の顕微鏡を用いた自動イメージング、自動画像解析を可能とするテクノロジーの基盤となる。

Report

(2 results)
  • 2009 Annual Research Report
  • 2008 Annual Research Report
  • Research Products

    (19 results)

All 2010 2009 2008 Other

All Journal Article (7 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (10 results) Remarks (2 results)

  • [Journal Article] New look inside the spindle : microtubule-dependent microtubule generation within the spindle.2010

    • Author(s)
      Goshima G, Kimura A.
    • Journal Title

      Curr Opin Cell Biol 22(1)

      Pages: 44-49

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The augmin complex plays a critical role in spindle microtubule generation for mitotic progression and cytokinesis in human cells.2009

    • Author(s)
      R Uehara, R Nozawa, A Tomioka, S Petry, RD Vale, C Obuse, G Goshima
    • Journal Title

      Proc Natl Acad Sci USA 106(17)

      Pages: 6998-7003

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article]2009

    • Author(s)
      Monica Bettencourt-Dias, Gohta Goshima
    • Journal Title

      Mitosis : Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology 545 Chapter3 : RNAi in Drosophila S2 Cells as a Tool for Studying Cell Cycle Progression(Humana Press)

      Pages: 39-62

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Journal Article]2009

    • Author(s)
      上原亮太・五島剛太
    • Journal Title

      蛋白質核酸酵素 2009年11月号 Vol. 54 No. 14(共立出版)

      Pages: 1850-5

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Journal Article] The augmin complex plays a critical role in spindle microtubule generation for mitotic progression and cytokinesis in human cells.2009

    • Author(s)
      Uehara R, Nozawa R, Tomioka S, Petry A, Vale RD, 0buse C, Goshima G
    • Journal Title

      Proc Natl Acad Sci USA 106(17)

      Pages: 6998-7003

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Augmin : a protein complex required for centrosome-independent microtubule generation within the spindle2008

    • Author(s)
      Goshima G, Mayer M, Zhang N, Stuurman, Vale RD
    • Journal Title

      J Cell Biol 5 ; 181 (3)

      Pages: 421-429

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Functional genoraic screen reveals genes involved in lipid droplet formation and utilization.2008

    • Author(s)
      Guo Y, Walther TC, Rao M, Stuurman N, Goshima G, Terayama K, Wong JS, Vale RD, Walter P, Farese Jr RV.
    • Journal Title

      Nature 9 ; 453 (7195)

      Pages: 657-661

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] A New Model Organism for Studying Microtubule Self-Organisation2009

    • Author(s)
      G.Goshima, Y.Nakaoka, M.Kubo, M.Hasebe, Y.Hiwatashi
    • Organizer
      THE AMERICAN SOCIETY FOR CELL BIOLOGY 49th Annua Meetings
    • Place of Presentation
      アメリカ、サンディアゴ
    • Year and Date
      2009-12-07
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Presentation] Augmin Is Required for De Novo Microtubule Generation during Central Spindle Formation2009

    • Author(s)
      R Uehara, G Goshima
    • Organizer
      THE AMERICAN SOCIETY FOR CELL BIOLOGY 49th Annua Meeting
    • Place of Presentation
      アメリカ、サンディアゴ
    • Year and Date
      2009-12-07
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Presentation] 細胞分裂期スピンドルの形成機構2009

    • Author(s)
      五島剛太
    • Organizer
      生化学若い研究者の会
    • Place of Presentation
      京都府、京都市
    • Year and Date
      2009-11-28
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Presentation] Microtubule generation within the spindle2009

    • Author(s)
      Gohta Goshima
    • Organizer
      2009 FASEB Summer Research Conference
    • Place of Presentation
      イタリア、ルッカ
    • Year and Date
      2009-09-04
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Presentation] Genome-Wide RNAi Screen Identifies Genes Required for Mitotic Spindle Formation in Animal Cells2009

    • Author(s)
      Gohta Goshima
    • Organizer
      The Ninth NIBB-EMBL Symposium
    • Place of Presentation
      愛知県、岡崎市
    • Year and Date
      2009-04-21
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Presentation] Centrosome-independent spindle microtubule generation requires the 8-subunit Augmin complex and g-TuRC2008

    • Author(s)
      五島剛太
    • Organizer
      米国細胞生物学会
    • Place of Presentation
      サンフランシスコMoscone Center
    • Year and Date
      2008-12-16
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Presentation] Microtubule generation within the mitotic spindle2008

    • Author(s)
      五島剛太
    • Organizer
      第2回国際「生体ナノシステムの制御」国際シンポジウム
    • Place of Presentation
      東京大学
    • Year and Date
      2008-11-02
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Presentation] スピンドル微小管の生成機構2008

    • Author(s)
      五島剛太
    • Organizer
      第79回日本動物学会
    • Place of Presentation
      福岡大学
    • Year and Date
      2008-09-05
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Presentation] ハイスループット全自動顕微鏡を用いた全ゲノムRNAiスクリーニング2008

    • Author(s)
      五島剛太
    • Organizer
      第80回日本遺伝学会(ランチョンセミナー)
    • Place of Presentation
      名古屋大学
    • Year and Date
      2008-09-03
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Presentation] オーグミン : 分裂期スピンドル形成に必要な微小管増幅因子2008

    • Author(s)
      五島剛太
    • Organizer
      第60回日本細胞生物学会
    • Place of Presentation
      パシフイコ横浜
    • Year and Date
      2008-06-29
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://bunshi4.bio.nagoya-u.ac.jp/~tenure2/goshima.html

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://bunshi4.bio.nagoya-u.ac.jp/~tenure2/goshiina.html

    • Related Report
      2008 Annual Research Report

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Published: 2008-04-01   Modified: 2016-04-21  

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