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哺乳動物の精子の性差の分子基盤の解明

Research Project

Project/Area Number 20658064
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Applied animal science
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

金井 克晃  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 准教授 (30260326)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 九郎丸 正道  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (00148636)
恒川 直樹  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教 (50431838)
Project Period (FY) 2008 – 2010
Project Status Completed (Fiscal Year 2009)
Budget Amount *help
¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
Fiscal Year 2009: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Fiscal Year 2008: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Keywords精子 / 性染色体 / 性化 / モデル動物 / 性比
Research Abstract

精子形成過程における精子のアレル差は、精巣内において円形精子細胞が分化する際に初めて生じる。円形精子細胞において、性染色体上の遺伝子群で、半数体で発現開始し、精子細胞間をつなぐ「細胞間橋」を容易に通過しにくい遺伝子産物であれば、その遺伝子発現によりX精子とY精子に差異が生じる。まず最初に、円形精子細胞以降の精子形成のアッセイ系を立ち上げるため、ヌードマウスの皮下への移植片において、長期にわたって安定的に半数体精子を産生する実験系の確立を行った。その結果、妊娠中期頃の胎子精巣を材料とし、中腎を一部残した状態での移植により、ヌードマウス皮下で恒常的に精子産生を行い、精巣上体精子まで産出可能な実験系の樹立に成功した。次に、精子のアレル差を誘導する発現ベクター候補について、既に報告されているHuファミリー遺伝子群の精子形成で発現解析を行った。その結果、HuRは、精母細胞、精子細胞に、HuBが、分化型の精祖細胞に発現していることが明らかとなった。また、これら2つのHu因子以外(HuC,HuD)は、精巣では顕著な発現が認められなかった。これらの結果は、Hu因子は、発現特異性ではなく、Hu蛋白の本来の機能で、アレル差が生じることが示唆され、そこで、精子間のHuR(RNA-binding protein)-EGFP融合キメラベクターを開発した。しかし、この開発の途中、アレル特異的な精子の排除の効率が極端に悪いことが判明し、Tcr遺伝子を用いたベクターが、mRNAレベルで「細胞間橋」を通過しにくい新たな知見が明らかとなった。これは、Tcr遺伝子の一部をHuR-EGFP融合ベクターに組み入れれば、本研究の狙いである「細胞間橋」を通過しにくい、精度の高いベクターとなることが強く示唆された。このため計画途中で、Tcr mRNAの3'-UTRをベクターに付加した新しいHuR-EGFP-Tct UTRベクターの開発に変更した。しかし、残念ながら、本ベクターによるアレル差を生じるTgマウスを樹立することは、現時点では成功していない。さらなるベクター改良による継続した研究が必要である。

Report

(2 results)
  • 2009 Annual Research Report
  • 2008 Annual Research Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2010 2009 2008 Other

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (2 results) Remarks (2 results)

  • [Journal Article] FGF signaling directs a center-to-pole expansion of tubulogenesis in mouse testis differentiation.2010

    • Author(s)
      Hiramatsu R, et al.
    • Journal Title

      Development

      Volume: 137 Pages: 303-312

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Evidence for crucial role of hindgut expansion in directing proper migration of primordial germ cells in mouse early embryogenesis.2009

    • Author(s)
      Hara K, et al.
    • Journal Title

      Dev Biol

      Volume: 330(2) Pages: 427-439

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The cerebellin 4 precursor gene is a direct target of SRY and SOX9 in mice.2009

    • Author(s)
      Bradford ST, et al.
    • Journal Title

      Biol Reprod

      Volume: 80(6) Pages: 1178-1188

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A newpreparation protocol for measurement of testicular sperm production.2008

    • Author(s)
      Choi, E. K. et al.
    • Journal Title

      J Reprod.Dev. 54

      Pages: 90-93

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Establishment of testis-speciflc SOX9 activation requires high-glucose metabolism ir.2008

    • Author(s)
      Matoba, S. et a1.
    • Journal Title

      Dev. Biol. 324

      Pages: 76-87

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 哺乳動物の性決定と性的可塑性2010

    • Author(s)
      金井克晃
    • Organizer
      大阪母子保健総合医療センター研究所セミナー
    • Place of Presentation
      大阪母子保健総合医療センター
    • Year and Date
      2010-03-04
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Presentation] 哺乳類の性決定および性分化機構シンポジウム「脊椎動物の性決定・性分化とステロイドホルモン」2008

    • Author(s)
      金井
    • Organizer
      第79回日本動物学会
    • Place of Presentation
      福岡大学
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.vm.a.u-tokyo.ac.jp/kaibo/seibunnka.html

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.vm.a.u-tokyo.ac.jp/kaibo/introduction.html

    • Related Report
      2008 Annual Research Report

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Published: 2008-04-01   Modified: 2016-04-21  

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