3種抗体、および、レンチウイルスを用いた移植腎生着延長の試み

• Project/Area Number: 20659254
• Research Category: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Urology
• Research Institution: Osaka Medical College
• Principal Investigator: 東 治人 Osaka Medical College, 医学部, 准教授 (40231914)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 勝岡 洋治 大阪医科大学, 医学部, 教授 (10051757) ; 高原 史郎 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 寄附講座教授 (70179547) ; 猪阪 善隆 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 寄付講座准教授 (00379166) ; 梨井 康 国立成育医療センター(研究所), 移殖・外科研究部, 室長 (60321890)
• Project Period (FY): 2008 – 2009
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2009)
• Budget Amount: ¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000); Fiscal Year 2009: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000); Fiscal Year 2008: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
• Keywords: CTLA4-Ig / ICOS-Ig / CD28-Ig / 免疫寛容 / MF-1遺伝子導入 / MF-1 / CTLA4-I

Research Abstract

「研究の目的」"CTLA4-IgとAnti-ICOS-IgおよびAnti-CD28-Igの併用投与による、強力な免疫学的寛容の導入により、異種移植を成功させることを目的としている。
異種移植モデル(Ginea pig-Rat)における免疫学的寛容導入、およびMF-1遺伝子治療のin vivoにおける効果の検討
a)CTLA4-IgとICOS-IgおよびCD28-Igの3種類の抗体を、投与量:それぞれ1.0mg/ml/day、投与日、投与回数:day-2,day0,day2の3回投与、day-2,day-1,day0,day1,day2,および、day-2,day0,day2,day4,day6の5回投与のすべての条件で治療効果を比較検討した。
b)実験モデル:Donor, Ginea pig ; Recipient, Lew rat
MF-1遺伝子を導入したGinea pigドナー腎をRatに腎移植する。レシピエントの固有腎は術当日に摘除。移植手術はすでに確立している。尿管のサイズが著明に異なるので尿管吻合にはステントカテーテルを用いる。無治療コントロール群の生存日数は4-7日である。
実験群:上記モデルを用いて次の4つの実験群を作成
Gp1)CTLA4-Ig,ICOS-IgおよびCD28-Igの併用投与治療群(n=54)
Gp2)CTLA4-Ig,ICOS-IgおよびCD28-Igの併用投与+MF-1遺伝子導入治療群(n=54)
Gp3)MF-1遺伝子導入治療群(n=54)Gp4)vehicleのみの対照群(n=54)
各グループでまずは、1day,2days,4days,7days,それぞれのtimepointで移植腎を摘出し凍結切片(免疫組織化学、molecular analysis用)と4%ホルマリン保存切片(病理組織用)を作成する。生着期間の延長を認めた場合には、更に14days,4weeks,16weeks(n=4/time point/group)のtimepointで移植腎を摘出し、免疫組織化学、molecular analysisを行ない、Gp1,Gp2,およびGp3における移植腎の機能、形態学的変化を詳細に検討する。更に生存日数の延長効果を検索するためそれぞれ6匹ずつ作成した。
c)効果判定:3)で示したと同様に検索
i)移植腎機能の評価、ii)移植腎生着延長効果の検討、病理組織学的検索、iv)免疫組織化学的検索、v)Molecular assay
「結果」
上記の全ての条件において、明らかな生着延長効果は得られず、また、摘出した移植腎は、組織学的に高度のvascular rejectionを呈する所見であり、新たな方法の検討が必要と考えられた。

Research Products

• [Journal Article] Association of PPAR- gamma with BCG immunotherapy (2009)
  • Author(s): Inamoto T, Azuma H, Ubai T, Katsuoka Y
  • Journal Title: Medica Hypotheses 72 Pages: 231-231
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Superagonistic CD28 antibody induces donor-specific tolerance in rat renal allografts. (2008)
  • Author(s): Azuma H, Isaka Y, Li X, Hunig T, Sakamoto T, Nohmi H, Takabatake Y, Mizui M, Kitazawa Y, Ichimaru N, Ibuki N, Ubai T, Inamoto T, Katsuoka Y, Takahara S.
  • Journal Title: Am J Transplant. 2 Pages: 2004-2014
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Donor specific tolerance induced bySuperagonistic CD28 antibody in rat renal allografts (2008)
  • Author(s): Azuma H, Isaka Y, Li X, Hunig T, Nohmi H, Takabatake Y, Mizui M, Kitazawa Y, Ichimaru N, Ibuki N, Ubai T, Inamoto T, Katsuoka Y, Takahara.
  • Organizer: The 7^<th> Korea-Japan Transplantation Forum
  • Place of Presentation: Soul, Korea
  • Year and Date: 2008-10-10
• [Presentation] Transfection of NFkB Decoy Oligodeoxynucleotides Using "Efficient Ultrasound-mediated Gene Transfer" into Donor Kidneys Prolonged Survival of Rat Renal Allografts (2008)
  • Author(s): H Azuma, H Nomi, N Ibuki, N Tomita, R Morishita, S Horie, S Takahara, Y Katsuoka.
  • Organizer: XXII International Congress of The Transplantation Society
  • Place of Presentation: Sydney, Autralia
  • Year and Date: 2008-08-11