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外傷歯の歯髄再生療法の基盤となる歯髄細胞の分化誘導法の確立

Research Project

Project/Area Number 20659296
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Conservative dentistry
Research InstitutionNiigata University

Principal Investigator

大島 勇人  Niigata University, 医歯学系, 教授 (70251824)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 大島 邦子  新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (80213693)
重谷 佳見  新潟大学, 医歯学系, 助教 (80397132)
依田 浩子  新潟大学, 医歯学系, 准教授 (60293213)
鈴木 啓展  新潟大学, 医歯学系, 助教 (60377190)
Project Period (FY) 2008 – 2009
Project Status Completed (Fiscal Year 2009)
Budget Amount *help
¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
Fiscal Year 2009: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2008: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Keywords組織幹細胞 / BrdU / 象牙芽細胞 / 歯髄 / GM-CSF / オステオポンチン / 移植 / マウス / ネスチン / 歯の移植 / 歯の再植 / 骨芽細胞
Research Abstract

【目的】歯の損傷後の歯髄治癒過程における象牙芽細胞分化機構ならびに胎生期ラベリング法によりマウス歯髄組織幹細胞をブロモデオキシウリジン(BrdU)によりラベルし、歯髄におけるBrdU label-retaining cells(LRCs)の分化能を解明することを目的に、歯の移植後の顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)およびオステオポンチン(OPN)の反応、LRCsの分化能を免疫細胞化学的に検索した。
【方法】妊娠後期ICRマウスに3~4日間BrdUを腹腔内投与し、生後3週後に深麻酔下で上顎第一臼歯抜去後に歯冠部を舌下部へ他家移植した。術後1日~2週後にアルデヒド系固定液で灌流固定し、EDTA脱灰後、パラフィン切片を作製し、抗GM-CSF・抗OPN・抗ネスチン抗体・抗BrdU鼎を用いた免疫染色を行った。なお無処置群の左側臼歯を対照群とした。
【結果と考察】対照群歯髄では、歯髄中央部血管周囲にLRCsが局在し、咬頭頂領域を中心に歯髄・象牙質界面に弱いオズテオポンチン陽性反応が見られ、象牙芽細胞はネスチン強陽性を示したが、歯髄内はGM-CSFは陰性であった。術後に歯髄のネスチン免疫陽性反応が消失したが、3~7日後に、GM-CSF陽性細胞、OPN陽性細胞の出現に引き続き、ネスチン陽性象牙芽細胞様細胞が歯髄・象牙質界面に再配列した。14日後には歯髄腔に骨組織形成が惹起されたが、骨芽細胞がOPN陽性反応を示した。GM-CSF陽性反応産物は象牙細管内にも見られ、既存の象牙質と再生象牙質の界面にOPN陽性反応が観察された。さらに、in situ hybridizationによりOPN遺伝子発現を検索ると、免疫反応とほぼ同じ発現パターンを示した。また、LRCsは再生象牙芽細胞にコミットされていた。以上より、歯の移植後の歯髄治癒過程における象牙芽細胞の分化には、GM-CSF発現とOPN発現が重要な役割を果たし、LRCsが象牙芽細胞に分化することが明らかとなった。

Report

(2 results)
  • 2009 Annual Research Report
  • 2008 Annual Research Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2009 2008

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results) Presentation (3 results) Book (2 results)

  • [Journal Article] Pulpal regeneration following allogenic tooth transplantation into mouse maxilla2009

    • Author(s)
      Unno H
    • Journal Title

      Anat Rec 292

      Pages: 570-579

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Chick tooth induction revisited2009

    • Author(s)
      Cai J
    • Journal Title

      J Exp Zoolog B Mol Dev Evol 312B

      Pages: 465-472

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] ERK activation is involved in tooth development via FGF10 signaling2009

    • Author(s)
      Cho KW
    • Journal Title

      J Exp Zoolog B Mol Dev Evol 312

      Pages: 901-911

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Pulpal regeneration following allogenic tooth transplantationinto mouse maxilia2009

    • Author(s)
      Unno H
    • Journal Title

      Anatomical Record 292

      Pages: 570-579

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Capacity of dental pulp differentiation in mouse molars as demonstrated by allogenic tooth transplantation2008

    • Author(s)
      Takamori Y
    • Journal Title

      Journal of Histochemistry and Cytochemistry 1075

      Pages: 1075-1086

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cell dynamics in the pulpal healing process following cavity preparation in rat molars2008

    • Author(s)
      Harada M
    • Journal Title

      Histochemistry and Cell Biology 130

      Pages: 773-783

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      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Putative dental pulp stem cells in growing teeth & their regenerative capacity2009

    • Author(s)
      Ohshima H
    • Organizer
      2nd TERMIS World Congress in conjunction with 2009 Seoul Stem Cell Symposium
    • Place of Presentation
      ソウル(韓国)
    • Year and Date
      2009-09-03
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Presentation] Responses of dental pulp stem cells against exogenous stimuli2009

    • Author(s)
      Ohshima H
    • Organizer
      15th APEC & 7th KAE-JEA Joint Meeting
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2009-04-25
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  • [Presentation] マウス舌下部への臼歯および歯冠部の他家移植後の歯髄組織幹細胞の動態と硬組織形成能について2009

    • Author(s)
      大島勇人
    • Organizer
      第114回日本解剖学会総会・全国学術集会
    • Place of Presentation
      岡山
    • Year and Date
      2009-03-28
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  • [Book] エナメル質,その形成,構造,組成と進化,再生2009

    • Author(s)
      脇田稔
    • Total Pages
      286
    • Publisher
      蓼科印刷株式会社
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  • [Book] カラーアトラス口腔組織発生学2009

    • Author(s)
      磯川桂太郎
    • Total Pages
      134
    • Publisher
      わかば出版
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      2008 Annual Research Report

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Published: 2008-04-01   Modified: 2016-04-21  

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