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蛋白局在オシレーションの研究

Research Project

Project/Area Number 20770169
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Developmental biology
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

木田 泰之  東北大, 加齢医学研究所, 助教 (20396526)

Project Period (FY) 2008 – 2009
Project Status Completed (Fiscal Year 2009)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2009: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
Fiscal Year 2008: ¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000)
KeywordsWnt / Crip2 / Paxillin
Research Abstract

申請者が最近新たに同定したCrip2蛋白は、Wntと強調的に働くT-Box型転写因子Tの標的であり、脊索細胞内で90秒サイクルの集積/分散を繰り返していた。このような蛋白の集積振動(オシレーティング蛋白局在)メカニズムはどのようなものであるか。細胞外からのシグナルを、オシレーティング蛋白局在として表現する「オシレーション誘導・維持メカニズム」を、細胞生物学・情報学(バイオインフォマティクス)の両面から明らかにすることを目的とした研究を行った。
結果1. Wnt制御因子としてのCrip2の役割を解明したCrip2はWnt依存的にJNKを活性化する。一方、活性化されたJNKは接着班の動的形成に重要なPaxillinと結合し、それをリン酸化する。Crip2がPaxillinと結合するデータも得ているので、Wnt/Crip2経路は、JNK/Paxillin/細胞移動へと繋がっていくと考えられる。本研究ではJNKの活性化とPaxillinのリン酸化を調べたが、リン酸化の変化は確認できなかった。しかしながら、Crip2強制発現マウスを作製し、in vivoでの共局在を高解像度で解析した結果、Crip2はPaxillinは、Forcal-contactでは結合するが、さらに移動端に近い部分ではCrip2がPaxillin非依存的に存在していることがわかった。結果、Crip2はPaxiillin依存的なForcal-contactの安定性を誘導することが明らかとなった。2. 細胞移動におけるCrip2の役割Crip2は、細胞移動端においてオシレーティング蛋白局在することから、脊索内におけるDvl2、JNK、Paxillinの集積をin vivo分子イメージングにて検討したが、解像度等によるテクニカルな問題をクリアできずに、その確認は出来なかった。
3. 転写因子(転写制御因子)Crip2の機能解析B-cateninの標的配列をレポーターにしたTOP-fiashによるルシフェラーゼアッセイを行った結果、β-cateninの転写活性を抑制する機能を持つことが分かった。

Report

(1 results)
  • 2008 Annual Research Report
  • Research Products

    (1 results)

All 2008

All Presentation (1 results)

  • [Presentation] PETA3 is a novel Wnt/PCP pathway component in zebrafish2008

    • Author(s)
      木田泰之
    • Organizer
      国際発生生物学会
    • Place of Presentation
      日本徳島
    • Year and Date
      2008-05-31
    • Related Report
      2008 Annual Research Report

URL: 

Published: 2008-04-01   Modified: 2016-04-21  

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