RT-RPA法による迅速・簡便な体液種同定法の開発

Research Project

Project/Area Number	20H01127
Research Category	Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	3240:Society medicine, nursing, and related fields
Research Institution	石川県警察科学捜査研究所
Principal Investigator	Kubo Seiji 石川県警察科学捜査研究所, 公務員
Project Period (FY)	2020-04-01 –
Project Status	Completed (Fiscal Year 2020)
Budget Amount *help	¥360,000 (Direct Cost: ¥360,000) Fiscal Year 2020: ¥360,000 (Direct Cost: ¥360,000)
Keywords	RT-RPA法 / 体液識別 / mRNA
Outline of Research at the Start	犯罪現場で採取される生体資料について、体液種の同定は犯罪の立証に極めて重要である。体液種の同定は、体液特異的に発現するmRNAの検出によって行われる。近年、迅速性や簡便性に優れたRNA検出法としてRT-RPA法が注目されている。RT-RPA法は等温増幅による反応系で、20分程度で反応が完了する。本研究では、体液特異的なmRNAを指標として、RT-RPA法による迅速・簡便な体液種同定法の開発を行う。
Outline of Final Research Achievements	本研究では、体液特異的なmRNA（血液:HBB、精液:PRM1）を指標としたRT-RPA法を開発した。反応条件を検討した結果、42℃の反応で20分以内に指標mRNAを検出できた。HBBの検出感度は0.02 ng、PRM1の検出感度は0.4 ngであった。また、他体液を含む混合試料からもHBB・PRM1を特異的に検出できた。以上の結果から、RT-RPA法は体液特異的なmRNAの迅速・簡便な検出法として利用できることを明らかにした。
Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements	法科学鑑定において体液識別検査は、犯罪の立証に極めて重要である。近年、高い特異性と検出感度を有するmRNAが体液識別の指標として注目されている。しかし、従来法（RT-qPCR法・エンドポイントRT-PCR法）は工程が多く、煩雑であるため、mRNA検出に時間と手間がかかる。本研究で開発したRT-RPA法はこういった問題を克服し、mRNAを指標とした体液識別検査の迅速化・簡便化に貢献できると考えられる。