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Elucidation of metabolic function of microbial dark matter CPR bacterial population in activated sludge and its isolation

Research Project

Project/Area Number 20H02287
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Review Section Basic Section 22060:Environmental systems for civil engineering-related
Research InstitutionHiroshima University

Principal Investigator

Kindaichi Tomonori  広島大学, 先進理工系科学研究科(工), 教授 (10379901)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 青井 議輝  広島大学, 統合生命科学研究科(先), 准教授 (40386636)
Project Period (FY) 2020-04-01 – 2024-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥17,550,000 (Direct Cost: ¥13,500,000、Indirect Cost: ¥4,050,000)
Fiscal Year 2023: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2022: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2021: ¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2020: ¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Keywords微生物ダークマター / CPR細菌群 / Patescibacteria / 分離培養 / 活性汚泥
Outline of Research at the Start

活性汚泥にはいわゆる微生物ダークマターと呼ばれている門レベルの系統分類群を構成するCPR(Candidate Phyla Radiation)細菌群が無視できない割合(4~13%)で存在している場合がある。本研究では、活性汚泥内で安定的に培養されているCPR細菌群の代謝機能と下水処理プロセス内での生態学的役割を解明し、さらには集積培養およびその後の分離培養を試みる。具体的には、①メタゲノム解析による存在量と代謝機能の同時把握、②MAR-FISH法による基質利用特性の把握、③高濃度微生物保持リアクターによる集積培養、④新しいコンセプトに基づく分離培養法の四つの技術を組み合わせて目的を達成する。

Outline of Final Research Achievements

We selected activated sludge with relatively high Patescibacteria abundance, extracted DNA from activated sludge samples, and reconstructed 10 high-quality Patescibacteria genomes by metagenomic analysis. Furthermore, the full length of the 16S rRNA gene sequence in the Patescibacteria genome was extracted, and fluorescent in situ hybridization (FISH) probes specific for Patescibacteria were successfully designed using the phylogenetic tree generation software ARB. by FISH method. The results suggest that bacterial cells in the phylum BD1-5 exist near the cells hybridized with Zoogloea spp. present in activated sludge, suggesting that they have established a parasitic-symbiotic relationship.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

既往のメタゲノム解析では、あるPatescibacteriaはゲノムサイズが非常に小さく、生命に必須の呼吸や核酸合成などの遺伝子群が欠落していることが分かっているPatescibacteriaが活性汚泥を含めてどのように生存しているかを解明することは、38億年前の地球上の初期生命の進化の理解へとつながり、微生物ダークマターの謎にせまることができる。メタゲノム解析は環境微生物学の分野で主流になっているが、ゲノム情報からの推察では不十分な点が多い。特に本研究のように可視化することで細胞サイズや他細菌との共生関係など分離培養へと繋がる情報が得られたことの意義は大きい。

Report

(5 results)
  • 2023 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2022 Annual Research Report
  • 2021 Annual Research Report
  • 2020 Annual Research Report
  • Research Products

    (14 results)

All 2024 2023 2022 2021

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Open Access: 2 results) Presentation (11 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Metabolic Potential of the Superphylum <i>Patescibacteria</i> Reconstructed from Activated Sludge Samples from a Municipal Wastewater Treatment Plant2022

    • Author(s)
      Fujii Naoki、Kuroda Kyohei、Narihiro Takashi、Aoi Yoshiteru、Ozaki Noriatsu、Ohashi Akiyoshi、Kindaichi Tomonori
    • Journal Title

      Microbes and Environments

      Volume: 37 Issue: 3 Pages: n/a

    • DOI

      10.1264/jsme2.ME22012

    • ISSN
      1342-6311, 1347-4405
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Cometabolism of the Superphylum Patescibacteria with Anammox Bacteria in a Long-Term Freshwater Anammox Column Reactor2021

    • Author(s)
      Hosokawa Suguru、Kuroda Kyohei、Narihiro Takashi、Aoi Yoshiteru、Ozaki Noriatsu、Ohashi Akiyoshi、Kindaichi Tomonori
    • Journal Title

      Water

      Volume: 13 Issue: 2 Pages: 208-208

    • DOI

      10.3390/w13020208

    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 活性汚泥に存在する未培養細菌Patescibacteriaと宿主との関係2024

    • Author(s)
      藤井 直樹, 尾崎 則篤, 大橋 晶良, 金田一 智規
    • Organizer
      第58回日本水環境学会年会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 活性汚泥内に優占する未培養細菌の宿主特定の試み2023

    • Author(s)
      藤井 直樹, 青井 議輝, 大橋 晶良, 金田一 智規
    • Organizer
      第57回日本水環境学会年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] Biological Characteristics of the Superphylum Patescibacteria Stably Present in Activated Sludge.2022

    • Author(s)
      Naoki Fujii, Kyohei Kuroda, Takashi Narihiro, Yoshiteru Aoi, Noriatsu Ozaki, Akiyoshi Ohashi, Tomonori Kindaichi
    • Organizer
      12th Asian Symposium on Microbial Ecology ASME 2022
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 活性汚泥内に存在するPatescibacteriaのFISH法を用いた特異的検出2022

    • Author(s)
      藤井 直樹, 金田一 智規, 尾崎 則篤, 大橋 晶良
    • Organizer
      日本微生物生態学会第35回大会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 活性汚泥内に存在する微生物ダークマターPatescibacteriaの生態学的役割2022

    • Author(s)
      金田一 智規, 藤井 直樹
    • Organizer
      第29回衛生工学シンポジウム
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 未培養細菌門の活性汚泥内での役割を塩基配列から推測する2022

    • Author(s)
      藤井 直樹, 大橋 晶良, 尾崎 則篤, 金田一 智規
    • Organizer
      第59回下水道研究発表会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 活性汚泥内に安定的に存在する未培養細菌群の多様性とその代謝特性2022

    • Author(s)
      藤井 直樹, 大橋 晶良, 尾崎 則篤, 金田一 智規, 青井 議輝, 成廣 隆, 黒田 恭平
    • Organizer
      第74回土木学会中国支部研究発表会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 活性汚泥内で定常的に存在するPatescibacteriaの生物学的特徴2022

    • Author(s)
      藤井直樹, 大橋 晶良, 尾崎 則篤, 金田一 智規, 青井 義輝, 成廣 隆, 黒田 恭平
    • Organizer
      第56回日本水環境学会年会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 活性汚泥内に存在するPatescibacteriaの代謝特性2021

    • Author(s)
      藤井 直樹, 大橋 晶良, 尾崎 則篤, 金田一 智規
    • Organizer
      日本微生物生態学会第34回大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 活性汚泥内に存在するPatescibacteria のメタゲノム解析2021

    • Author(s)
      藤井直樹, 尾崎則篤, 大橋晶良, 金田一智規
    • Organizer
      第24回日本水環境学会シンポジウム
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 下水処理場の活性汚泥内に存在するPatescibacteria門のメタゲノム解析2021

    • Author(s)
      藤井 直樹, 大橋 晶良, 尾崎 則篤, 金田一 智規
    • Organizer
      第73回土木学会中国支部研究発表会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Book] 未培養微生物研究の最新動向2023

    • Author(s)
      青柳秀紀(藤井直樹・金田一智規 分担執筆, 青井 議輝 分担執筆)
    • Total Pages
      263
    • Publisher
      シーエムシー出版
    • ISBN
      9784781317328
    • Related Report
      2022 Annual Research Report

URL: 

Published: 2020-04-28   Modified: 2025-01-30  

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