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Research and development of real-time microscopic analysis technique for investigating protein-aggregation process

Research Project

Project/Area Number 20H02608
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Review Section Basic Section 29010:Applied physical properties-related
Research InstitutionIbaraki National College of Technology

Principal Investigator

WAKAMATSU Takashi  茨城工業高等専門学校, 国際創造工学科, 教授 (80220838)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 植 英規  福島工業高等専門学校, 電気電子システム工学科, 教授 (90586851)
尾形 慎  福島大学, 食農学類, 准教授 (10532666)
Project Period (FY) 2020-04-01 – 2024-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥17,550,000 (Direct Cost: ¥13,500,000、Indirect Cost: ¥4,050,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
Fiscal Year 2021: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
Fiscal Year 2020: ¥8,060,000 (Direct Cost: ¥6,200,000、Indirect Cost: ¥1,860,000)
Keywordsタンパク質 / ナノ粒子 / 凝集体 / タンパク質凝集 / 相分離 / 光散乱 / リアルタイム分析 / 顕微分析 / 凝集化プロセス
Outline of Research at the Start

溶液中のタンパク質凝集体に高感度な前方小角散乱光を顕微鏡スケールで瞬時に計測して、温度制御下の溶解状態からタンパク質凝集化をリアルタイムで分析できる新技術を開発する。開発分析システムにより、タンパク質の凝集体形成に伴う溶液構造の微視的挙動、タンパク質凝集体のサイズ・分布や構造のダイナミックスを顕微鏡観察的に高分解能で評価し、従来分析困難であった微視的スケールにおけるタンパク質凝集プロセスを解明する。

Outline of Final Research Achievements

We have developed a method and an apparatus for characterizing protein aggregation process by simultaneous measurements of static and dynamic light scattering at small angles, which enables to real-timely and microscopically measure the aggregation from dissolution state, and evaluated aggregation of polystyrene latex and lysozyme protein.
The demonstration shows that the diffusion-dominative aggregation for colloidal particles with electrolyte ions has a strong fluctuation in aggregate form, and reveals the aggregates are ununiformly grown in liquid with distributions of the size and the structure, as contrasted with reaction-dominative aggregation such ligand combination.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

タンパク質凝集体の分析評価は、抗体診断薬や治療薬等のバイオ医薬品をはじめ、化粧品や機能性食品等の分野における研究開発で非常に重要であるが、タンパク質凝集体は温度や溶液条件などの外的・内的要因に敏感で不安定であるがゆえに、サブミクロンスケールにおける凝集体の分析評価法は未だ確立されていない。
本研究では、前方静的光散乱と前方動的光散乱を同時に瞬時計測(前方散乱光の動画撮影)してタンパク質等のコロイドの凝集体形成をリアルタイムで分析できる基盤技術を開発し、典型的なコロイドの凝集化プロセスを明らかにした。

Report

(5 results)
  • 2023 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2022 Annual Research Report
  • 2021 Annual Research Report
  • 2020 Annual Research Report
  • Research Products

    (15 results)

All 2024 2023 2022 2021

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (11 results) Book (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (2 results)

  • [Journal Article] In situ characterization of the agglutination of lectins via cross-linking of carbohydrates by time-resolved measurement of forward static light scattering2023

    • Author(s)
      Makoto Ogata, Takashi Onoda, and Takashi Wakamatsu
    • Journal Title

      Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry

      Volume: 87 Issue: 9 Pages: 1036-1044

    • DOI

      10.1093/bbb/zbad082

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 動的エバネッセント光散乱による結晶化前のタンパク質凝集体の評価2024

    • Author(s)
      大川内健太、車田颯人、若松孝、植英規、田中大輔
    • Organizer
      第71回応用物理学会春季学術講演会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 静的・動的前方光散乱の画像計測によるリゾチーム凝集化分析2023

    • Author(s)
      若松孝、尾形慎、植英規
    • Organizer
      第23回日本蛋白質科学会年会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 静的・動的低角光散乱の同時計測によるポリスチレンラテックスの電解質凝集の特性2023

    • Author(s)
      若松孝、尾形慎、植英規
    • Organizer
      第33回日本MRS年次大会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 動的エバネッセント光散乱による溶液中のタンパク質凝集体の評価2023

    • Author(s)
      大川内健太、山田果歩、若松孝、車田颯人、植英規、田中大輔
    • Organizer
      第33回日本MRS年次大会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 前方静的・動的光散乱のリアルタイム計測によるリゾチーム凝集化分析2022

    • Author(s)
      若松孝、尾形慎、植英規
    • Organizer
      第16回バイオ化学関連シンポジウム
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] タンパク質凝集に高感度な前方静的・動的光散乱の同時計測技術の開発(II)2022

    • Author(s)
      若松孝、尾形慎、植英規
    • Organizer
      2022年第83回応用物理学会秋季学術講演会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] エバネッセント光散乱によるハンギングドロップ蒸気拡散液滴中のリゾチーム凝集化分析2022

    • Author(s)
      車田颯人、田中大輔、尾形慎、植英規、若松孝
    • Organizer
      2022年電気関係学会東北支部連合大会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 時間分解前方光散乱測定による糖鎖クラスター‐レクチン架橋凝集反応のその場分析2022

    • Author(s)
      尾形慎、小野田崇司、若松孝
    • Organizer
      第16回東北糖鎖研究会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] タンパク質凝集に高感度な前方静的・動的光散乱の同時計測技術の開発2022

    • Author(s)
      若松孝、尾形慎、植英規
    • Organizer
      2022年第69回応用物理学会春季学術講演会
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      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 時間分解前方光散乱測定による糖鎖‐レクチン架橋凝集のダイナミクス2021

    • Author(s)
      尾形慎、小野田崇司、植英規、若松孝
    • Organizer
      第21回日本蛋白質科学会年会
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      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 前方光散乱瞬時計測による糖鎖‐レクチン架橋反応凝集のダイナミック評価2021

    • Author(s)
      若松孝、小野田崇司、植英規、尾形慎
    • Organizer
      2021年第68回応用物理学会春季学術講演会
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
  • [Book] タンパク質の構造解析手法とIn silico スクリーニングへの応用事例 (第1章第5節 タンパク質凝集体の分析法と結晶化分析)2023

    • Author(s)
      若松 孝 (分担)
    • Total Pages
      530
    • Publisher
      技術情報協会
    • ISBN
      9784861049958
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 特許権2022

    • Inventor(s)
      若松孝、植英規、尾形慎
    • Industrial Property Rights Holder
      国立高等専門学校機構、福島大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2022
    • Acquisition Date
      2023
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 特許権2022

    • Inventor(s)
      若松孝、植英規、尾形慎
    • Industrial Property Rights Holder
      国立高等専門学校機構、福島大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2022
    • Related Report
      2021 Annual Research Report

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Published: 2020-04-28   Modified: 2025-01-30  

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