| Project/Area Number |
20J12816
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 国内 |
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| Review Section |
Basic Section 44050:Animal physiological chemistry, physiology and behavioral biology-related
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
早坂 亮祐 慶應義塾大学, 政策・メディア研究科, 特別研究員(DC2)
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| Project Period (FY) |
2020-04-24 – 2022-03-31
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| Project Status |
Discontinued (Fiscal Year 2021)
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| Budget Amount *help |
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
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| Keywords | 細胞外小胞 / メタボロミクス / リピドミクス / サイズ排除クロマトグラフィー / オンコメタボライト / エクソソーム / がん |
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| Outline of Research at the Start |
がん細胞が放出する直径30~150 nmの小胞であるエクソソームは、遠隔転移や血管新生をはじめとするがんの進展に関与する。エクソソーム中には、miRNAやタンパク質など多数の生体構成分子群が含まれ、精力的に研究されているが、依然として代謝物質については不明点が多い現状にある。本研究では、オンコメタボライト（がん関連代謝物）に着目し、高感度なメタボローム解析により、細胞とエクソソームにおける代謝物質の関係性を明らかにし、エクソソームの臓器特異性等への影響を検討する。
また、エクソソームのマルチオミックス解析を実施し、エクソソームを介したがん細胞の悪性化に関わる分子メカニズムの一端も解明したい。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、エクソソームのメタボローム解析法を構築し、エクソソームの代謝物質の特徴を明らかにし、エクソソームを介したがんの進展メカニズムの一端の解明を目指した。
分取HPLCとサイズ排除クロマトグラフィーを組み合わせて、半自動的にエクソソームを回収可能なシステムを構築した。大腸がん細胞株の培養上清から構築したサイズ排除クロマトグラフィー法と超遠心法でエクソソームを回収し、液体クロマトグラフィー/質量分析法、キャピラリーイオンクロマトグラフィー/質量分析法、超臨界流体クロマトグラフィー/質量分析法を用いて、同一サンプルから親水性代謝物質と脂質の一斉分析を行った。その結果、回収方法によって、代謝物質プロファイルが異なっており、サイズ排除クロマトグラフィー法において、エクソソーム特有の代謝物質プロファイルが顕著に観察された。
また、構築した手法を用いて、がんの発がんに関与する代謝物質であるオンコメタボライトの1つを多量に産生する変異株と野生株由来のエクソソームを回収し、メタボローム解析した。オンコメタボライト多量産生株は多くのエクソソームを放出していた。エクソソーム中でそのオンコメタボライトが含有し、代謝物質プロファイルも大きく変化することが観察された。エクソソームががんの悪性化に関与する代謝物質を含んでいる可能性が示唆された。
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| Research Progress Status |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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